因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的判定方法技术

本发明专利技术的课题在于：提供能够早期且简便地判定因突触功能不全引起的疾病、或附带突触功能不全的疾病的有无发病或重症度的判定方法，并且提供因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的治疗剂、预防剂的筛选方法。本发明专利技术提供一种判定方法，其能够通过以脑发育调节蛋白A关联蛋白质(DARPs)作为指标来判定因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的有无发病的或重症度的判定方法、或者以脑发育调节蛋白A关联蛋白质(DARPs)作为指标来筛选因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的治疗剂、预防剂的筛选方法，从而早期且简便地判定这些疾病，本发明专利技术有助于对这些疾病的药物的开发研究。明有助于对这些疾病的药物的开发研究。明有助于对这些疾病的药物的开发研究。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的判定方法


[0001]本专利技术涉及一种能够早期且简便地判定因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的有无发病或重症度的判定方法、因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的预防剂和/或治疗剂的筛选方法、用于在该判定方法或该筛选方法中使用的抗体、用于进行该判定方法的试剂盒。

技术介绍

[0002]痴呆症的主要原因即阿尔茨海默病是不可逆的进行性脑疾病，其是由脑中的突触陷入功能不全而产生的。近年来，阿尔茨海默病患者的增加成为社会关注的重大问题，期望能确立其早期诊断方法或治疗药。在阿尔茨海默病患者的死后脑中观察到老年斑，已知其是“淀粉样蛋白β蛋白质”的聚集体(淀粉样蛋白斑)。据报道，淀粉样蛋白β蛋白质的沉积是在病理学上能确认到的最早期的病变，淀粉样蛋白β蛋白质聚集并直接表现出神经细胞毒性。而且，目前被广泛接受的是：根据家族性阿尔茨海默病患者的基因分析，淀粉样蛋白β蛋白质的产生和蓄积的异常与阿尔茨海默病的发病存在广泛的关联。这被称为淀粉样蛋白级联假说。由此，通过众多的研究已广泛接受淀粉样蛋白β蛋白质是阿尔茨海默病的主要原因(非专利文献1)。另外，可知淀粉样蛋白β蛋白质向脑中的蓄积是从距发病20年以上以前就开始的。
[0003]除了阿尔茨海默病以外，还已知因脑血流降低(抑郁症等)、脑出血、脑梗塞等也会产生突触功能不全。进而，还已知线粒体的基因疾病、糖尿病导致的痴呆症等。另外，有时也会因药物依赖等而引起突触功能不全。在这些因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病中，认为因突触功能不全而使得认知功能降低，但其难以诊断。例如，阿尔茨海默病的诊断可以仅通过在死亡后进行病理解剖来确诊，生前的诊断通过提问式检查或图像检查进行，但都是出现自觉症状后的诊断，实际情况是不能开始早期的治疗。另外，还有报道能够通过脑脊髓液中的淀粉样蛋白β42蛋白质的浓度降低来进行阿尔茨海默病的诊断(非专利文献2)，但存在由于是侵袭性高的检查而难以对高龄者应用的问题。另外，现状所使用的阿尔茨海默病的治疗药都是抑制症状的药，不存在有关根治的药物。另外，在其他的因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病中，也依赖于提问式检查(抑郁症、痴呆症等)或图像检查(脑出血等)，不存在用于简便且早期地诊断的方法。
[0004]本专利技术人们在世界上首次发现在生成过程的神经细胞中大量表达的作为肌动蛋白结合蛋白的脑发育调节蛋白(Drebrin)(例如，参照非专利文献3及4)，并且已经证明：该脑发育调节蛋白通过改变肌动蛋白纤维的性状来参与神经细胞的形态形成、尤其是突起形成(例如，参照非专利文献5～7)；生成过程中移动的神经细胞存在于全部的细胞体和突起中，但成熟的神经细胞特异性地存在于棘结构(树突棘)中(例如，参照非专利文献8～10)。脑发育调节蛋白存在胚胎型(embryonic type)的脑发育调节蛋白E和成体型(adult type)的脑发育调节蛋白A这两种亚型(例如，参照非专利文献4)，在成熟神经细胞的树突棘中特
异性地呈现的脑发育调节蛋白A具有仅在神经细胞中表达的特征(例如，参照非专利文献9和10)。本专利技术人们还报道在阿尔茨海默病等痴呆性疾病中树突棘的脑发育调节蛋白大范围消失(非专利文献11)。
[0005]现有技术文献
[0006]非专利文献
[0007]非专利文献1：齐藤贵志、西道隆臣“阿尔茨海默病的模型小鼠”，日药理志(Folia Pharmacol.Jpn.)144，250
‑
252，2014
[0008]非专利文献2：J.Neurol.Sci.148,41
‑
45,1997
[0009]非专利文献3：J.Neurochem.44,1210
‑
1216,1985
[0010]非专利文献4：J.Biochem.117,231
‑
236,1995
[0011]非专利文献5：J.Neurosci.Res.38,149
‑
159,1994
[0012]非专利文献6：Exp.Cell Res.215,145
‑
153,1994
[0013]非专利文献7：J.Biol.Chem.269,29928
‑
29933,1994
[0014]非专利文献8：J.Neurosci.15,7161
‑
7170,1996
[0015]非专利文献9：Dev.Brain Res.29,233
‑
244,1986
[0016]非专利文献10：Brain Res.413,374
‑
378,1987
[0017]非专利文献11：J Neurosci.Res.43(1),87
‑
92,1996

技术实现思路

[0018]专利技术要解决的课题
[0019]如上所述，现状是不能早期且简便地判定因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病。而且，不能直接地治疗突触功能不全，例如在阿尔茨海默病的治疗中也达不到根治，现状是进行对症疗法。本专利技术的课题在于提供能够早期且简便地判定因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的有无发病或重症度的判定方法，并且提供因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的治疗剂、预防剂的筛选方法。
[0020]用于解决课题的手段
[0021]本专利技术人们基于在阿尔茨海默病等痴呆性疾病中树突棘的脑发育调节蛋白A大范围消失的见解，认为在阿尔茨海默病患者中脑发育调节蛋白A从神经细胞漏出至血液中。因此，为了检测血液中的脑发育调节蛋白A，按照常规方法进行蛋白A/G磁珠(Protein A/G beads)处理以除去血液中的抗体，之后，使用识别脑发育调节蛋白A及脑发育调节蛋白E的抗脑发育调节蛋白抗体，供于蛋白质印迹(Western blotting)法，但是不能确认脑发育调节蛋白的条带。慎重起见，本专利技术人们针对血液试样的基于蛋白A/G磁珠的沉降级分使用抗脑发育调节蛋白抗体供于蛋白质印迹法，结果与预想相反，能够在约130kDa的位置确认脑发育调节蛋白的条带。为了确认该脑发育调节蛋白的条带是否为脑发育调节蛋白A，针对血液试样的基于蛋白A/G磁珠的沉降级分采用抗脑发育调节蛋白A抗体进行蛋白质印迹，结果发现，约130kDa的条带虽然不是脑发育调节蛋白A全长而是脑发育调节蛋白E，但是能够检测到多条比脑发育调节蛋白A全长小的分子量的条带(其能够通过抗脑发育调节蛋白A抗体来检测)。对于在此所检测到的条带，认为是具有对脑发育调节蛋白A基因具有特征性的Ins2序列的翻译肽的脑发育调节蛋白A的片段、或者剪接变异体(splice variant)。本专利技术
人们进一步反复研究，发现这样的脑发育调节蛋白A关联蛋白质(DARPs：Drebrin A Related Proteins)大多存在于来自罹患因突触功能不全引起的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的发病风险、或者有无发病的判定方法，其特征在于，包括以下的步骤(a
‑
1)～步骤(c
‑
1)：步骤(a
‑
1)，对从受试者提取的生物体试样中的脑发育调节蛋白A关联蛋白质(DARPs)的浓度进行测定；步骤(b
‑
1)，将步骤(a
‑
1)中测定得到的DARPs的浓度与对照者中的DARPs的浓度进行比较，所述对照者未发生因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病；步骤(c
‑
1)，当步骤(a
‑
1)中测定得到的DARPs的浓度比所述对照者中的DARPs的浓度高时，评价为所述受试者发生因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的风险高、或者已发生因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的可能性高。2.一种因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的重症度的判定方法，其特征在于，包括以下的步骤(a
‑
2)～步骤(c
‑
2)：步骤(a
‑
2)，对从受试者提取的生物体试样中的脑发育调节蛋白A关联蛋白质(DARPs)的浓度进行测定，所述受试者已发生因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病；步骤(b
‑
2)，将步骤(a
‑
2)中测定得到的DARPs的浓度与对照者中的DARPs的浓度进行比较，所述对照者已发生因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病；步骤(c
‑
2)，当步骤(a
‑
2)中测定得到的DARPs和/或DARPs自身抗体的浓度比所述对照者中的DARPs和/或DARPs自身抗体的浓度高时，评价为所述受试者与所述对照者相比因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病重症化的可能性高。3.一种因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的预防剂、或者因突触功能不全引起的疾病或附带突触功能不全的疾病的治疗剂的筛选方法，其特征在于，包括以下的步骤(a
‑
3)～步骤(c
‑
3)：步骤(a
‑
3)，对从施用了被检物质的突触功能不全模型非人动物提取的试样中的脑发育调节蛋白A关联蛋白质(DARPs)的浓度进行测定；步骤(b
‑
3)，将步骤(a
‑
3)中测定得到的脑发育调节蛋白A关联蛋白质(DARPs)的浓度与未施用所述被检物质的突触功能不全模型非人动物中的脑发育调节蛋白A关联蛋白质(DARPs)的浓度进行比较；步骤(c
‑
3)，当步骤(a
...

【专利技术属性】
技术研发人员：白尾智明，
申请(专利权)人：阿尔梅德公司，
类型：发明
国别省市：