一种新型脂滴、溶酶体双靶向可变色荧光探针的制备及其应用制造技术

本发明专利技术提供新型脂滴、溶酶体双靶向可变色荧光探针的制备及其应用，涉及脂滴溶酶体双靶向荧光探针技术领域，其包括化合物DPABP

【技术实现步骤摘要】
一种新型脂滴、溶酶体双靶向可变色荧光探针的制备及其应用


[0001]本专利技术涉及脂滴溶酶体双靶向荧光探针
，尤其涉及一种新型脂滴、溶酶体双靶向可变色荧光探针的制备及其应用。

技术介绍

[0002]脂滴(LD)是由含有特殊组分的磷脂单分子层包裹中性的脂质核所形成的富含脂质的细胞器，存在于大多数物种和细胞类型中。脂滴的大小和生长与肥胖密切相关，具备很强的储脂能力，其生长的分子机制尚不明确。近些年的研究表明，脂滴在细胞中承担着与其他细胞器相互作用调节新陈代谢和维持能量平衡等很重要的作用。在细胞生长的过程中，当细胞膜需要膨胀时，脂滴内核中的甘油三酯会通过脂解作用或噬脂作用产生脂肪酸从而供给膜的生物合成；脂滴储存容量的增加会引起未折叠蛋白响应(UPR)机制的上调从而缓解内质网应激反应而胞内脂滴的异常是各种疾病的标志，例如脂肪肝病，高脂血症和II型糖尿病。另一个重要的细胞器是溶酶体，它是一种酸性细胞器，用于消化和去除细胞中的内源性和内吞性物质。事实上，脂滴和溶酶体在某些生物过程中也相互关联，并且脂滴中的组分可被溶酶体酶降解。此外，脂滴和溶酶体之间的相互作用与溶酶体贮积病和慢性炎症有很大关系。因此，监测脂滴和溶酶体之间的动态过程对其相关疾病的治疗具有重要意义。总的来说，一方面脂滴作为一种动态细胞器，它不但参与生物体内脂质体的新陈代谢，也调节膜的转移，参与蛋白质降解与信号传导过程。另一方面，脂滴与溶酶体协同作用对于细胞能量代谢起到关键性作用。
[0003]因此，开发出一种脂滴与溶酶体双靶向可探索脂滴与溶酶体相互作用的荧光探针，对于研究脂滴与溶酶体的功能与作用机理来说是非常具有实际应用意义的。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是为了解决现有技术中没有针对脂滴与溶酶体双靶向的探针的技术问题。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
[0006]一种基于HBI的席夫碱类化合物(DPABP
‑
BI)，其特征在于：所述化合物DPABP
‑
BI的结构式如下(I)：
[0007][0008]上述结构式中，R为甲基，羟甲基，溴乙基结构单元。
[0009]本申请还提供了化合物DPABP
‑
BI的应用包括：化合物DPABP
‑
BI在脂滴识别中的应用。
[0010]化合物DPABP
‑
BI在线粒体识别中的应用。
[0011]化合物DPABP
‑
BI在区分线粒体和脂滴中的应用。
[0012]化合物DPABP
‑
BI在识别斑马鱼体内脂肪类化合物中的应用。
[0013]一种化合物DPABP
‑
BI的制备方法，其特征在于：合成路线为：
[0014][0015]优选的，包含以下步骤：
[0016]I)1，3偶极环加成反应制备(II)所示的HBI衍生物；
[0017]2)通过式(II)所示的硝基HBI化合物在钯碳催化下与氢气发生氢化反应制备式(III)所示的化合物；
[0018]3)通过(III)所示的化合物与三(4
‑
甲酰苯基)胺发生醛胺缩合反应制备(I)所示的基于HBI的席夫碱类化合物；
[0019][0020]优选的，包含以下具体步骤：
[0021]将1当量的对硝基苯甲醛、1.2当量的乙胺溶液以及50mL乙醇加入100mL圆底烧瓶中，开启搅拌，在室温下搅拌过夜，反应结束后旋蒸移去溶剂，油泵抽干得到淡黄色固体1；
[0022]向50mL圆底烧瓶中加入1.5当量的2
‑
((1
‑
乙氧基亚乙基)氨基)乙酸甲酯、1当量的化合物1和15mL甲醇，室温反应20h，反应结束后过滤，沉淀用少量甲醇洗涤，滤液浓缩后静置使其析出沉淀，反复进行结晶洗涤浓缩的操作直至没有沉淀析出，收集得到淡黄色固体2；
[0023]向250mL双颈烧瓶中加入1当量的化合物2、10％的Pd/C和20mL乙醇，抽真空/充氢气3次，室温下反应30min，反应完全后，快速滤去Pd/C，滤液浓缩抽干并进行Ar气保护得化合物3，然后直接投入下一步反应，向25mL双颈烧瓶中加入1当量的三(4
‑
甲酰基苯基)胺和1.2当量的化合物3，抽真空/充Ar气三次，向反应体系中加入20mL乙醇，在30℃下反应2天，反应结束后快速柱层析分离，得红色固体DPABP
‑
BI。
[0024]本申请的化合物DPABP
‑
BI以HBI单元为中心，通过与三(4
‑
甲酰苯基)胺醛胺缩合得到席夫碱类化合物，具有大斯托克位移，红光发射，双光子激发，低自发光的特点。
附图说明
[0025]图1为本专利技术一实施方式中化合物DPABP
‑
BI在不同溶剂中的荧光发射谱图；
[0026]图2为本专利技术一实施方式中化合物DPABP
‑
BI对脂滴的靶向识别结果图；
[0027]图3为本专利技术一实施方式中化合物DPABP
‑
BI和商业化脂滴成像试剂BODIPY 493/503共定位分析图；
[0028]图4为本专利技术一实施方式中化合物DPABP
‑
BI对溶酶体的靶向识别结果图；
[0029]图5为本专利技术一实施方式中化合物DPABP
‑
BI和商业化溶酶体成像试剂LsyoBrite Blue共定位分析图；
[0030]图6为本专利技术一实施方式中化合物DPABP
‑
BI对脂滴和溶酶体同时成像图；
[0031]图7为本专利技术一实施方式中化合物DPABP
‑
BI对斑马鱼体内脂肪类物质的成像图。
具体实施方式
[0032]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，以下结合具体实施例，对本专利技术作进一步地详细说明。
[0033]在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本专利技术，但是，本专利技术还可以采用不同于在此描述的其他方式来实施，因此，本专利技术并不限于下面公开说明书的具体实施例的限制。
[0034]实施例1：
[0035]本申请提供了一种基于HBI(绿色荧光蛋白生色团)的席夫碱类化合物DPABP
‑
BI，所述DPABP
‑
BI的结构是如下(Ⅰ)：
[0036][0037]上述结构式(Ⅰ)中，R为甲基，羟甲基，溴乙基结构单元。
[0038]实施例2：
[0039]本申请还提供了所述DPABP
‑
BI的制备方法，合成路径如下：
[0040][0041]所述制备方法包含以下步骤：
[0042]S1：制备化合物1：使用乙醇、乙胺及对硝基苯甲醛在室温下反应得到化合物1。
[0043]具体的，在一实施方式中，将1当量的对硝基苯甲醛、1.2当量的乙胺溶液以本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于HBI的席夫碱类化合物(DPABP
‑
BI)，其特征在于：所述化合物DPABP
‑
BI的结构式如下(I)：2.化合物DPABP
‑
BI在脂滴识别中的应用。3.化合物DPABP
‑
BI在线粒体识别中的应用。4.化合物DPABP
‑
BI在区分线粒体和脂滴中的应用。5.化合物DPABP
‑
BI在识别斑马鱼体内脂肪类化合物中的应用。6.一种化合物DPABP
‑
BI的制备方法，其特征在于：合成路线为：7.根据权利要求6所述的化合物DPABP
‑
BI的制备方法，其特征在于：包含以下步骤：I)1，3偶极环加成反应制备(II)所示的HBI衍生物；2)通过式(II)所示的硝基HBI化合物在钯碳催化下与氢气发生氢化反应制备式(III)所示的化合物；3)通过(III)所示的化合物与三(4
‑
甲酰苯基)胺发生醛胺缩合反应制备(I)所示的基于HBI的席夫碱类化合物；
8.根据权利要求7所述的化合物DP...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘名轩，丁莹，朱鹏飞，张小玲，
申请(专利权)人：南通大学，
类型：发明
国别省市：