基于LNA-ASqPCR原理的检测人KRAS基因热点突变的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种基于LNA

【技术实现步骤摘要】
基于LNA
‑
AS qPCR原理的检测人KRAS基因热点突变的试剂盒及其应用


[0001]本专利技术涉及一种基于LNA
‑
AS qPCR原理的检测人KRAS基因热点突变的试剂盒及其使用方法和在检测KRAS基因热点突变中的应用，属于基因检测


技术介绍

[0002]激活表皮生长因子受体能引发RAS
‑
RAF
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MEK
‑
ERK细胞信号通路，其中KRAS基因编码的GTP结合蛋白发挥着重要作用。KRAS基因突变引发肿瘤生长、原癌转移及免疫抑制，在结直肠癌中可以检测到约30
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40%的KRAS基因突变。
[0003]2021年美国国家综合癌症网络（NCCN）中指出，转移性结直肠癌的KRAS突变是抗结直肠癌药物西妥昔、帕尼单抗的伴随诊断靶点。研究表明，KRAS突变也是结直肠原发灶肿瘤切除术的预后指标。2021年3月，中国临床肿瘤学会（CSCO）结直肠癌专家委员会发布了“结直肠癌分子标志物临床检测中国专家共识”，也将RAS（含KRAS本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于LNA
‑
AS qPCR原理的检测人KRAS基因热点突变的试剂盒，其特征是：包括用于检测热点突变的7条正向修饰引物、1条反向通用引物和1条Taqman检测探针；所述7条正向修饰引物的3
’
末端碱基均用LNA进行修饰，具体如下：G12C
‑
F：5
’
CTTGCCTACGCCACA3
’‑
LNA；G12S
‑
F：5
’
TCTTGCCTACGCCACT3
’‑
LNA；G12R
‑
F：5
’
TCTTGCCTACGCCACG3
’‑
LNA；G12V
‑
F：5
’
CTCTTGCCTACGCCAA3
’‑
LNA；G12D
‑
F：5
’
CTCTTGCCTACGCCAT3
’‑
LNA；G12A
‑
F：5
’
CTCTTGCCTACGCCAG3
’‑
LNA；G13D
‑
F：5
’
GCACTCTTGCCTACGT3
’‑
LNA；所述反向通用引物为：KRAS
‑
R：5
’
GCGTCGATGGAGGAGTTTGT3
’
；所述Taqman检测探针的5
’
端标记荧光基团，3
’
端标记淬灭基团，具体如下：5
’
CAATCATGAAAATTCCAGTTGACTGCAGACG3
’
。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征是：还包括参考反应所用的正向参考引物、反向参考引物和Taqman参考探针，参考引物为：KRAS
‑
F： 5
’
ATCGTCAAGGCACTCTTGCCTA3
’
；KRAS
‑
R ：5
’
GCGTCGATGGAGGAGTTTGT3
’
；Taqman参考探针的5
’
端标记荧光基团，3
’
端标记淬灭基团，具体如下：5
’ꢀ
CAATCATGA...

【专利技术属性】
技术研发人员：兰文军，胡岳，张静，
申请(专利权)人：山东信力科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：