二肽的制造方法技术

本发明专利技术的课题在于，提供具有提高了底物特异性的二肽合成活性的蛋白质、以及通过使用该蛋白质或具有生产该蛋白质的能力的微生物来降低目标二肽以外的副产物二肽且高效地制造目标二肽的方法。根据本发明专利技术，可以提供在序列号2所示的氨基酸序列、或由序列号2所示的氨基酸序列构成的蛋白质的突变蛋白或同源蛋白的氨基酸序列中与选自由第107位、第108位和第110位组成的组中的1个以上氨基酸残基相对应的氨基酸残基被置换为其它氨基酸残基后的氨基酸序列所构成的蛋白质，并且，通过使用生产该蛋白质的微生物，能够高效地制造二肽。能够高效地制造二肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】二肽的制造方法


[0001]本专利技术涉及具有提高了底物特异性的二肽合成活性的蛋白质、以及通过使用该蛋白质或具有生产该蛋白质的能力的微生物来降低目标二肽以外的副产物二肽且高效地制造目标二肽的方法。

技术介绍

[0002]据报道，属于芽孢杆菌属的微生物具有由ATP和2分子L
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氨基酸生成以α位的羧基形成肽键的二肽的L
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氨基酸α连接酶(专利文献1和非专利文献1)。L
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氨基酸α连接酶由于不需要氨基酸修饰、特殊的辅酶就能够合成二肽，因此对于二肽的高效的制造而言极为有用。但是，L
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氨基酸α连接酶的底物特异性低，存在生成作为副产物的目标二肽以外的二肽的问题。例如，非专利文献2公开了如下方法：将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)来源的编码具有L
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氨基酸α连接酶活性的蛋白质YwfE的DNA转化到大肠杆菌中，使用该转化体生产L
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丙氨酰基
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L
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谷氨酰胺，但是据报道，此时除了生成L
‑<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种蛋白质，其由序列号2所示的氨基酸序列中选自由第107位、第108位和第110位组成的组中的1个以上氨基酸残基分别被置换为以下的[1]～[3]中记载的氨基酸残基后的氨基酸序列构成，并且具有与具有序列号2所示的氨基酸序列的原始蛋白质相比提高了底物特异性的L
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氨基酸α连接酶活性，[1]对于第107位的氨基酸残基，选自由L
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丝氨酸、L
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丙氨酸、L
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组氨酸、L
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谷氨酰胺、L
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天冬氨酸、L
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谷氨酸、甘氨酸和L
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甲硫氨酸组成的组中的氨基酸残基，[2]对于第108位的氨基酸残基，选自由L
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苯丙氨酸、L
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甲硫氨酸、L
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丝氨酸、L
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脯氨酸、L
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苏氨酸、L
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丙氨酸、L
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酪氨酸、甘氨酸和L
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亮氨酸组成的组中的氨基酸残基，[3]对于第110位的氨基酸残基，选自由L
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甲硫氨酸、L
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缬氨酸、L
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丙氨酸、L
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天冬酰胺、L
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半胱氨酸、L
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色氨酸和L
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苯丙氨酸组成的组中的氨基酸残基。2.一种蛋白质，其由以下的[4]或[5]中记载的原始蛋白质的氨基酸序列中选自由与序列号2所示的氨基酸序列的第107位、第108位和第110位对应的氨基酸残基组成的组中的1个以上氨基酸残基分别被置换为[1']～[3']中记载的氨基酸残基后的氨基酸序列构成，并且具有与原始蛋白质相比提高了底物特异性的L
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氨基酸α连接酶活性，[1']对于与第107位对应的氨基酸残基，选自由L
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丝氨酸、L
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丙氨酸、L
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组氨酸、L
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谷氨酰胺、L
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天冬氨酸、L
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谷氨酸、甘氨酸和L
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甲硫氨酸组成的组中的氨基酸残基，[2']对于与第108位对应的氨基酸残基，选自由L
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苯丙氨酸、L
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甲硫氨酸、L
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丝氨酸、L
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脯氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：田畑健一郎，津田直人，足立雄悟，
申请(专利权)人：协和发酵生化株式会社，
类型：发明
国别省市：