一种香兰素分子的定量检测方法技术

本发明专利技术公开了一种检测灵敏、操作方法简单、准确度高的香兰素分子的定量检测方法，该定量检测方法选自以下任意一种或两种方式实现：1)将含有香兰素分子的待测溶液和托伦试剂混合后，然后加入3,3',5,5'

【技术实现步骤摘要】
一种香兰素分子的定量检测方法


[0001]本专利技术涉及一种有机化合物的定量检测方法，尤其涉及一种香兰素分子的定量检测方法，属于生物


技术介绍

[0002]香兰素，又称3
‑
甲氧基
‑4‑
羟基苯甲醛，是从香荚兰豆中提取的一种芳香有机化合物，具有香荚兰豆香气及浓郁的奶香，广泛应用于食品、饮料、化妆品等行业。然而，过量摄入香兰素会引起头晕、恶心、呼吸困难，因此发展快速、超灵敏的香兰素检测技术对食品安全和人类健康具有重要意义。
[0003]在过去的几年中，各种分析技术被用于测定香兰素，如气相色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳、电化学传感器和化学发光法。虽然这些分析技术具有良好的选择性和灵敏度，但高成本的分析设备、复杂的前处理和耗时的检测过程等局限性限制了它们的广泛应用。此外，单模式分析进行定量测定可能缺乏可靠性和精密度。相比之下，双模式检测方法的准确度更高，而且可以灵活应对不同的检测条件。
[0004]比色法是一种快速、简单、灵敏的技术，通常通过监测特定波长下分析物浓度变化引起的吸光度变化来实现。此外，比色法可以通过颜色变化进行“肉眼”检测，适合于快速检测。表面增强拉曼散射(SERS)光谱技术因其高特异性和灵敏度而被认为是一种潜在的生物分析和检测平台。然而，大多数SERS方法中制备SERS活性基底的过程都比较繁琐。因此，开发一种快速、简单、有效的策略来制备SERS活性基底具有重要意义。

技术实现思路

[0005]专利技术目的：本专利技术所要解决的技术问题时提供一种检测灵敏、操作方法简单、准确度高的香兰素分子的定量检测方法。
[0006]为解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：本专利技术提供了一种香兰素分子的定量检测方法，所述定量检测方法选自以下任意一种或两种方式实现：
[0007]1)将含有香兰素分子的待测溶液和托伦试剂混合后，然后加入3,3',5,5'
‑
四甲基联苯胺溶液得到混合溶液，采用紫外可见光谱仪测量吸光值，根据已知不同浓度的香兰素溶液与吸光值之间的线性关系方程得出待测溶液中香兰素的含量，所述香兰素浓度为0.5
‑
50μM；
[0008]2)将含有香兰素分子的待测溶液和托伦试剂混合后滴在硅片上，干燥后采用拉曼光谱仪测量拉曼信号，根据已知不同浓度的香兰素溶液与拉曼信号强度之间的线性关系方程得出待测溶液中香兰素的含量，所述香兰素浓度为10
‑4‑
10
‑
10
M。
[0009]其中，所述香兰素分子包括香兰素及其他与香兰素有相似结构的衍生物。
[0010]其中，所述与香兰素有相似结构的衍生物包括乙基香兰素、甲基香兰素、异香兰素、苯甲醛以及苯乙醛。
[0011]其中，所述方法1)中3,3',5,5'
‑
四甲基联苯胺溶液与托伦试剂的摩尔比为0.2
‑
0.35。
[0012]其中，所述方法1)中含有香兰素分子的待测溶液和托伦试剂的反应时间为15
‑
60s。
[0013]其中，所述方法1)中3,3',5,5'
‑
四甲基联苯胺溶液与托伦试剂的反应时间为30
‑
120s。
[0014]其中，所述方法1)中所述已知不同浓度的香兰素溶液与吸光值之间的线性关系方程包含在350nm处和490nm处的香兰素溶液与吸光值之间的线性关系方程中的一种或两种。
[0015]其中，所述在350nm处香兰素溶液与吸光值之间的线性关系方程为A＝0.0239C+0.183(R2＝0.9996)，A为350nm处吸光值，C为香兰素浓度。
[0016]其中，所述在490nm处香兰素溶液与吸光值之间的线性关系方程为A＝
‑
0.0178C+1.0559(R2＝0.994)，A为490nm处吸光值，C为香兰素浓度。
[0017]其中，所述方法2)中已知不同浓度的香兰素溶液与拉曼信号强度之间的线性关系方程为I＝3171.5log C+35133(R2＝0.992)，其中I为1040cm
‑1处的拉曼信号强度，C为香兰素浓度。
[0018]有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下显著优点：1、对香兰素的灵敏检测；2、本专利技术检测方法操作方便，比色法检测香兰素准确度更高，可实现三分钟内快速检测，同时明显的颜色变化可用裸眼定性分析；3、SERS法原位快速制备SERS活性基底，检测香兰素线性范围广，检测限更低，达10
‑
11
M；4、两种检测方法可以应对不同的样品检测。
附图说明
[0019]图1A为香兰素和托伦试剂反应产物的SEM图像，图1B为TMB和托伦试剂反应产物的SEM图像，图1C为香兰素和托伦试剂反应产物的TEM图像，图1D为TMB和托伦试剂反应产物的TEM图像，图1E为香兰素和托伦试剂反应产物的DLS图像，图1F为TMB和托伦试剂反应产物的DLS图像，图1G为香兰素和托伦试剂反应产物、TMB和托伦试剂反应产物的Zeta电位图；
[0020]图2A为香兰素与TMB分别和托伦试剂反应的机理图；图2B为托伦试剂和TMB检测香兰素的机理图；
[0021]图3A为加入不同浓度香兰素的样品溶液图像，图3B为加入不同浓度香兰素的样品溶液的吸光度图谱；图3C为350nm处样品溶液与香兰素浓度之间的线性关系，图3D为490nm处样品溶液与香兰素浓度之间的线性关系；
[0022]图4A为不同反应物的吸光值变化，图4B为托伦试剂
‑
香兰素
‑
TMB体系的TEM图；
[0023]图5A为不同摩尔比的TMB与托伦试剂溶液的吸光值变化图，图5B为不同反应时间下托伦试剂和香兰素溶液的吸光值变化图，图5C为不同反应时间下托伦试剂与TMB溶液的吸光值变化图；
[0024]图6为不同检测物与托伦试剂反应后的体系在350nm处的吸光度；
[0025]图7A为不同反应物的拉曼信号图，图7B为不同浓度香兰素和托伦试剂反应产物的拉曼散射光谱的变化图，图7C为1040cm
‑1处的拉曼信号强度与香兰素浓度之间的线性关系；
[0026]图8A为不同检测物和托伦试剂反应产物的拉曼散射光谱，图8B为不同检测物和托伦试剂反应产物在1040cm
‑1处的吸光度；
[0027]图9A为不同浓度的目标物香兰素在奶粉样品中的回收率；图9B为不同浓度的目标
物香兰素在咖啡样品中的回收率；图9C为香兰素在不同基质中和托伦试剂反应产物的拉曼散射光谱。
具体实施方式
[0028]下面结合附图对本专利技术的技术方案作进一步说明。
[0029]本实验中用到的试剂和仪器：
[0030]硝酸银、氢氧化钾购自国药化学试剂公司(中国上海)，氨水、3,3'，5,5'
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四甲基联苯胺、二甲基亚砜、香兰素、乙基香兰素、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种香兰素分子的定量检测方法，其特征在于，所述定量检测方法选自以下任意一种或两种方式实现：1)将含有香兰素分子的待测溶液和托伦试剂混合后，然后加入3,3',5,5'
‑
四甲基联苯胺溶液得到混合溶液，采用紫外可见光谱仪测量吸光值，根据已知不同浓度的香兰素溶液与吸光值之间的线性关系方程得出待测溶液中香兰素的含量，所述香兰素浓度为0.5
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50μM；2)将含有香兰素分子的待测溶液和托伦试剂混合后滴在硅片上，干燥后采用拉曼光谱仪测量拉曼信号，根据已知不同浓度的香兰素溶液与拉曼信号强度之间的线性关系方程得出待测溶液中香兰素的含量，所述香兰素浓度为10
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10
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M。2.根据权利要求1所述的香兰素分子的定量检测方法，其特征在于，所述香兰素分子包括香兰素及其他与香兰素有相似结构的醛类衍生物。3.根据权利要求1所述的香兰素分子的定量检测方法，其特征在于，所述与香兰素有相似结构的衍生物包括乙基香兰素、甲基香兰素、异香兰素、苯甲醛以及苯乙醛。4.根据权利要求1所述的香兰素分子的定量检测方法，其特征在于，方法1)中3,3',5,5'
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四甲基联苯胺溶液与托伦试剂的摩尔比为0.2
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0.35。5.根据权利要求1所述的香兰素分子的定量检测方法，其特征在于，方法1)...

【专利技术属性】
技术研发人员：卫伟，庄钰蓉，陈钰慧，
申请(专利权)人：东南大学，
类型：发明
国别省市：