一种帕金森病小鼠模型构建方法及应用技术

本发明专利技术属于生物技术领域，公开了一种帕金森病小鼠模型构建方法及应用，将A53T突变型及野生型α

【技术实现步骤摘要】
一种帕金森病小鼠模型构建方法及应用


[0001]本专利技术属于生物
，尤其涉及一种帕金森病小鼠模型构建方法及应用。

技术介绍

[0002]目前，帕金森病(Parkinson disease，PD)是常见于中老年人群的第二大神经系统变性疾病，研究存在三大难点：发病原因不明，发病机制不确定，治疗措施匮乏。帕金森病主要的神经病理学特征是中脑黑质多巴胺能神经元大量变性坏死，及变性神经元胞浆内嗜酸性包涵体—路易体(lewy body，LB)形成。α
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synuclein作为LB的主要成分，它的病理性聚集及毒性寡聚体的形成是PD临床症状发生、发展及受累脑区变性的主要原因。深入了解α
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synuclein寡聚体形成影响因素及机制，不但有助于最终在分子细胞水平揭示PD及其他神经退行疾病的发生机制，还有助于寻找新的治疗靶点，开发新型的抗PD药物，探索治疗PD的新途径。
[0003]研究表明，转基因PD鼠、猴、果蝇中α
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synuclein突变或过度表达可加速α
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种帕金森病小鼠模型构建方法，其特征在于，所述帕金森病小鼠模型构建方法包括：将A53T突变型及野生型α
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synuclein
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pEGFP真核细胞表达载体采用DNA原核显微注射法制备α
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synuclein
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pEGFP转基因帕金森病小鼠模型；利用实时荧光定量PCR和Westernblot方法鉴定转基因小鼠脑组织中α
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Synuclein mRNA和蛋白表达情况，免疫组化鉴定α
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Synuclein在小鼠脑组织中的表达分布。2.如权利要求1所述帕金森病小鼠模型构建方法，其特征在于，所述帕金森病小鼠模型构建方法还包括：在α
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synuclein
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pEGFP转基因帕金森病小鼠模型的基础上，通过行为学检测、免疫荧光、HE染色观察δ
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阿片受体对帕金森病小鼠4月龄、6月龄和8月龄的时间段行为学的改变、对α
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synuclein在小鼠脑组织中表达分布的影响、对脑纹状体α
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synuclein寡聚体形成的调控及纹状体多巴胺能神经元细胞内Lewy小体的形成的影响。3.如权利要求1所述帕金森病小鼠模型构建方法，其特征在于，所述帕金森病小鼠模型构建方法还包括：采用Western Blot及实时荧光定量PCR检测δ
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阿片受体与α
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synuclein寡聚体对转基因小鼠4月龄、6月龄和8月龄的时间段纹状体CREB Ser
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133、TORC1/SIK1及靶基因BDNF、c
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fos、jun
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B、bcl
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2表达的影响。4.如权利要求1所述帕金森病小鼠模型构建方法，其特征在于，所述帕金森病小鼠模型构建方法包括以下步骤：步骤一，构建载体；步骤二，建立α
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synuclein
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pEGFP转基因帕金森病小鼠模型；步骤三，分析δ
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阿片受体对帕金森病小鼠α
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synuclein寡聚体形成的影响；步骤四，分析α
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synuclein、δ
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阿片受体对帕金森病小鼠CREB信号通路影响。5.如权利要求4所述帕金森病小鼠模型构建方法，其特征在于，所述步骤一中的载体构建包括：构建A53T突变型及野生型α
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synuclein
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pEGFP真核细胞表达载体，应用Ec...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈涛，蔡奔驰，钟丽凡，王祺桐，许文帝，李习，
申请(专利权)人：海南省人民医院，
类型：发明
国别省市：