一种核酸等温扩增定量检测板制造技术

本发明专利技术提供了一种核酸等温扩增定量检测板，所述腔体包括对照腔、检测腔、对照组荧光液储存腔和实验组荧光液储存腔，所述对照腔与对照组荧光液储存腔之间、检测腔与实验组荧光液储存腔之间分别通过管路连接，所述管路上设有控制其打开和中断的开关，所述开关处于关闭状态、对照组荧光液储存腔和实验组荧光液储存腔为密封真空状态；所述电子加热板通过滑轨活动设在对照组荧光液储存腔和实验组荧光液储存腔的上方。本发明专利技术公开的检测板装置可以对血制品中的病原微生物进行快速实时的检测，既满足了企业大规模样本快速检测，同时也确保了结果准确度，方便又快捷。方便又快捷。

【技术实现步骤摘要】
一种核酸等温扩增定量检测板


[0001]本专利技术属于快速检测
，具体涉及一种核酸等温扩增定量检测板。
[0002]专利技术背景
[0003]目前，血制品的应用一直是临床治疗不可替代的方法之一，如人血白蛋白、人免疫球蛋白、静注人免疫球蛋白(pH4)等。而血制品易受到细菌、病毒等病原体污染，这会带来血源性疾病传播的问题，进而造成治疗失败，甚至更严重的后果。因此血制品的病原体污染情况越来越受到人们的重视。然而，血制品中病原微生物的检测一直依赖于传统的培养方法，主要是免疫检测法和分子检测法。免疫学检测还是以人工操作为主，因此易发生污染现象，这样就不可避免的会对检测结果产生影响。聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction，PCR)检测技术是分子检测领域常用的手段，但是依赖于PCR仪，且扩增时间长，耗时耗力。而核酸等温扩增技术，例如，环介导等温扩增技术(Loop
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mediated isothermal amplification，LAMP)在扩增时需要4～6条引物，引物间容易发生交互作用产生假阳性结果，这些都不利于LAMP的进一步推广。上述方法操作繁琐、费时费力，受制于实验室的环境限制，难以满足当下快速检测需求。

技术实现思路

[0004]为了克服现有技术的不足，本专利技术的目的是提供一种快速便捷的核酸等温扩增定量检测板，不用借助大型的仪器设备，成本低，灵敏度高，易于操作，以提高检测的效率。
[0005]为解决上述问题，本专利技术采用如下技术方案：一种核酸等温扩增定量检测板，其特征在于，包括光电传感器、接收光电传感器信号的控制面板、与控制面板连接的电子加热板、用于设置参数的人机交互系统、腔体、以及为整个检测板供电的电源；所述腔体包括对照腔、检测腔、对照组荧光液储存腔和实验组荧光液储存腔，所述对照腔与对照组荧光液储存腔之间、检测腔与实验组荧光液储存腔之间分别通过管路连接，所述管路上设有控制其打开和中断的开关，所述开关处于关闭状态、对照组荧光液储存腔和实验组荧光液储存腔为密封真空状态；所述电子加热板通过滑轨活动设在对照组荧光液储存腔和实验组荧光液储存腔的上方，所述人机交互系统与控制面板连接。
[0006]优选的，还包括进样滴管。
[0007]优选的，所述光电传感器包括激光发射装置和激光接收装置。
[0008]优选的，所述激光发射装置为光电二极管。
[0009]优选的，所述对照腔和检测腔预埋有冻干扩增混合试剂。
[0010]优选的，所述对照组荧光液储存腔和实验组荧光液储存腔底部设置有荧光染料SYBR Green I。
[0011]优选的，样品所述检测腔中的反应时间为30min，反应温度为63℃，反应完成后打开开关检测腔中的液体进入实验组荧光液储存腔，反应时间为1min。
[0012]优选的，所述对照腔和检测腔上方的腔口处设有用于密封的密封膜。
[0013]本专利技术的有益效果在于：
[0014]本专利技术通过电子加热板提供恒温环境以支撑样品通过分子等温扩增技术在30min内实现指数扩增来达到检测目的，并通过与荧光指示剂结合可以达到实时定量检测，大大提高了检测效率。
附图说明
[0015]图1为核酸等温扩增定量检测板的结构示意图；
[0016]图2为进样滴管的外部结构示意图；
[0017]其中：1、电子加热板；2、控制面板；3、光电传感器；4、人机交互系统；5、对照腔；6、检测腔；7、对照组荧光液储存腔；8、实验组荧光液储存腔；9、密封膜；10、进样滴管；11、管路；12、激光发射装置；13、激光接收装置；14、电源；15、滑轨；16、开关。
具体实施方式
[0018]下面结合实施例对本申请作进一步的详细说明。可以理解的是，此处所描述的具体实施例仅仅用于解释相关专利技术，而非对该专利技术的限定。
[0019]实施例：
[0020]请一并参阅图1和图2，一种核酸等温扩增检测板，包括：电子加热板1、控制面板2、光电传感器3、人机交互系统4、对照腔5、检测腔6、对照组荧光液储存腔7、实验组荧光液储存腔8、密封膜9、进样滴管10、管路11、激光发射装置12、激光接收装置13、电源14、滑轨15、开关16。
[0021]电子加热板1，为一个长度3cm，宽度3cm的正方形结构，采用半导体加热方式，温控准确性高，确保核酸检测方法正常运行。由于半导体单价低，简单易得，因此有利于快速检测板的推广与应用。
[0022]光电传感器3包括激光发射装置12和激光接收装置13，激光发射装置12发射497nm的光，激光接收装置13用于接收520nm的光信号。两个装置置于实验组荧光液储存腔8的上方。光电传感器3与控制面板2之间由一根导线相接，人机交互系统4用于精密的控制温度，光电传感器3将光信号传输至控制面板2，控制面板2中被植入荧光曲线与程序算法，通过计算显示最终的判读结果。
[0023]激光发射装置12：通过光电二极管激发光源来提供光源。
[0024]电源14为整个检测板供电，采用纽扣电池提供电量，正负极各自连到控制面板2上。
[0025]检测腔6底部中预埋有冻干扩增混合试剂。
[0026]设置一个对照腔5，作为实验的阴性对照，相同的，底部预埋有冻干扩增混合试剂。
[0027]对照组荧光液储存腔7和实验组荧光液储存腔8底部置有荧光染料SYBR Green I。
[0028]对照组荧光液储存腔7和实验组荧光液储存腔8为密封真空状态，通过压力差，确保检测腔与对照腔中的液体反应完后顺利进入荧光液储存腔。
[0029]开关16，设在管路11上，检测腔6与对照腔5反应完后脱落，打开开关由于压力差，液体可以从检测腔6顺势流入荧光腔。
[0030]密封膜9起到密封试剂的作用，防止在反应过程中造成污染和液体的蒸发。
[0031]本专利技术中，电子加热板1为一个长度3cm，宽度3cm的正方形结构，在电子加热板的
左侧为对照腔5和检测腔6，底部预埋有冻干扩增混合试剂，右边为对照组荧光液储存腔7和实验组荧光液储存腔8，放置有荧光染料SYBR Green I。两个腔体独立的，且由一个管路11相连，管路11由开关16控制，当完成上一指令后，管路才可连通进入下一腔体，这些均由控制面板2进行控制，控制面板2可以对每一个腔体进行时间和温度的精准控制。
[0032]所述的核酸检测法采用的是跨越式滚环等温扩增技术(SRCA)，是将冻干扩增混合试剂添加到试剂板的凹槽中进行反应。
[0033]所述的跨越式滚环等温扩增技术(SRCA)可以在Bst DNA聚合酶的催化下，仅需要设计一对引物，就可以完成核酸体外等温扩增。
[0034]所述的核酸检测方法，反应时间为30min，反应温度为63℃，反应完成后进入荧光液储存腔，反应时间为1min。
[0035]所述的SYBR荧光染料，是一种非饱和菁类荧光素，会产生微弱的橙色荧光。在SRCA的扩增产物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种核酸等温扩增定量检测板，其特征在于，包括光电传感器(3)、接收光电传感器(3)信号的控制面板(2)、与控制面板连接的电子加热板(1)、用于设置参数的人机交互系统(4)、腔体、以及为整个检测板供电的电源(14)；所述腔体包括对照腔(5)、检测腔(6)、对照组荧光液储存腔(7)和实验组荧光液储存腔(8)，所述对照腔(5)与对照组荧光液储存腔(7)之间、检测腔(6)与实验组荧光液储存腔(8)之间分别通过管路(11)连接，所述管路(11)上设有控制其打开和中断的开关(16)，所述开关处于关闭状态、对照组荧光液储存腔(7)和实验组荧光液储存腔(8)为密封真空状态；所述电子加热板(1)通过滑轨(15)活动设在对照组荧光液储存腔(7)和实验组荧光液储存腔(8)的上方，所述人机交互系统(4)与控制面板(2)连接。2.根据权利要求1所述的一种核酸等温扩增定量检测板，其特征在于：还包括进样滴管(10)。3.根据权利要求1所述的一种核酸等温...

【专利技术属性】
技术研发人员：李聪，耿黎莎，付钊，冀亚坤，周玉岩，武翠红，刘焕峰，王尹潇，安丽康，武晓青，刘沙，
申请(专利权)人：河北省药品医疗器械检验研究院河北省化妆品检验研究中心，
类型：发明
国别省市：