一种逆转铂类化疗药物耐药性的中药组合物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种逆转铂类化疗药物耐药性的中药组合物及其制备方法，逆转铂类化疗药物耐药性的中药组合物中包括桔梗10

【技术实现步骤摘要】
一种逆转铂类化疗药物耐药性的中药组合物及其制备方法


[0001]本专利技术涉及抗癌药物
，具体为一种逆转铂类化疗药物耐药性的中药组合物及其制备方法。

技术介绍

[0002]铂类化疗药物对多种癌症均有较好疗效，然而随着铂类化疗药物投入临床使用，在许多癌症治疗过程中产生的耐药性抑制了铂类化疗药物的疗效。铂类化疗药物的耐药机制较为复杂，不同的癌症类型及阶段、顺铂不同转运部位、不同研究层面，和不同作用通路及靶点，其发生机制是不一样的，为了抑制铂类化疗药物的耐药性，西医药届通过多种化药联用的方式来降低其耐药性，但其总存在各种缺陷和副作用，中药在我国已经沿用几千年，具有辨证论治，多成分多靶点的整体施治特点，其耐药性问题不明显，许多研究已证实中药联用顺铂可以逆转顺铂耐药性。
[0003]一些治疗策略已被用于逆转癌症患者顺铂化疗耐药性，如与细胞毒性药物和靶向药物联合使用，但它们在改善患者生存质量和生存率方面并没有取得较好成效。因此，迫切需要开发无毒和高效的治疗策略来克服铂类化疗药物耐药性。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种逆转铂类化疗药物耐药性的中药组合物及其制备方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种逆转铂类化疗药物耐药性的中药组合物的制备方法包括以下步骤：
[0006]步骤一、称取桔梗、百合、甘草、陈皮，加5
‑
20倍蒸馏水浸泡于圆底烧瓶内，加热液体至微沸，保持微沸状态加热0.5/>‑
2.0h，趁热过滤药液至烧杯内；
[0007]步骤二、重新往含药渣的圆底烧瓶内加入蒸馏水5
‑
20倍，微沸加热 0.5
‑
1.0h，趁热过滤药液(60
‑
80目纱布)至原烧杯内，混匀两次提取所得药液；
[0008]步骤三、对所得药液进行水浴旋蒸，蒸干液体，得到浸膏，将浸膏放入
‑
80℃冰箱冷冻一夜后，第二日于冷冻干燥机内冷冻干燥直至干膏状态；
[0009]步骤四、将干膏置于超净工作台内，使用无菌PBS溶解干膏，配置药液浓度为0.5
‑
1.2mg/mL，将含药PBS微孔滤膜过滤，过滤后得本组合物汤药。
[0010]优选的，包括桔梗10
‑
50份、百合5
‑
30份、甘草50
‑
100份、陈皮10
‑
50 份。
[0011]优选的，所述根据步骤一将桔梗、百合、甘草、陈皮煮沸的中药水采用60
‑
100目纱布趁热过滤药液。
[0012]优选的，所述汤药与铂类化疗药物联用逆转人肺癌铂类耐药细胞的耐药性。
[0013]优选的，所述中药复方在逆转铂类化疗药物耐药性的浓度为对所有细胞都无直接毒性作用的0.5
‑
2.0mg/mL。
[0014]优选的，所述称取桔梗、百合、甘草、陈皮，加5
‑
20倍蒸馏水浸泡 15
‑
20min。
[0015]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0016](1)本逆转铂类化疗药物耐药性的中药组合物提供了所述的中药组合物在逆转铂类化疗药物耐药性的应用，本中药组合物与铂类化疗药物联用逆转人肺癌铂类耐药细胞的耐药性、抑制人肺癌铂类耐药细胞的迁移与增殖、增强了铂类化疗药物诱导的细胞凋亡、增加铂类化疗药物诱导的ROS 积累并抑制Nrf2的表达，调节人肺癌铂类耐药细胞内Nrf2/ARE通路以逆转耐药性；
[0017](2)顺铂对顺铂耐药肺腺癌A549/DDP细胞的增敏作用的过程中使用无毒剂量的中药组合物与顺铂联合给药显著抑制了A549/DDP细胞的活性，并表现出对A549/DDP细胞中迁移和增殖作用的抑制功效；
[0018](3)该中药组合物与顺铂联合给药显著降低了A549/DDP细胞内线粒体膜电位，且诱导耐药细胞内ROS积累增加，进一步导致DNA损伤标记蛋白γ
‑
H2AX表达水平显著增加。
[0019](4)通过将该技术方案中研发得到的组合物中药通过实验发现，该中药组合物单独给药耐药细胞后，能以剂量和时间依赖性的方式抑制细胞内 Nrf2蛋白表达水平，且降低Nrf2的稳定性应诱导其降解，并且组合物联合顺铂给药后，在mRNA和蛋白水平均检测到了其对Nrf2/ARE通路的抑制作用；
[0020](5)该逆转铂类化疗药物耐药性的中药组合物，在对中药组合物与顺铂联用逆转A549/DDP细胞顺铂耐药性、中药组合物与顺铂联用抑制 A549/DDP细胞的迁移与增殖、中药组合物增强了顺铂诱导的细胞凋亡、中药组合物增加顺铂诱导的ROS积累并抑制Nrf2的表达以及中药组合物调节 A549/DDP细胞内Nrf2/ARE通路以逆转耐药性的这些实验检测中均有很好的作用效果。
附图说明
[0021]图1为试验例1中中药组合物安全浓度考察；
[0022]图2为试验例1中中药组合物增强顺铂诱导的细胞毒性；
[0023]图3为试验例1中中药组合物联用顺铂在A549/DDP细胞内的协同作用考察；
[0024]图4为试验例2中中药组合物联用顺铂抑制A549/DDP细胞的迁移和增殖作用；
[0025]图5为试验例3中中药组合物增强顺铂诱导的A549/DDP细胞凋亡作用；
[0026]图6为试验例3中中药组合物增强顺铂诱导的A549/DDP细胞内线粒体膜电位损失；
[0027]图7为试验例3中凋亡相关蛋白表达情况；
[0028]图8为试验例4中流式细胞术检测各组给药后活性氧水平；
[0029]图9为试验例4中中药组合物在A549/DDP细胞内促进顺铂诱导的DNA损伤；
[0030]图10为试验例4中中药组合物对Nrf2蛋白表达影响；
[0031]图11为试验例5中中药组合物联用顺铂对Nrf2/ARE通路蛋白和mRNA影响。
具体实施方式
[0032]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0033]请参阅图1
‑
11，本专利技术提供一种技术方案：一种逆转铂类化疗药物耐药性的中药组合物的制备方法包括以下步骤：
[0034]步骤一、称取桔梗、百合、甘草、陈皮，加5
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20倍蒸馏水浸泡于圆底烧瓶内，加热液体至微沸，保持微沸状态加热0.5
‑
2.0h，趁热过滤药液至烧杯内；
[0035]步骤二、重新往含药渣的圆底烧瓶内加入蒸馏水5
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20倍，微沸加热 0.5
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1.0h，趁热过滤药液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种逆转铂类化疗药物耐药性的中药组合物的制备方法包括以下步骤：步骤一、称取桔梗、百合、甘草、陈皮，加5
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20倍蒸馏水浸泡于圆底烧瓶内，加热液体至微沸，保持微沸状态加热0.5
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2.0h，趁热过滤药液至烧杯内；步骤二、重新往含药渣的圆底烧瓶内加入蒸馏水5
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20倍，微沸加热0.5
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1.0h，趁热过滤药液(60
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80目纱布)至原烧杯内，混匀两次提取所得药液；步骤三、对所得药液进行水浴旋蒸，蒸干液体，得到浸膏，将浸膏放入
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80℃冰箱冷冻一夜后，第二日于冷冻干燥机内冷冻干燥直至干膏状态；步骤四、将干膏置于超净工作台内，使用无菌PBS溶解干膏，配置药液浓度为0.5
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1.2mg/mL，将含药PBS微孔滤膜过滤，过滤后得本组合物汤药。2.一种逆转铂类化疗药物耐药性的中药组合物，其特征在于：包括桔梗10
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【专利技术属性】
技术研发人员：刘文龙，张喜利，黄思琪，刘晓轩，赵靖，
申请(专利权)人：湖南中医药大学，
类型：发明
国别省市：