一种提高金荞麦茎叶提取物中黄酮和多酚含量的萃取分离方法技术

本发明专利技术涉及一种提高金荞麦茎叶提取物中黄酮和多酚含量的萃取分离方法，所述方法为将金荞麦茎叶粉碎，加入一定浓度的异丙醇和硫酸铵水溶液形成双水相体系，以超声提取黄皮叶中总黄酮，所述方法在单因素试验结果基础上设计响应面试验，优选出总黄酮最佳提取条件确定为硫酸铵浓14.77％，32％乙醇溶液，超声时间46min，料液比38：1；多酚的最佳提取条件确定为硫酸铵浓17.66％，32％乙醇溶液，超声时间46min，料液比45：1；本发明专利技术的方法操作简便，提取快速，效率高，提取黄酮和多酚含量高。提取黄酮和多酚含量高。

【技术实现步骤摘要】
一种提高金荞麦茎叶提取物中黄酮和多酚含量的萃取分离方法


[0001]本专利技术属于天然产物有效成分的分离纯化领域，具体涉及一种提 高金荞麦茎叶提取物中黄酮和多酚含量的萃取分离方法。

技术介绍

[0002]金荞麦(Fagopyrum dibotrys(D.Don)Hara)系双子叶植物纲蓼 科荞麦属植物，是中医中常用的一味中药，其干燥的根茎入药味微辛、 涩，性凉，具有清热解毒、排脓祛痰、祛风化湿之功效，现代药理研 究发现，金荞麦根茎中含有多酚类、甾体、萜类、有机酸类、苷类等 物质，具有较强的抗菌活性以及增强机体免疫能力等功能，目前金荞 麦广泛应用于医药制品、保健食品、饮品和牧草等领域。就金荞麦的 牧草功能而言，研究表明金荞麦营养价值较高(孕蕾期金荞麦粗蛋白 质(CP)、必需氨基酸(EAA)和总氨基酸(TAA)含量分别为20.57％、 7982mg
·
100g
‑1和18792mg
·
100g
‑1，有机物质体外消化率达73.03％)， 而且金荞麦的茎叶部分生物产量较大，全年可刈割6～9次，1年可获得 15762kg.hm
‑2的金荞麦干草量
[4]。金荞麦这几年来作为优质牧草资源， 被广泛应用于非常规饲料原料以及植物提取物替代抗生素的研究中。
[0003]研究发现植物提取物中的某些活性物质如黄酮类、多酚类、皂苷 类等可通过抗氧化缓解高温引发的生产性能下降、畜禽疾病增加等问 题。如松针中的黄酮可显著提高氧化应激状态的肥胖大鼠肝脏中的抗 氧化酶活性，槲皮素可以提高高温条件下奶牛乳腺上皮细胞的活性和 抗氧化能力，白茶中提取的多酚类物质能够使机体纹状体细胞免受过 氧化氢(H2O2)诱导的氧化应激损伤等。现代药理研究发现，金荞麦 (Fagopyrum dibotrys(D.Don)Hara)根茎中含有大量黄酮类、多酚 类等抗氧化活性物质，同时金荞麦在夏季高温频发的南方地区的生物 产量较高，充分挖掘金荞麦中的黄酮类化合物和多酚活性物质具有重 要的理论意义和现实意义。
[0004]目前，黄酮类化合物和多酚活性物质广泛存在于植物中，但不同 植物的不同部位其含量存在差异，提取方法也各有不同，有单一提取 方法如水提法、有机溶剂法，超声法、酶解法等，也有辅助提取法如 超声波酶提法、超声波醇提法、蒸汽爆破辅助、机械化学辅助等。近 年来，双水相提取技术是一种新型的萃取分离技术，是利用物质在互 不相融两相间溶解性的差异达到目标成分的萃取和分离，此技术已有 效用于提取植物中黄酮和多酚等活性物质，具有操作简便、溶剂量少 且安全、提取效率高等特点，但双水相萃取技术也存在提取周期较长 等不足。目前，双水相体系在金荞麦黄酮和多酚中的提取尚未报道。
[0005]本专利技术为了解决上述问题，研发了一种提高金荞麦茎叶提取物中 黄酮和多酚含量的萃取分离方法。本专利技术采用乙醇
‑
硫酸铵双水相体 系提取金荞麦中黄酮和多酚活性物质，再辅以纤维素酶酶解植物细胞 壁中纤维素和超声波破坏植物细胞结构的作用，增强溶质在细胞膜的 透过率，有利于黄酮和多酚等活性物质的释放和溶出，同时以黄酮和 多酚含量为目标，考察了乙醇质量分数、硫酸铵质量分数、料液比、 提取温度、提取时间等单因
素的影响，采用响应面分析法优化提取工 艺，为提取金荞麦黄酮和多酚等天然产物的深度开发提供方法参考。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种提高金荞麦茎叶提取物中黄酮和多酚 含量的萃取分离方法。
[0007]本专利技术所述方法包括如下步骤：
[0008](1)准确称取一定量的质量分数为13％
‑
21％硫酸铵置于烧杯中， 并加入相同体积的30％
‑
35％质量分数的乙醇溶液，在超声作用下， 搅拌至颗粒完全溶解，静置直到溶液分相；
[0009](2)按料液比25
‑
45：1准确称取金荞麦茎叶粉末，与1％的纤 维素酶混合后加入烧杯中，混合均匀后，水浴，离心，得上相澄清液 即为黄酮和多酚提取物。
[0010]本专利技术所述提高金荞麦提取物中黄酮含量的方法包括如下步骤：
[0011](1)准确称取一定量的质量分数为13％
‑
17％硫酸铵置于烧杯中， 并加入相同体积的32％质量分数的乙醇溶液，在超声作用下，搅拌至 颗粒完全溶解，静置直到溶液分相；
[0012](2)按料液比30
‑
40：1准确称取金荞麦茎叶粉末，与1％的纤 维素酶混合后加入烧杯中，混合均匀后，水浴，离心，得上相澄清液， 即含量为50
‑
85mg/g黄酮提取物。
[0013]进一步地，本专利技术所述提高金荞麦提取物中黄酮含量的方法包括 如下步骤：
[0014](1)准确称取一定量的质量分数为14.77％硫酸铵置于烧杯中， 并加入相同体积的32％质量分数的乙醇溶液，在超声作用下，搅拌至 颗粒完全溶解，静置直到溶液分相；
[0015](2)按料液比38：1准确称取金荞麦茎叶粉末，与1％的纤维素 酶混合后加入烧杯中，混合均匀后，水浴，离心，得上相澄清液，即 含量为80.5mg/g黄酮提取物。
[0016]本专利技术所述提高金荞麦提取物中多酚含量的方法包括如下步骤：
[0017](1)准确称取一定量的质量分数为15％
‑
21％硫酸铵置于烧杯中， 并加入相同体积的32％质量分数的乙醇溶液，在超声作用下，搅拌至 颗粒完全溶解，静置直到溶液分相；
[0018](2)按料液比35
‑
45：1准确称取金荞麦茎叶粉末，与1％的纤 维素酶混合后加入烧杯中，混合均匀后，水浴，离心，得上相澄清液 即含量为35
‑
55mg/g多酚提取物。
[0019]进一步地，本专利技术所述提高金荞麦提取物中多酚含量的方法包括 如下步骤：
[0020](1)准确称取一定量的质量分数为17.67％硫酸铵置于烧杯中， 并加入相同体积的32％质量分数的乙醇溶液，在超声作用下，搅拌至 颗粒完全溶解，静置直到溶液分相；
[0021](2)按料液比45：1准确称取金荞麦茎叶粉末，与1％的纤维素 酶混合后加入烧杯中，混合均匀后，水浴，离心，得上相澄清液，即 含量为53.27mg/g多酚提取物。
[0022]本专利技术所述金荞麦茎叶粉末的制备为：将采集金荞麦茎叶于真空 干燥箱60烘干，然后放入研钵中研磨至粉状，过60目筛，过筛后的 金荞麦粉末避光于8℃冷藏。
[0023]本专利技术所述超声的时间为：20
‑
60min。
[0024]进一步地，本专利技术所述超声的时间为：46min。
[0025]本专利技术所述水浴，离心具体步骤为：于35
‑
45℃水浴160
‑
200min 后，倒入10mL的离心管中，在3000
‑
4000r/min的条件下离心8
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高金荞麦茎叶提取物中黄酮和多酚含量的萃取分离方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)准确称取一定量的质量分数为13％
‑
21％硫酸铵置于烧杯中，并加入相同体积的30％
‑
35％质量分数的乙醇溶液，在超声作用下，搅拌至颗粒完全溶解，静置直到溶液分相；(2)按料液比25
‑
45：1准确称取金荞麦茎叶粉末，与1％的纤维素酶混合后加入烧杯中，混合均匀后，水浴，离心，得上相澄清液即为黄酮和多酚提取物。2.根据权利要求1所述的萃取分离方法，其特征在于，所述提高金荞麦提取物中黄酮含量的方法包括如下步骤：(1)准确称取一定量的质量分数为13％
‑
17％硫酸铵置于烧杯中，并加入相同体积的32％质量分数的乙醇溶液，在超声作用下，搅拌至颗粒完全溶解，静置直到溶液分相；(2)按料液比30
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40：1准确称取金荞麦茎叶粉末，与1％的纤维素酶混合后加入烧杯中，混合均匀后，水浴，离心，得上相澄清液，即含量为50
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85mg/g黄酮提取物。3.根据权利要求2所述的萃取分离方法，其特征在于，所述提高金荞麦提取物中黄酮含量的方法包括如下步骤：(1)准确称取一定量的质量分数为14.77％硫酸铵置于烧杯中，并加入相同体积的32％质量分数的乙醇溶液，在超声作用下，搅拌至颗粒完全溶解，静置直到溶液分相；(2)按料液比38：1准确称取金荞麦茎叶粉末，与1％的纤维素酶混合后加入烧杯中，混合均匀后，水浴，离心，得上相澄清液，即含量为80.5mg/g黄酮提取物。4.根据权利要求1所述的萃取分离方法，其特征在于，所述提高金荞麦提取物中多酚含量的方法包括如下步骤：(1)准确称取一定量的质量分数为15％
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21％硫酸铵置于烧杯中，并加入相同体积的32％质量分数的乙醇溶液，在超声作用下，搅拌至颗粒完全...

【专利技术属性】
技术研发人员：张蓉，陈光吉，杨尚霖，刘凤丹，杨海涵，尚以顺，李世歌，李小冬，王小利，孙光，骆金红，
申请(专利权)人：阿坝职业学院成都乾坤动物药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：