一种炒僵蚕中草酸铵含量的测定方法技术

本发明专利技术提供了一种炒僵蚕中草酸铵含量的测定方法，包括如下步骤：A)将供试品原料采用溶剂溶解，得到待测液；B）将待测液采用高效液相色谱法测定，得到待测液的色谱图，色谱条件如下：色谱柱为C18柱；流动相A为0.2%磷酸水溶液，流动相B为甲醇，流动相采用梯度洗脱。采用本发明专利技术的方法中草酸峰与相邻峰分离良好，待测液中其它组分均能有效洗脱；待测液处理简单耗时较短，待测液回收率高，且稀释剂成本低。本发明专利技术相比现有文献专属性更强的色谱分离条件，待测液提取效率更高，处理过程更简单的分析方法。法。法。

【技术实现步骤摘要】
一种炒僵蚕中草酸铵含量的测定方法


[0001]本专利技术涉及检测方法
，尤其是涉及一种炒僵蚕中草酸铵含量的测定方法。

技术介绍

[0002]僵蚕，中药名。为蚕蛾科昆虫家蚕Bombyx mori Linnaeus4～5龄的幼虫感染（或人工接种）白僵菌Beauveria bassiana(Bals.)Vuillant而致死的干燥体。分布于江苏、浙江、四川、广东等地。具有息风止痉，祛风止痛，化痰散结之功效。常用于肝风夹痰，惊痫抽搐，小儿急惊，破伤风，中风口
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，风热头痛，目赤咽痛，风疹瘙痒，发颐痄腮。
[0003]僵蚕中含有草酸铵，现有技术公开的僵蚕中草酸铵的测定，但存在拖尾，供试品中主峰与相邻峰分离度不佳，且炒僵蚕中存在极性较小成分残留至下一针；定量可能存在干扰。
[0004]因此，开发一种分离度更好，专属性更强、供试品提取效率更高，处理过程更简单的炒僵蚕中草酸铵含量的测定方法是非常必要的。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种炒僵蚕中草酸铵含量的测定方法，本专利技术的方法分离度更好，专属性更强。
[0006]本专利技术一种炒僵蚕中草酸铵含量的测定方法，包括如下步骤：A)将供试品原料采用溶剂溶解，得到待测液；B）将待测液采用高效液相色谱法测定，得到待测液的色谱图，色谱条件如下：色谱柱为C18柱；流动相A为0.2%磷酸水溶液，流动相B为甲醇，流动相采用梯度洗脱。
[0007]优选的，所述方法还包括制备对照品溶液：将草酸对照品采用溶剂溶解，得到对照品溶液；将所述对照品溶液采用高效液相色谱法测定，得到对照品的色谱图；根据所述对照品溶液的浓度、所述对照品在色谱图中的峰面积以及待测液中与对照品相对应的成分在色谱图中的峰面积，进行定性和定量分析；根据草酸的含量计算得到草酸铵的含量。
[0008]优选的，所述梯度洗脱具体为：0～8min，A相：99%、B相：1%；8～9min，A相：99%～20%、B相：1%～80%；9～15min，A相：20%～99%、B相：80%～1%；15～30min，A相：99%、B相：1%。
[0009]优选的，所述色谱柱为shim
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pack GIST C18 XSelect GSS T3 C18、GL Sciences T3 C18，规格为250
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4.6mm 5μm；柱温25~35℃。
[0010]优选的，所述流动相流速为0.6~0.8mL/min。
[0011]优选的，所述检测波长为214nm；进样量为10μL。
[0012]优选的，所述对照品溶液中草酸的浓度为0.042mg/mL～0.833784mg/mL。
[0013]优选的，所述对照品溶液中草酸的线性方程为y=8155010.6660x+60278.9960，相关系数为0.998，响应因子的RSD为2.3%，Y轴截距绝对值占100%响应值的3.6%。
[0014]优选的，所述溶剂为0.2%磷酸水溶液；所述提取为超声提取；所述超声的功率为500W，频率40kHz；超声时间为30min。
[0015]优选的，所述供试品原料的质量mg和溶剂的体积mL的比为100:150，所述溶剂为0.2%磷酸水溶液。
[0016]与现有技术相比，本专利技术提供了一种炒僵蚕中草酸铵含量的测定方法，包括如下步骤：A)将供试品原料采用溶剂溶解，得到待测液；B）将待测液采用高效液相色谱法测定，得到待测液的色谱图，色谱条件如下：色谱柱为C18柱；流动相A为0.2%磷酸水溶液，流动相B为甲醇，流动相采用梯度洗脱。采用本专利技术的方法中草酸峰与相邻峰分离良好，待测液中其它组分均能有效洗脱；待测液处理简单耗时较短，待测液回收率高，且稀释剂成本低。本专利技术相比现有文献专属性更强的色谱分离条件，待测液提取效率更高，处理过程更简单的分析方法。
附图说明
[0017]图1为实施例1草酸对照品HPLC检测图谱；图2为实施例1炒僵蚕供试品溶液HPLC检测图谱；图3为实施例3色谱条件1供试品溶液HPLC检测图谱；图4为实施例3色谱条件2供试品溶液HPLC检测图谱；图5为实施例3色谱条件3供试品溶液HPLC检测图谱；图6为实施例3色谱条件4供试品溶液HPLC检测图谱；图7为实施例3色谱条件5供试品溶液HPLC检测图谱；图8为实施例3色谱条件6供试品溶液HPLC检测图谱；图9为实施例3色谱条件7供试品溶液HPLC检测图谱；图10为实施例3色谱条件8供试品溶液HPLC检测图谱；图11为验证例1中3.4线性、范围的草酸线性图。
具体实施方式
[0018]本专利技术提供了一种炒僵蚕中草酸铵含量的测定方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都属于本专利技术保护的范围。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。
[0019]本专利技术一种炒僵蚕中草酸铵含量的测定方法，包括如下步骤：A)将供试品原料采用溶剂溶解，得到待测液；B）将待测液采用高效液相色谱法测定，得到待测液的色谱图，色谱条件如下：
色谱柱为C18柱；流动相A为0.2%磷酸水溶液，流动相B为甲醇，流动相采用梯度洗脱。
[0020]本专利技术提供的炒僵蚕中草酸铵含量的测定方法首先将供试品原料采用溶剂溶解，得到待测液。
[0021]本专利技术对于所述炒僵蚕不进行限定，本领域技术人员熟知的即可。
[0022]本专利技术所述供试品原料的质量mg和溶剂的体积mL的比为100：150，所述溶剂为0.2%磷酸水溶液。
[0023]本专利技术所述提取为超声提取；所述超声的功率为500W，频率40kHz；超声时间为30min。
[0024]本专利技术人发现，本专利技术所述溶剂进行溶解，溶解效果更佳，采用上述溶剂搭配上述提取条件，提取效果好。
[0025]将待测液采用高效液相色谱法测定，得到待测液的色谱图。
[0026]本专利技术还包括制备对照品溶液：将草酸对照品采用溶剂溶解，得到对照品溶液。
[0027]将所述对照品溶液采用高效液相色谱法测定，得到对照品的色谱图；根据所述对照品溶液的浓度、所述对照品在色谱图中的峰面积以及待测液中与对照品相对应的成分在色谱图中的峰面积，进行定性和定量分析。
[0028]本专利技术优选采用外标法法进行计算，得到草酸的含量。
[0029]然后，根据草酸的含量计算得到草酸铵的含量。本专利技术草酸铵含量等于草酸含量除以0.7255。
[0030]本专利技术色谱条件如下：色谱柱为C18柱；优选的，所述色谱柱为shim
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pack GIST C18、XSelect GSS T3 C18、GL Sciences T3 C18250
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4.6mm 5μm；柱温25本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种炒僵蚕中草酸铵含量的测定方法，包括如下步骤：A)将供试品原料采用溶剂溶解，得到待测液；B）将待测液采用高效液相色谱法测定，得到待测液的色谱图，色谱条件如下：色谱柱为C18柱；流动相A为0.2%磷酸水溶液，流动相B为甲醇，流动相采用梯度洗脱。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括制备对照品溶液：将草酸对照品采用溶剂溶解，得到对照品溶液；将所述对照品溶液采用高效液相色谱法测定，得到对照品的色谱图；根据所述对照品溶液的浓度、所述对照品在色谱图中的峰面积以及待测液中与对照品相对应的成分在色谱图中的峰面积，进行定性和定量分析；根据草酸的含量计算得到草酸铵的含量。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱具体为：0～8min，A相：99%、B相：1%；8～9min，A相：99%～20%、B相：1%～80%；9～15min，A相：20%～99%、B相：80%～1%；15～30min，A相：99%、B相：1%。4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为shim
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pack GIST C18、XS...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐昭春，曾志桂，徐朝群，宋志林，
申请(专利权)人：天地恒一制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：