一种帕金森综合征动物模型、药物筛选方法及治疗药物技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，具体涉及一种用于表征帕金森综合征的动物模型，并公开了基于所述模型进行药物筛选的方法，以及可用于治疗帕金森综合征的药物。本发明专利技术所述帕金森综合征动物模型，与野生型动物相比，所述帕金森综合征动物模型中细胞周期蛋白相关激酶GAK的表达量降低，或者，所述帕金森综合征动物模型中脑组织或其体液中细胞周期蛋白相关激酶GAK mRNA或mRNA片段含量降低。mRNA或mRNA片段含量降低。mRNA或mRNA片段含量降低。

【技术实现步骤摘要】
一种帕金森综合征动物模型、药物筛选方法及治疗药物


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种用于表征帕金森综合征的动物模型，并公开了基于所述模型进行药物筛选的方法，以及可用于治疗帕金森综合征的药物。

技术介绍

[0002]帕金森病(PD)是老年人中常见的一种神经退行性疾病，65岁以上人群发病率1.7％以上，80岁以上发病率高达10％，是一种发病率仅次于阿尔兹海默氏症的神经系统退行性疾病。帕金森病最主要的病理改变是中脑黑质多巴胺(dopamine，DA)能神经元的变性死亡，由此而引起纹状体DA含量显著性减少而致病。PD在临床上的主要表现为运动迟缓、肌肉僵直、静止性震颤和姿势步态失稳等运动障碍，且伴有抑郁、痴呆、睡眠障碍、嗅觉失敏、疼痛、尿失禁、便秘等一系列非运动障碍，患者最终将完全丧失生活自理能力并早于预期寿命死亡，严重影响人类健康。
[0003]目前PD的临床治疗均以姑息性缓解临床症状为主(如药物治疗或深部脑刺激)，这些方法只能暂时缓解PD患者的临床症状，不能阻断其病理进程，且会导致异动症、认知障碍、抑郁、自杀等各种副作用。如目前治疗PD的临床药物主要以补充减少的多巴胺或降低多巴胺代谢为主，短期内可缓解PD的临床症状，但长期使用(大约5年后)会在大部分的病人中出现运动失稳和运动并发症，且会出现恶心、呕吐、眩晕、疲倦等毒副作用。深部脑刺激(DBS)是将一个或多个刺激电极通过外科手术的方式植入到大脑特定区域，通过脉冲电刺激调节电极植入区域的神经传导信号，这种治疗方式不但费用昂贵，还可带来手术感染和出血等风险，且可导致认知障碍、记忆缺陷、语言困难、平衡失调、吞咽困难以及运动和感觉困难等不良影响，甚至导致狂躁、忧郁、冷漠、焦虑及自杀念头等心理障碍。因此，帕金森病的病理机制与临床诊治是人类史上最重要、最艰巨的关键科学问题与世界医学难题，开发取代上述PD姑息性疗法的新的PD治疗药物一直都是科研人员努力追求的终极目标。
[0004]PD最初被认为是散发性疾病，随着全基因组关联分析(GWAS)及全基因组、全外显子测序等技术的出现，人们发现了包括PARK1(SNCA)、PARK2(Parkin)、PARK6(Pink1)、PARK7(DJ
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1)和PARK8(LRRK2)等在内的30多种PD关联/致病基因，由此奠定了PD的遗传机制。而且在散发性PD中也存在相应基因的突变或表达发生改变，这就为PD的基因治疗提供了可能。通过基因治疗的方式以致病基因作为靶点，矫正致病基因的突变或表达可以恢复多巴胺神经元的活性，达到从根源上对PD进行治疗的目的。因此，以致病基因作为PD治疗靶点，开发矫正致病基因突变或表达的药物是对PD进行根治的理想方式。

技术实现思路

[0005]为此，本专利技术所要解决的技术问题在于公开了一种帕金森综合征动物模型，所述动物模型可用于进行治疗帕金森药物的筛选；
[0006]本专利技术所要解决的第二个技术问题在于提供一种筛选用于治疗帕金森综合征的药物的方法；
[0007]本专利技术所要解决的第三个技术问题在于提供一种预防和/或治疗帕金森综合征药物的制备方法；
[0008]本专利技术所要解决的第四个技术问题在于提供一种预防和/或治疗帕金森综合征的药物；
[0009]本专利技术所要解决的第四个技术问题在于提供了可促进细胞周期蛋白相关激酶GAK基因表达或增加细胞周期蛋白相关激酶GAK含量或活性的物质，或者，细胞周期蛋白相关激酶GAK蛋白、GAK cDNA或cDNA片段，用于制备帕金森相关药物或产品的用途。
[0010]为解决上述技术问题，本专利技术公开了一种帕金森综合征动物模型，与野生型动物相比，所述帕金森综合征动物模型中细胞周期蛋白相关激酶GAK的表达量降低，或者，所述帕金森综合征动物模型中脑组织或其体液中细胞周期蛋白相关激酶GAK mRNA或mRNA片段含量降低。
[0011]具体的，所述动物选自小鼠、大鼠或者灵长类动物中的至少一种。
[0012]本专利技术还公开了所述帕金森综合征动物模型在治疗帕金森综合征药物筛选中的应用。
[0013]本专利技术还公开了一种筛选用于治疗帕金森综合征的药物的方法，包括：将候选药物施用于所述动物模型的步骤；以及，筛选可使得细胞周期蛋白相关激酶GAK表达量增加或者可使得帕金森综合征减轻的候选药物的步骤，作为所需用于治疗帕金森综合征的药物。
[0014]本专利技术还公开了一种预防和/或治疗帕金森综合征药物的制备方法，包括利用蛋白和/或表达cDNA或cDNA片段制备所需药物的步骤；
[0015]所述蛋白是以细胞周期蛋白相关激酶GAK基因cDNA或cDNA片段的表达产物；
[0016]所述cDNA或cDNA片段来源于细胞周期蛋白相关激酶GAK基因。
[0017]具体的，所述预防和/或治疗帕金森综合征药物的制备方法，所述cDNA或cDNA片段未经修饰，或者包含至少含有1个经修饰的核苷酸或核苷酸类似物；其中，被修饰的核苷酸或核苷酸类似物的修饰位点可以在核糖核苷酸的糖基、主链或碱基上；
[0018]所述核苷酸类似物包括硫代磷酸酯基团的主链经修饰的核糖核苷酸、肌苷或三苯甲基化碱基。
[0019]本专利技术还公开了一种预防和/或治疗帕金森综合征药物的制备方法，包括利用可促进细胞周期蛋白相关激酶GAK的cDNA或cDNA片段的表达病毒制备所需药物的步骤；
[0020]所述促进细胞周期蛋白相关激酶GAK cDNA或cDNA片段的表达病毒包括慢病毒、腺病毒、腺相关病毒中得到至少一种。
[0021]具体的，所述预防和/或治疗帕金森综合征药物的制备方法，所述cDNA或cDNA片段表达病毒由以下方法制得：将细胞周期蛋白相关激酶GAK cDNA或cDNA片段插入表达载体多克隆位点区构建cDNA或cDNA片段表达质粒；将cDNA或cDNA片段表达质粒与辅助质粒共转染细胞，产生病毒颗粒，回收浓缩后制得。
[0022]本专利技术还公开了一种预防和/或治疗帕金森综合征的药物，所述药物包括细胞周期蛋白相关激酶GAK蛋白、GAK cDNA或cDNA片段；和/或，含有细胞周期蛋白相关激酶GAK蛋白、GAK cDNA或cDNA片段基因的表达病毒；
[0023]或者，
[0024]所述药物的活性成分包括可促进细胞周期蛋白相关激酶GAK表达的物质，和/或，
使细胞周期蛋白相关激酶GAK的生理活性增加的物质。
[0025]优选的，所述细胞周期蛋白相关激酶GAK为人中脑组织或体液中的细胞周期蛋白相关激酶GAK；可选的，所述体液选自血液、脑积液和尿液中的一种或几种；所述血液为离体或在体血液；人中脑组织为离体或在体人脑组织。
[0026]优选的，所述病毒包括腺病毒、慢病毒腺相关病毒载体中至少一种。
[0027]本专利技术中，涉及的帕金森治疗对象包括帕金森综合症患者、帕金森综合症疑似患者、帕金森综合症高风险人群或帕金森综合症患者直系亲属；帕金森综合症患者为散发性帕金森综合症患者或家族遗传性帕金森综本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种帕金森综合征动物模型，其特征在于，与野生型动物相比，所述帕金森综合征动物模型中细胞周期蛋白相关激酶GAK的表达量降低，或者，所述帕金森综合征动物模型中脑组织或其体液中细胞周期蛋白相关激酶GAK mRNA或mRNA片段含量降低。2.根据权利要求1所述帕金森综合征动物模型，其特征在于，所述动物选自小鼠、大鼠或者灵长类动物中的至少一种。3.权利要求1或2所述帕金森综合征动物模型在治疗帕金森综合征药物筛选中的应用。4.一种筛选用于治疗帕金森综合征的药物的方法，其特征在于，包括：将候选药物施用于权利要求1或2所述动物模型的步骤；以及，筛选可使得细胞周期蛋白相关激酶GAK表达量增加或者可使得帕金森综合征减轻的候选药物的步骤，作为所需用于治疗帕金森综合征的药物。5.一种预防和/或治疗帕金森综合征药物的制备方法，其特征在于，包括利用蛋白和/或表达cDNA或cDNA片段制备所需药物的步骤；所述蛋白是以细胞周期蛋白相关激酶GAK基因cDNA或cDNA片段的表达产物；所述cDNA或cDNA片段来源于细胞周期蛋白相关激酶GAK基因。6.根据权利要求5所述预防和/或治疗帕金森综合征药物的制备方法，其特征在于，所述cDNA或cDNA片段未经修饰，或者包含至少含有1个经修饰的核苷酸或核苷酸类似物；其中，被修饰的核苷酸或核苷酸类似物的修饰位点可以在核糖核苷酸的糖基、主链或碱基上；所述核苷酸类似物包括硫代磷酸酯基团的主链经修饰的核糖核苷酸、肌苷或三苯甲基化碱基。7.一种预防和/或治疗帕金森综合征药物的制备方法，其特征在于，包括利用可促进细胞周期蛋白相关激酶GAK的cDNA或cDNA片段的表达病毒制备所需药物的步骤；所述促进细胞周期蛋白相关激酶GAK cDNA或cDNA片段的表达病毒包括慢病毒、腺病毒、腺相关病毒中得到至少一种。8.根据权利要求7所述预防和/或治疗帕金森综合征药物的制备方法，其特征在于，所述cDNA或cDNA片段表达病毒由以下方法制得：将细胞周期蛋白相关激酶GAK cDNA或cDNA片段插入表达载体多克隆位点区构建cDNA或cDNA片段表达质粒；将cDNA或cDNA片段表达质粒与辅助质粒共转染细胞，产生病毒颗粒，回收浓缩后制得。9.一种预防和/或治疗帕金森综合征的药物，其特征在于，所述药物包括细胞周期蛋白相关激酶GAK蛋白、GAK cDNA或cDNA片段；和/或，含有细胞周期蛋白相关激酶GAK蛋白、GAK cDNA或cDNA片段基因的表达病毒；或者，所述药物的活性成分包括可促进细胞周期蛋白相关激酶GAK表达的物质，和/或，使细胞周期蛋白相关激酶GAK的生理活性增加的物质；优选的，所述病毒包括腺病毒、慢病毒腺相关病毒载体中至少一种。10.一种可促进细胞周期蛋白相关激酶GAK基因表达或...

【专利技术属性】
技术研发人员：康新江，王昌河，谢振丽，王变变，
申请(专利权)人：苏州捷乐思生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：