心肌纤维化诊断试剂盒、制备方法、使用方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种心肌纤维化诊断试剂盒、制备方法、使用方法与应用。其中，心肌纤维化诊断试剂盒包括：Slit2检测抗体，用于检测血清中Slit2的浓度。Slit2检测抗体能够检测血清中Slit2的浓度，进而可以根据血清中Slit2浓度实现对心肌纤维化的诊断，具有操作便捷、诊断成本低、诊断速度快的特点。诊断速度快的特点。诊断速度快的特点。

【技术实现步骤摘要】
心肌纤维化诊断试剂盒、制备方法、使用方法与应用


[0001]本专利技术涉及生物检测
，尤其涉及的是一种心肌纤维化诊断试剂盒、制备方法、使用方法与应用。

技术介绍

[0002]心肌损伤、应激、炎症和/或衰老等是导致心肌重塑的常见病因，心肌重塑过程伴随心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)的增殖活化并向肌成纤维细胞转化，导致细胞外基质(extra
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cellular matrix,ECM)的产生和降解不平衡，使得ECM过度沉积，发生心肌纤维化。心肌纤维化是多种心肌疾病发展到一定阶段的共同病理特征，导致心肌顺应性降低、心肌结构紊乱和功能障碍，进而损害心肌的收缩和舒张功能，诱发心律失常，加重心力衰竭。
[0003]目前，心肌纤维化诊断的金标准是有创心肌活检。心肌活检术需要在介入手术室开展，还存在一定的手术风险。影像学的诊断主要采用增强延迟扫描心脏磁共振(CMR)进行左室体积和纤维化程度评估。但是，这些诊断方法昂贵、耗时。
[0004]可见，现有技术还有待于改进和发展。

技术实现思路

[0005]鉴于上述现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种心肌纤维化诊断试剂盒、制备方法、使用方法与应用，旨在解决现有技术中耗时的问题。
[0006]本专利技术的技术方案如下：
[0007]一种心肌纤维化诊断试剂盒，包括：Slit2检测抗体，用于检测血清中Slit2的浓度。
[0008]上述方案的效果在于：Slit2检测抗体能够检测血清中Slit2的浓度，进而可以根据血清中Slit2浓度完成对心肌纤维化的诊断，具有诊断风险小、诊断成本低、诊断速度快的特点。
[0009]在进一步地优选方案中，所述的心肌纤维化诊断试剂盒，其中，还包括：酶免反应板、校准品、质控品、稀释液、洗涤液、显色液、终止液中的一种或多种。
[0010]上述方案的效果在于：在使用过程中，酶免反应板、Slit2检测抗体、校准品、质控品、稀释液、洗涤液、显色液、终止液可以相互配合，对心肌纤维化进行诊断，有利于更加准确地检测血清中Slit2浓度。
[0011]在进一步地优选方案中，所述的心肌纤维化诊断试剂盒，其中，所述Slit2检测抗体为HRP标记的Slit2检测抗体；
[0012]所述酶免反应板包括：酶免板、附着于所述酶免板上经封闭处理后的包被抗体；
[0013]所述校准品，包括：多个预设质量浓度的Slit2抗原溶液；
[0014]所述质控品，包括：第一质量浓度的Slit2抗原溶液和第二质量浓度的Slit2抗原溶液，其中，所述第一质量浓度大于所述第二质量浓度；
[0015]所述稀释液，包括：磷酸盐、BSA、聚乙二醇6000、蔗糖、吐温
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20，其中，所述磷酸盐的物质量的浓度为0.01mol/L～0.04mol/L，所述BSA的质量百分数为0.1％～5％，所述聚乙二醇6000的质量百分数为0.1％～10％，所述蔗糖的质量百分数为0.1％～10％，所述吐温
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20的质量百分数为0.01％～1％；
[0016]所述洗涤液，包括：磷酸盐、吐温
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20，其中，所述磷酸盐的物质量的浓度为0.01mol/L～0.8mol/L，所述吐温
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20的质量百分数为0.01％～1％；
[0017]所述终止液为硫酸溶液。
[0018]上述方案的效果在于：提供了酶免反应板、Slit2检测抗体、校准品、质控品、稀释液、洗涤液、终止液中对应组成成分以及相应的含量，有利于更准确地检测血清中Slit2浓度。
[0019]在进一步地优选方案中，所述的心肌纤维化诊断试剂盒，其中，所述多个预设质量浓度的Slit2抗原溶液，包括：500ng/mL的Slit2抗原溶液、250ng/mL的Slit2抗原溶液、125ng/mL的Slit2抗原溶液、62.5ng/mL的Slit2抗原溶液和0ng/mL的Slit2抗原溶液；
[0020]所述第一质量浓度为300ng/mL浓度，所述第二质量浓度为150ng/mL。
[0021]上述方案的效果在于：提供了校准品和质控品中Slit2抗原溶液的质量浓度，有利于更准确、更快地进行校准和进行试剂盒品质的检测。
[0022]本专利技术还提供一种心肌纤维化诊断试剂盒的制备方法，包括步骤：
[0023]提供Slit2检测抗体；
[0024]制备包含所述Slit2检测抗体的心肌纤维化诊断试剂盒。
[0025]上述方案的效果在于：制备的心肌纤维化诊断试剂盒中包含Slit2检测抗体，其中，Slit2检测抗体能够检测血清中Slit2的浓度，进而可以根据血清中Slit2浓度完成对心肌纤维化的诊断，具有诊断风险小、诊断成本低、诊断速度快的特点。
[0026]在进一步地优选方案中，所述的心肌纤维化诊断试剂盒的制备方法，其中，所述提供Slit2检测抗体，包括步骤：
[0027]将NaIO4溶液和乙二醇溶液依次加入到HRP溶液中进行反应，得到反应后的HRP溶液；
[0028]将Slit2抗体溶于Na2CO3溶液中，再与所述反应后的HRP溶液混合，得到Slit2抗体溶液；
[0029]将所述Slit2抗体溶液置入透析袋中，在Na2CO3中进行透析，得到标记反应完成的结合物溶液；
[0030]向所述结合物溶液中依次加入NaBH4和硫酸铵溶液，进行离心处理，得到结合物沉淀；
[0031]将所述结合物沉淀加入到PBS溶液中进行溶解，并装入透析袋中，在PBS溶液中进行透析，得到标记的Slit2抗体溶液；
[0032]向标记的Slit2抗体溶液中加入甘油，并用磷酸盐缓冲液稀释，得到Slit2检测抗体。
[0033]上述方案的效果在于：提供了酶免反应板、Slit2检测抗体、校准品、质控品、稀释液、洗涤液、终止液的制备过程，有利于制备得到检测性能稳定的心肌纤维化诊断试剂盒，从而提高检测血清中Slit2浓度的准确性。
[0034]在进一步地优选方案中，所述的心肌纤维化诊断试剂盒的制备方法，所述制备包含所述Slit2检测抗体的心肌纤维化诊断试剂盒，包括步骤：
[0035]将包被抗体附着在酶免反应板上，再对所述包被抗体进行封闭处理，制备酶免反应板；
[0036]将Slit2抗原加入到第一磷酸盐缓冲液中，配制成多个预设浓度的Slit2抗原溶液，得到校准品，其中，所述第一磷酸盐缓冲液包括：磷酸盐、BSA、聚乙二醇6000、蔗糖、吐温
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20，其中，所述磷酸盐的物质量的浓度为0.01mol/L～0.04mol/L，所述BSA的质量百分数为0.1％～5％，所述聚乙二醇6000的质量百分数为0.1％～10％，所述蔗糖的质量百分数为0.1％～10％，所述吐温
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20的质量百分数为0.01％～1％；
[0037]将Slit2抗原加入到第二磷酸盐缓冲液中，配制成第本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种心肌纤维化诊断试剂盒，其特征在于，包括：Slit2检测抗体，用于检测血清中Slit2的浓度。2.根据权利要求1所述的心肌纤维化诊断试剂盒，其特征在于，还包括：酶免反应板、校准品、质控品、稀释液、洗涤液、显色液、终止液中的一种或多种。3.根据权利要求2所述的心肌纤维化诊断试剂盒，其特征在于，所述Slit2检测抗体为HRP标记的Slit2检测抗体；所述酶免反应板包括：酶免板、附着于所述酶免板上经封闭处理后的包被抗体；所述校准品，包括：多个预设质量浓度的Slit2抗原溶液；所述质控品，包括：第一质量浓度的Slit2抗原溶液和第二质量浓度的Slit2抗原溶液，其中，所述第一质量浓度大于所述第二质量浓度；所述稀释液，包括：磷酸盐、BSA、聚乙二醇6000、蔗糖、吐温
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20，其中，所述磷酸盐的物质量的浓度为0.01mol/L～0.04mol/L，所述BSA的质量百分数为0.1％～5％，所述聚乙二醇6000的质量百分数为0.1％～10％，所述蔗糖的质量百分数为0.1％～10％，所述吐温
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20的质量百分数为0.01％～1％；所述洗涤液，包括：磷酸盐、吐温
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20，其中，所述磷酸盐的物质量的浓度为0.01mol/L～0.8mol/L，所述吐温
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20的质量百分数为0.01％～1％；所述终止液为硫酸溶液。4.根据权利要求3所述的心肌纤维化诊断试剂盒，其特征在于，所述多个预设质量浓度的Slit2抗原溶液，包括：500ng/mL的Slit2抗原溶液、250ng/mL的Slit2抗原溶液、125ng/mL的Slit2抗原溶液、62.5ng/mL的Slit2抗原溶液和0ng/mL的Slit2抗原溶液；所述第一质量浓度为300ng/mL浓度，所述第二质量浓度为150ng/mL。5.一种心肌纤维化诊断试剂盒的制备方法，其特征在于，包括步骤：提供Slit2检测抗体；制备包含所述Slit2检测抗体的心肌纤维化诊断试剂盒。6.根据权利要求5所述的心肌纤维化诊断试剂盒的制备方法，其特征在于，所述提供Slit2检测抗体，包括步骤：将NaIO4溶液和乙二醇溶液依次加入到HRP溶液中进行反应，得到反应后的HRP溶液；将Slit2抗体溶于Na2CO3溶液中，再与所述反应后的HRP溶液混合，得到Slit2抗体溶液；将所述Slit2抗体溶液置入透析袋中，在Na2CO3中进行透析，得到标记反应完成的结合物溶液；向所述结合物溶液中依次加入NaBH4和硫酸铵溶液，进行离心处理，得到结合物沉淀；将所述结合物沉淀加入到PBS溶液中进行溶解，并装入透析袋中，在PBS溶液中进行透析，得到标记的Slit2抗体溶液；向标记的Slit2抗体溶液中加入甘油，并用磷酸盐缓冲液稀释，得到Slit2检测抗体。7.根据权利要求6所述的心肌纤维化诊断试剂盒的制备方法，所述制备包含所述Slit2检测抗体的心肌纤维化诊断试剂盒，包括步骤：将包被抗体附着在酶免反应板上，再对所述包被抗体进行封闭处理，制备酶免反应板；将Slit2抗原加入到第一磷酸盐缓冲液中，配制成多个预设浓度的Slit2抗原溶液，得到校准品，其中，所述第一磷酸盐缓冲液包括：磷酸盐、BSA、聚乙二醇6000、蔗糖、吐温
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20，
其中，所述磷酸盐的物质量的浓度为0.01mol/L～0.04mol/L，所述BSA的质量百分数为0.1％～5％，所述聚乙二醇6000的质量百分数为0.1...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘云奇，殷胜利，
申请(专利权)人：广州弘大医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：