一种同时测定北沙参中3种核苷类成分含量的方法技术

本发明专利技术属于中药检测技术领域，具体是一种同时测定北沙参中3种核苷类成分含量的方法。具体包括以下步骤：制备对照品溶液；制备供试品溶液；精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明专利技术采用0.1％磷酸溶液进行提取，确保北沙参中核苷类成分的稳定性与准确性，并采用HPLC法进行含量测定，解决了使用同一提取方法、在同一测定系统完成北沙参中核苷类成分含量测定的关键问题。题。题。

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定北沙参中3种核苷类成分含量的方法


[0001]本专利技术属于中药检测
，具体是一种同时测定北沙参中3 种核苷类成分含量的方法。

技术介绍

[0002]北沙参为伞形科植物珊瑚菜GlehniaLittoralis Fr.Schmidt ex Miq. 的干燥根，《神农本草经》列其为上品，为我国常用大宗中药材之一。甘，微苦，微寒，归肺、胃经，具有养阴清肺，益胃生津的功效，用于肺燥干咳、劳嗽痰血、胃阴不足、热病津伤、咽干口渴等症。野生北沙参为我国二级重点保护野生植物，市场主流栽培种，主产于河北安国、山东莱阳、内蒙古赤峰等地。北沙参现行质量标准收载于《中国药典》2020年版一部，仅有性状和横切面显微鉴别的方法。北沙参中主要活性成分为多糖类、核苷类、香豆素类、聚炔类等成分，文献多为北沙参中多糖、香豆素类、聚炔类成分的研究，未见有对北沙参中核苷类成分的研究。而北沙参做汤剂为用水煎煮，制剂也多为水提工艺，水溶性成分中的核苷类成分具有很强的抗病毒、抗菌、抗内毒素的作用，所以可以将其作为北沙参的质量控制指标之一。目前，尚未有一种能够在具有良好的灵敏度、重复性、准确性的同时，还能快速、简便测定北沙参中腺苷、鸟苷、尿苷的含量的方法。

技术实现思路

[0003]本专利技术针对以上问题，提供了一种同时测定北沙参中3种核苷类成分含量的方法，包括以下步骤：
[0004]A、制备对照品溶液；
[0005]B、制备供试品溶液：取北沙参粉末1g，称定，置具塞锥形瓶中，加入0.1％磷酸溶液25ml，密塞，称定重量，超声处理50分钟，放冷，再称定重量，用0.1％磷酸溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。
[0006]C、吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
[0007]色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相 A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长为253nm；柱温为30℃。理论板数按尿苷峰计算不低于10000。
[0008]优选的，所述对照品溶液的制备方法为：取尿苷对照品、腺苷对照品、鸟苷对照品，称定，加0.1％磷酸溶液制成每1ml含尿苷20μg、腺苷10μg、鸟苷20μg的混合溶液，即得。
[0009]优选的，所述步骤B中，超声处理功率为500W，频率为40kHz；水温在30℃以下。
[0010]优选的，所述梯度洗脱程序如下：
[0011][0012]本专利技术的有益效果在于：
[0013]本专利技术建立的方法快速、简便、具有良好的灵敏度、重复性、准确性，并解决了北沙参中核苷类提取稳定性的关键问题，能够填补北沙参核苷类成分含量测定的空白，为北沙参及其制剂的质量控制解决一系列问题。
附图说明
[0014]图1为尿苷对照品溶液的光谱图；
[0015]图2为腺苷对照品溶液的光谱图；
[0016]图3为尿苷对照品溶液的光谱图；
[0017]图4为对照品溶液的色谱图；
[0018]图5为供试品溶液的色谱图；
[0019]图6
‑
图8分别为使用色谱柱Ⅰ、色谱柱Ⅱ、色谱柱Ⅲ时的供试品溶液色谱图，其中：峰1、尿苷；峰2、腺苷；峰3、鸟苷；
[0020]图9
‑
图11分别为25℃、30℃、35℃时的供试品溶液色谱图，其中：峰1、尿苷；峰2、腺苷；峰3、鸟苷；
[0021]图12
‑
图14分别为流速为0.9ml/min、1.0ml/min、1.1ml/min时的供试品溶液色谱图，其中：峰1、尿苷；峰2、腺苷；峰3、鸟苷；
[0022]图15为实施例1的色谱图；
[0023]图16为实施例2的色谱图；
[0024]图17为实施例3的色谱图。
具体实施方式
[0025]为让本专利技术的上述特征和优点能更明显易懂，下文特举实施例，并配合附图，作详细说明如下，但本专利技术并不限于此。
[0026]在本专利技术的说明书中，提及“一个实施例”时均意指在该实施例中描述的具体特征、结构或者参数、步骤等至少包含在根据本专利技术的一个实施例中。因而，在本专利技术的说明书中，若采用了诸如“根据本专利技术的一个实施例”、“在一个实施例中”等用语并不用于特指在同一个实施例中，若采用了诸如“在另外的实施例中”、“根据本专利技术的不同实施例”、“根据本专利技术另外的实施例”等用语，也并不用于特指提及的特征只能包含在特定的不同的实施例中。本领域的技术人员应该理解，在本专利技术说明书的一个或者多个实施例中公开的各具体特征、结构或者参数、步骤等可以以任何合适的方式组合。
[0027]实施例1
[0028]色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为253nm；柱温为30℃。理论板数按尿苷峰计算应不低于10000。
[0029][0030]对照品溶液的制备：取尿苷对照品、腺苷对照品、鸟苷对照品适量，精密称定，加0.1％磷酸溶液制成每1ml含尿苷20μg、腺苷10μg、鸟苷20μg的混合溶液，即得。
[0031]供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入0.1％磷酸溶液25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率500W，频率40kHz；水温在30℃以下)50分钟，放冷，再称定重量，用0.1％磷酸溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。
[0032]测定法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
[0033]实施例2
[0034]色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为253nm；柱温为30℃。理论板数按尿苷峰计算应不低于10000。
[0035][0036]对照品溶液的制备：取尿苷对照品、腺苷对照品、鸟苷对照品适量，精密称定，加0.05％磷酸溶液制成每1ml含尿苷20μg、腺苷10μg、鸟苷20μg的混合溶液，即得。
[0037]供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入0.05％磷酸溶液25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率500W，频率40kHz；水温在30℃以下)50分钟，放冷，再称定重量，用0.05％磷酸溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。
[0038]测定法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
[0039]实施例3
[0040]色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为253nm；柱温为30℃。理论板数按尿苷峰计算应不低于10000。
[0041][0042]对照品溶液的制备：取尿苷对照品、腺苷对照品本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时测定北沙参中3种核苷类成分含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、制备对照品溶液；B、制备供试品溶液：取北沙参粉末1g，称定，置具塞锥形瓶中，加入0.1％磷酸溶液25ml，密塞，称定重量，超声处理50分钟，放冷，再称定重量，用0.1％磷酸溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，即得；C、吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长为253nm；柱温为30℃。理论板数按尿苷峰计算不低于10000。2...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓蕾，刘永利，王常顺，苏建，
申请(专利权)人：河北省药品医疗器械检验研究院河北省化妆品检验研究中心，
类型：发明
国别省市：