一种用虹鳟鱼肝S9亚细胞组分RT-S9测定体外固有清除率的方法技术

本发明专利技术公开了一种用虹鳟鱼肝S9亚细胞组分RT

【技术实现步骤摘要】
一种用虹鳟鱼肝S9亚细胞组分RT
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S9测定体外固有清除率的方法


[0001]本专利技术属于环境生态毒理学领域，具体涉及一种用虹鳟鱼肝S9亚细胞组分RT
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S9测定体外固有清除率的方法。

技术介绍

[0002]随着工业化进程的持续推进，新污染物(emerging contaminants)不断被产生并释放到生态环境中。为避免具有持久性有机污染物和高富集物质(PBT/vPvB)进入环境，化学品管理机构加强源头管控，要求新化学物质登记需进行大量的实验和研究以完成环境风险评估。为了促进非动物测试方法和其他替代方法的发展，欧美各国已开始关注有害结局路径(AOP)框架下所强调的作用机制，并开发了一系列体外替代方法。在REACH法规下，脊椎动物试验只能作为获取数据最后的方法。然而，到目前为止我国对化学品和农药的安全性评价仍以动物实验为主的风险评估导向。
[0003]化学品的生物富集性评估是监管环境风险和危害评估的一个基本和强制性的部分。传统的生物富集实验周期长至数周或数月，且需要使用较多的试验鱼，成本高。尽管根据本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用虹鳟鱼肝S9亚细胞组分RT
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S9测定体外固有清除率的方法，其特征在于，包括以下步骤：将RT
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S9、混合辅助因子、磷酸盐缓冲液按一定体积比混合，然后添加待测受试物或参比物，在10～12℃下培养，于不同的时间点取样，将样品与终止液混合后停止反应，测定样品中受试物浓度，将受试物浓度进行对数转换后对时间作图，获得对数下降曲线，根据对数下降曲线的斜率、RT
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S9浓度求得受试物的体外固有清除率，其公式为：上式中，CL,
IN VITRO,INT
：体外固有清除率；C
RT
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S9
蛋白质浓度：培养体系中RT
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S9蛋白浓度；ke：一级清除常数，由
‑
2.3
×
对数下降曲线的斜率获得。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的磷酸盐缓冲液为pH7.8 100mM磷酸钾缓冲液。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的混合辅助因子是由250μL/mL丙甲甘肽、20mM NADPH、20mM UDPGA、50Mm GSH、1Mm PA...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈桂兰，梁秋，梅承芳，曾国驱，杨旭楠，许玫英，
申请(专利权)人：广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心，
类型：发明
国别省市：