肾移植HLA-DSA阴性抗体介导排斥反应检测方法及装置、设备制造方法及图纸

本发明专利技术属于生物医学技术领域，公开了一种肾移植HLA

【技术实现步骤摘要】
肾移植HLA
‑
DSA阴性抗体介导排斥反应检测方法及装置、设备


[0001]本专利技术属于生物医学
，具体涉及一种肾移植HLA
‑
DSA阴性抗体介导排斥反应检测方法及装置、设备、存储介质、以及一种非HLA抗体标志物的应用。

技术介绍

[0002]同种异体肾移植术是目前治疗终末期肾病的首选治疗方案。肾移植术后的排斥反应是影响移植肾功能并最终导致移植肾失功的主要原因，移植排斥反应包括T细胞介导的排斥反应(T Cell
‑
Mediatedrejection，TCMR)和抗体介导的排斥反应(Antibody
‑
Mediated rejection，ABMR)，二者相辅相成，共同影响移植肾功能。而急性ABMR是肾移植早期移植肾功能丢失的主要原因，并且容易发展成慢性抗体介导排斥反应，造成长期肾移植结果不佳。
[0003]随着临床检验技术的发展，术前人类白细胞抗原(Human leukocyte antigen，HLA)配型减少了HLA介导的细胞性排斥反应及HLA抗体介导的体液性排斥反应的发生；术前群体反应性抗体(Panel reactive antibodies，PRA)检测及补体依赖细胞毒性试验(Complement
‑
dependent lymphocytotoxicity，CDC)能够早期诊断患者的致敏状态，减少了超急性及急性加速性排斥反应的发生；免疫抑制剂药物的研发及免疫抑制方案的优化改善了细胞介导排斥反应的治疗效果，这些都提高了移植肾的短期存活率。然而仍有接近一半的移植肾在术后10
‑
15年失功，即移植肾的长期存活率并未得到显著改善。
[0004]移植肾的长期存活率主要受ABMR影响，与TCMR相比，ABMR会导致患者出现更严重的临床症状，具有救治困难、预后差且容易复发的特点，目前已成为器官移植领域亟待攻克的重点。移植肾活检是诊断肾移植抗体介导排斥反应的金标准，但是活检的结果判定在很大程度上依赖检查者的主观经验，容易漏诊和误诊，并且活检是有创的，价格昂贵，很多肾移植受者无法接受。
[0005]临床上通常在肾移植受者血清肌酐水平升高、尿蛋白阳性或者尿量减少，彩超显示移植肾血流量减少，并且供者特异性HLA抗体(Donor
‑
specific anti
‑
HLA antibodies，HLA
‑
DSA)阳性时按照ABMR进行治疗。然而约一半的肾移植受者发生ABMR时HLA
‑
DSA阴性。
[0006]临床上往往对血清肌酐水平升高、尿蛋白阳性或者尿量减少，彩超表明移植肾血流量减少，HLA
‑
DSA阴性的肾移植受者按照TCMR进行治疗，而TCMR的治疗方法主要是激素冲击，或者联合兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白(ATG)或抗人T细胞免疫球蛋白(ALG)进行治疗。按照治疗TCMR的方法治疗ABMR往往效果不理想，造成移植肾不可逆的损伤，甚至移植肾失功。
[0007]因此无创、简便地检测ABMR对于延长移植肾的存活时间具有重要意义。虽然已有根据肾移植受者血清中细胞因子或者趋化因子其受体水平无创检测排斥反应的系统，但是无法区分TCMR与ABMR，其特异性和灵敏度均较低，难以指导临床对症治疗。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的在于提供一种肾移植HLA
‑
DSA阴性抗体介导排斥反应检测方法及装置、设备、存储介质、以及一种非HLA抗体标志物的应用，不仅可以无创、简便地检测肾移植
HLA
‑
DSA阴性抗体介导排斥反应，还可以提高检测特异性和灵敏度。
[0009]本专利技术第一方面公开一种肾移植HLA
‑
DSA阴性抗体介导排斥反应检测方法，包括：
[0010]获取HLA
‑
DSA阴性待测对象的血清中各个标志物的相对水平值；
[0011]根据各个标志物的相对水平值和预设系数，通过以下公式计算得到待测对象的检测值：
[0012][0013]其中，P
AMR
代表检测值，n为标志物数量，n为1～6中任一正整数，w
i
代表第i个标志物的预设系数，E
i
代表第i个标志物的相对水平值，n个标志物包括以下6个非HLA抗体中的一个或多个：CSF2抗体、FLRT2抗体、GAPDH抗体、GSTT1抗体、PRKCZ抗体、SSB抗体；
[0014]若所述检测值大于指定截断值，发出用于表征所述待测对象患有抗体介导排斥反应的提示信息。
[0015]在一些实施例中，若所述检测值小于或等于所述指定截断值，发出用于表征所述待测对象未发生抗体介导排斥反应的提示信息。
[0016]在一些实施例中，CSF2抗体、FLRT2抗体、GAPDH抗体、GSTT1抗体、PRKCZ抗体、SSB抗体的预设系数分别对应为：0.299、0.404、1.222、0.343、0.452、0.775。
[0017]在一些实施例中，所述指定截断值为2.842。
[0018]在一些实施例中，获取HLA
‑
DSA阴性待测对象的血清中各个标志物的相对水平值，包括：
[0019]获取HLA
‑
DSA阴性待测对象的血清中各个标志物的中位荧光强度；
[0020]计算各个所述标志物的中位荧光强度与其对应的健康人中位荧光强度平均值之间的比值的一半数值，作为各个所述标志物的相对水平值。
[0021]本专利技术第二方面公开一种非HLA抗体标志物在制备用于肾移植HLA
‑
DSA阴性抗体介导排斥反应检测的试剂盒或者构建肾移植HLA
‑
DSA阴性抗体介导排斥反应检测模型中的应用，所述非HLA抗体标志物包括以下6种非HLA抗体中的至少一种组合：CSF2抗体、FLRT2抗体、GAPDH抗体、GSTT1抗体、PRKCZ抗体、SSB抗体。
[0022]本专利技术第三方面公开一种肾移植HLA
‑
DSA阴性抗体介导排斥反应检测装置，包括：
[0023]获取单元，用于获取HLA
‑
DSA阴性待测对象的血清中各个标志物的相对水平值；
[0024]计算单元，用于根据各个标志物的相对水平值和预设系数，通过以下公式计算得到待测对象的检测值：
[0025][0026]其中，P
AMR
代表检测值，n为标志物数量，n为1～6中任一正整数，w
i
代表第i个标志物的预设系数，E
i
代表第i个标志物的相对水平值，n个标志物包括以下6个非HLA抗体中的一个或多个：CSF2抗体、FLRT2抗体、GAPDH抗体、GSTT1抗体、PRKCZ抗体、SSB抗体；
[0027]提示单元，用于在所述检测值大于指定截断值时，发出用于表征所述待测对象患有抗体介本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.肾移植HLA
‑
DSA阴性抗体介导排斥反应检测方法，其特征在于，包括：获取HLA
‑
DSA阴性待测对象的血清中各个标志物的相对水平值；根据各个标志物的相对水平值和预设系数，通过以下公式计算得到待测对象的检测值：其中，P
AMR
代表检测值，n为标志物数量，n为1～6中任一正整数，w
i
代表第i个标志物的预设系数，E
i
代表第i个标志物的相对水平值，n个标志物包括以下6个非HLA抗体中的一个或多个：CSF2抗体、FLRT2抗体、GAPDH抗体、GSTT1抗体、PRKCZ抗体、SSB抗体；若所述检测值大于指定截断值，发出用于表征所述待测对象患有抗体介导排斥反应的提示信息。2.如权利要求1所述的肾移植HLA
‑
DSA阴性抗体介导排斥反应检测方法，其特征在于，所述方法还包括：若所述检测值小于或等于所述指定截断值，发出用于表征所述待测对象未发生抗体介导排斥反应的提示信息。3.如权利要求1所述的肾移植HLA
‑
DSA阴性抗体介导排斥反应检测方法，其特征在于，CSF2抗体、FLRT2抗体、GAPDH抗体、GSTT1抗体、PRKCZ抗体、SSB抗体的预设系数分别对应为：0.299、0.404、1.222、0.343、0.452、0.775。4.如权利要求1至3任一项所述的肾移植HLA
‑
DSA阴性抗体介导排斥反应检测方法，其特征在于，所述指定截断值为2.842。5.如权利要求1至3任一项所述的肾移植HLA
‑
DSA阴性抗体介导排斥反应检测方法，其特征在于，获取HLA
‑
DSA阴性待测对象的血清中各个标志物的相对水平值，包括：获取HLA
‑
DSA阴性待测对象的血清中各个标志物的中位荧光强度；计算各个所述标志物的中位荧光强度与其对应的健康人中位荧光强度平均值之间的比值的一半数值，作为各个所述标志物的相对水平值。6.非HLA抗体标志物在制备用于肾移植HLA
‑
DSA阴性抗体介导...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺俊波，刘向军，周燕清，黄婉贞，
申请(专利权)人：广州博富瑞医学检验有限公司，
类型：发明
国别省市：