一种具有高效抑菌功能的地衣芽孢杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一株具有高效抑制产气荚膜梭菌的地衣芽孢杆菌及其应用，所述地衣芽孢杆菌保藏号为ACCC61965。所述地衣芽孢杆菌采用LB培养基培养。本发明专利技术还提供一种应用上述地衣芽孢杆菌的生物饲料添加剂，所述生物饲料添加剂由地衣芽孢杆菌ACCC61965、植物乳杆菌ACCC 61967、酿酒酵母ACCC 21162发酵而成。本发明专利技术相对于现有技术，地衣芽孢杆菌及其配制的生物饲料添加剂可对产气荚膜梭菌进行有效防治。料添加剂可对产气荚膜梭菌进行有效防治。料添加剂可对产气荚膜梭菌进行有效防治。

【技术实现步骤摘要】
一种具有高效抑菌功能的地衣芽孢杆菌及其应用


[0001]本专利技术属于微生物领域，具体地说，涉及一种具有高效抑制产气荚膜梭菌的地衣芽孢杆菌及其应用。

技术介绍

[0002]产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,CP)又称为魏氏梭菌(Clostridium welchii)，属于芽孢杆菌科，梭状芽孢杆菌属。是一种广泛分布于水源、土壤等自然界以及动物肠道中的条件致病性细菌，产气荚膜梭菌耐受环境能力强，通过产生物活性蛋白或者毒素，导致人和多种家畜发生不同临床症状的疾病。CP是健康禽肠道的常在菌，当生长环境及日粮发生改变，会引起该菌大量增殖并附着于肠道黏膜产生大量毒素和蛋白酶导致肠道黏膜损伤，从而引起腹泻及肠炎等疾病，严重影响动物生产性能并造成巨大经济损失。目前防治产气荚膜梭菌的方法主要有：(1)疫苗预防法，疫苗预防效果较好，但是其免疫效果、质量、安全性等方面存在一定的缺陷，还有待提高。(2)抗菌药物治疗法，其治疗效果较佳，但是容易产生耐药性，与养殖行业“减抗禁抗”政策不符。(3)中草药治疗法，中草药可以直接或间接杀灭病菌。(4)噬菌体治疗，噬菌体可以裂解病菌，但是其制备的方法繁琐。(5)益生菌类，益生菌能替代药物，对疾病防治具有一定的效果，是一种绿色防治方法，但是具有较强抑菌效果菌株资源较少、菌株制备工艺、保存及发酵方面也存在不足，有待提高。本专利技术针对产气荚膜梭菌防治现状，筛选具有高效抑菌功能菌株，并研究其在病害防治上的应用，开发出对产气荚膜梭菌有较好防治效果的产品。

技术实现思路
/>[0003]本专利技术提供了提供一株具有高效抑制产气荚膜梭菌的地衣芽孢杆菌及其应用，以实现对产气荚膜梭菌的绿色防治。
[0004]本专利技术提供了一株具有高效抑制产气荚膜梭菌的地衣芽孢杆菌，所述地衣芽孢杆菌保藏号为ACCC61965。
[0005]进一步地，所述地衣芽孢杆菌采用LB培养基培养。
[0006]本专利技术还提供一种上述地衣芽孢杆菌制备的产品，所述产品为含量不低于1
×
107cfu/mL的地衣芽孢杆菌菌液或地衣芽孢杆菌菌粉。
[0007]本专利技术还提供一种应用上述地衣芽孢杆菌的生物饲料添加剂，所述生物饲料添加剂由地衣芽孢杆菌ACCC61965、植物乳杆菌ACCC 61967、酿酒酵母ACCC 21162发酵而成。
[0008]进一步地，所述生物饲料添加剂的制备方法如下：
[0009]将地衣芽孢杆菌ACCC61965的发酵液、植物乳杆菌ACCC 61967的发酵液、酿酒酵母ACCC 21162的发酵液按照体积比1:(0.5
‑
1.5):(0.5
‑
1.5)的比例混合均匀，将混合后的复合微生物按照固体料质量的0.2
‑
1％加入至固体发酵培养基中进行固体发酵。
[0010]更进一步地，所述固体发酵培养基包括下列重量份原料：麸皮20
‑
40份、小麦粉10
‑
30份、豆粕粉10
‑
20份、玉米粉5
‑
10份，所述固体发酵培养基成份发酵培养基初始含水量30
‑
50％。
[0011]更进一步地，所述地衣芽孢杆菌ACCC 61965的发酵液制备方法如下：
[0012]a.种子液制备，取纯化的地衣芽孢杆菌，斜面接种至灭菌LB液体培养基中置于摇床培养16h，培养条件37℃、200r/min；
[0013]b.液体发酵，向发酵罐中加入LB液体培养基，加入其重量0.05％的有机硅消泡剂，并灭菌；控制装液体积为发酵罐的60％
‑
70％，将培养好的种子液按体积比1％的接种量接入发酵罐，在罐压0.05Mpa、通气量15L/min、转速225r/min、温度37℃的条件下培养24h，得到地衣芽孢杆菌ACCC 61965的发酵液。
[0014]更进一步地，所述植物乳杆菌ACCC 61967植物乳杆菌的发酵液制备方法如下：
[0015]a.种子液制备，取纯化的植物乳杆菌，斜面接种至灭菌MRS肉汤培养基中置于摇床培养16h，培养条件37℃、100r/min；
[0016]b.液体发酵，发酵罐中加入LB液体培养基，加入其重量0.05％的有机硅消泡剂，并灭菌；将培养好的种子液按体积比1％的接种量接入发酵罐，在罐压0.01Mpa、通气量0L/min、转速125r/min、温度37℃的条件下培养24h，得到植物乳杆菌ACCC 61967植物乳杆菌的发酵液。
[0017]更进一步地，所述酿酒酵母ACCC 21162的发酵液制备方法如下：
[0018]a.种子液制备，取纯化的酿酒酵母，斜面接种至灭菌YPD培养基中置于摇床培养36h，培养条件28℃、100r/min。
[0019]b.液体发酵，发酵罐中加入YPD液体培养基，加入其重量0.05％的有机硅消泡剂，并灭菌；将培养好的种子液按体积比1％的接种量接入发酵罐，在罐压0.05Mpa、通气量10L/min、转速150r/min、温度28℃的条件下培养48h，得到酿酒酵母ACCC 21162的发酵液。
[0020]本专利技术还公开一种饲料，所述饲料含有上述生物饲料添加剂。
[0021]进一步地，所述饲料中添加剂含量为2kg
‑
5kg每吨。
[0022]本专利技术还公开一种饲料，所述饲料含有地衣芽孢杆菌产品，所述饲料中地衣芽孢杆菌含量不低于1
×
106cfu/g。
[0023]本专利技术相对于现有技术，地衣芽孢杆菌及其配制的生物饲料添加剂可对产气荚膜梭菌进行有效防治。本专利技术的地衣芽孢杆菌应用包含地衣芽孢杆菌发酵液、菌剂、生物饲料添加剂及衍生产品在畜禽养殖业中的应用。地衣芽孢杆菌生物饲料添加剂是将微生物经液体发酵后接种至固体发酵培养基发酵而成。
附图说明
[0024]图1为本专利技术实施例地衣芽孢杆菌菌落形态；
[0025]图2为本专利技术实施例地衣芽孢杆菌菌落革兰氏染色镜检图；
[0026]图3为发酵液对产气荚膜梭菌抑菌效果图；
[0027]图3中A：地衣芽孢杆菌发酵液对产气荚膜梭菌的抑制作用；B：地衣芽孢杆菌发酵液用无菌水稀释100倍对产气荚膜梭菌的抑制作用；C：地衣芽孢杆菌发酵液用无菌水稀释200倍对产气荚膜梭菌的抑制作用；D：75ppm金霉素对产气荚膜梭菌的抑制作用；
具体实施方式
[0028]为了使本
的人员更好地理解本专利技术方案，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分的实施例，而不是全部的实施例。
[0029]本专利技术中涉及到的百分号“％”，若未特别说明，是指质量百分比；但溶液的百分比，除另有规定外，是指100mL溶液中含有溶质的克数。
[0030]为了实现本专利技术目的，本专利技术通过筛选获得一株地衣芽孢杆菌，其菌落形态图和镜检图见图1、图2所示。采用LB发酵液培养24本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有高效抑菌功能的地衣芽孢杆菌，其特征在于，所述地衣芽孢杆菌保藏号为ACCC61965。2.一种应用权利要求1所述地衣芽孢杆菌制备的产品，其特征在于，所述产品为含量不低于1
×
107cfu/mL的地衣芽孢杆菌菌液或地衣芽孢杆菌菌粉。3.一种应用权利要求1所述地衣芽孢杆菌的生物饲料添加剂，其特征在于，所述生物饲料添加剂由地衣芽孢杆菌ACCC61965、植物乳杆菌ACCC 61967、酿酒酵母ACCC 21162发酵而成。4.根据权利要求3所述生物饲料添加剂，其特征在于，所述生物饲料添加剂的制备方法如下：将地衣芽孢杆菌ACCC61965的发酵液、植物乳杆菌ACCC 61967的发酵液、酿酒酵母ACCC21162的发酵液按照体积比1:(0.5
‑
1.5):(0.5
‑
1.5)的比例混合均匀，将混合后的复合微生物按照固体料质量的0.2
‑
1％加入至固体发酵培养基中进行固体发酵。5.根据权利要求4所述生物饲料添加剂，其特征在于，所述固体发酵培养基包括下列重量份原料：麸皮20
‑
40份、小麦粉10
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30份、豆粕粉10
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20份、玉米粉5
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10份，所述固体发酵培养基成份发酵培养基初始含水量30
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50％。6.根据权利要求4所述生物饲料添加剂，其特征在于，所述地衣芽孢杆菌ACCC61965的发酵液制备方法如下：a.种子液制备，取纯化的地衣芽孢杆菌，斜面接种至灭菌LB液体培养基中置于摇床培养16h，培养条件37℃、200r/min；b.液体发酵，向发酵罐中加入LB液体培养基，加入其重量0.05％的有机硅消泡剂，并灭菌；控制装液体积...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗志威，
申请(专利权)人：唐人神集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：