本发明专利技术涉及一种维生素D供试品溶液的制备方法，包括待测样品DMSO超声溶解和甲醇定容两个步骤，能够大幅缩短维生素D供试液制备时间，有利于后续检测过程中降低维生素D含量测试误差，最终能够实现准确反映被检测样品中维生素D真实含量的目的。解决了现有技术中样品前处理过程复杂且耗时长的问题。同时，本发明专利技术的维生素D供试液制备方法还能够节约检测成本，亦有利于提升整个检测方法的效率。此外，本发明专利技术还涉及一种维生素D检测方法，仅采用高效液相色谱的反相检测系统，进一步节省检测时间、节省检测成本的同时，还具有专属性更强、线性更佳、重复性更佳、准确度更高、稳定性更强、检出限更低、精密度更好的优势。精密度更好的优势。
【技术实现步骤摘要】
维生素D供试品溶液的制备方法及维生素制品中维生素D的检测方法
[0001]本专利技术涉及化学分析
，具体涉及一种维生素D供试品溶液的制备方法。同时，本专利技术还涉及一种维生素制品中维生素D的检测方法。
技术介绍
[0002]维生素D，一种脂溶性维生素，乃环戊烷多氢菲类化合物，一组结构上与固醇有关，功能上可防止佝偻病的维生素，最主要的是维生素D3与D2。维生素D 的主要功用是促进小肠粘膜细胞对钙和磷的吸收，有利于新骨生成和钙化。此外，维生素D还有促进皮肤细胞生长、分化及调节免疫功能作用。一般成年人经常接触日光不致发生缺乏病，婴幼儿、孕妇、乳母及不常到户外活动的老人要增加维生素D供给量到每日10μg(相当于400国际单位)。由此，维生素D的含量检测，成为必不可少的环节。
[0003]目前，普遍采用国标GB5009.82
‑
2016皂化法进行维生素D的含量检测，但该检测方法存在检测步骤繁琐、检测前处理复杂、检测专属性不强、测试周期长等问题。尤其是检测前处理步骤，包括皂化处理、石油醚提取、洗涤、浓缩步骤，存在过程复杂且耗时长的问题。另外，由于维生素D本身不稳定、易氧化、易分解的性质，冗长的时间会导致维生素D含量测试误差加大，无法准确反映被检测样品中维生素D的真实含量。
[0004]CN110632203A涉及一种同步快速检测维生素A、维生素D3和维生素E的方法，包括如下步骤：(1)采用二甲基亚砜提取待测样品中的维生素A、维生素 D3和维生素E，得到的提取液经正己烷震荡萃取、浓缩、复溶后得到样品溶液； (2)配制维生素A、维生素D3、维生素E的标准溶液，按照浓度梯度配制多份标准系列溶液；(3)采用高效液相色谱法对所述样品溶液和标准品溶液进行检测分析，利用外标法得到维生素A、D3、E的含量。该检测方法可实现维生素A、D3、 E的同步检测，能够大幅缩短样品前处理时间，提高工作效率，同时提高了检测精度，降低实验室成本。
[0005]CN114324648A公开了含维生素D3的制剂中有关物质的高效液相检测方法及供试品溶液的制备方法，本专利技术供试品溶液的制备方法提取率高、且重现性好，适于推广应用；且供试品溶液制备方法用到的有机溶剂种类相对较少、毒性相对较低，减少了实验人员的操作风险。本专利技术首次采用反相高效液相系统对含低剂量维生素D3的制剂中的有关物质进行检测，相比现有技术中的正相检测系统，其专属性更强、重现性更好、灵敏度更高，采用本专利技术的梯度洗脱方式，各主峰与杂质峰均可被检出并良好分离，并且主峰的响应度高，可有效控制含维生素 D3的制剂的质量。
[0006]CN110632203A和CN114324648A均用其他步骤代替了皂化反应且用其他步骤代替了石油醚提取步骤，在一定程度上缩短了样品前处理时间，对于提高检测效率有一定程度的提升。但是，两者对于样品前处理的处理时间仍有些许过长，且均未对检测方法的稳定性进行验证。
[0007]鉴于此，开发一种能够大幅缩短维生素D供试液制备时间的方法，以降低维生素D
含量测试误差，实现准确反映被检测样品中维生素D真实含量目的，成为本领域技术人员亟待解决的技术问题。
技术实现思路
[0008]本专利技术的目的在于提供一种维生素D供试液制备的制备方法，以大幅缩短缩短维生素D供试液制备时间、降低维生素D含量测试误差，最终实现准确反映被检测样品中维生素D真实含量目的。
[0009]为了实现上述专利技术目的，本专利技术的技术方案如下：
[0010]一种维生素D供试品溶液的制备方法，用于维生素制品中维生素D的检测，包括下列步骤：
[0011]S1：向所述维生素制品中加入二甲基亚砜，后超声提取，得到提取液；
[0012]S2：向所述提取液中加入甲醇，后过滤得到滤液，即得。
[0013]作为进一步技术方案，所述维生素制品为维生素D含片、维生素D咀嚼片、维生素D颗粒剂和维生素D片剂中的任意一种。
[0014]优选的，所述维生素D包括维生素D2或维生素D3。
[0015]优选的，步骤S1中，所述维生素制品与所述二甲基亚砜的质量比为1：1.1～11。
[0016]优选的，步骤S1中，超声时间为10～30min；优选的，超声时间为10min。
[0017]优选的，步骤S2中，所述维生素制品与所述甲醇的质量比为1:11.9～79.1。
[0018]优选的，步骤S2中，过滤选用0.22μm滤膜或0.45μm滤膜。
[0019]同时，本专利技术还提供了一种维生素制品中维生素D的检测方法，具体技术方案如下：
[0020]一种维生素制品中维生素D的检测方法，包括下列步骤
[0021]a、制备维生素D供试品溶液：按照权利要求1～8任一所述的制备方法制备得到维生素D供试品溶液；
[0022]b、制备维生素D标准储备溶液，后按照浓度梯度配制多份维生素D标准系列溶液；
[0023]c、高效液相色谱检测：采用高效液相色谱法对所述维生素D供试品溶液和多份所述维生素D标准系列溶液进行检测，根据检测结果计算得到维生素的含量。
[0024]优选的，步骤b中，所述维生素D标准储备溶液的浓度为100ug/mL和/或多份维生素D标准系列溶液的浓度分别为0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.40μg/mL、0.60μg/mL、1.00μg/mL。
[0025]优选的，步骤c中，高效液相色谱法的条件为以下(i)至(vi)中的一项或多项：
[0026](i)色谱柱：C18柱，内径4.6mm，粒径5μm；
[0027](ii)柱温：30～40℃；
[0028](iii)流动相：包括流动相A和流动相B；所述流动相A为甲醇，所述流动相B为水；所述甲醇与所述水的体积比为95：5；
[0029](iv)流速：0.8～1.2mL/min；
[0030](v)检测波长：264nm；和
[0031](vi)进样量：100μL。
[0032]本专利技术的有益效果为：
[0033]相比于现有技术，本专利技术的维生素D供试液制备方法仅包括待测样品DMSO 超声溶解和甲醇定容两个步骤，能够大幅缩短维生素D供试液制备时间，有利于后续检测过程中降低维生素D含量测试误差，最终能够实现准确反映被检测样品中维生素D真实含量的目的。解决了现有技术中样品前处理过程复杂且耗时长的问题。其次，本专利技术的维生素D供试液制备方法有利于提高维生素D检测的效率。最后，本专利技术的维生素D供试液制备方法节省了现有技术中的试剂用量，节约了检测成本。
[0034]此外，本专利技术的维生素D检测方法，仅采用高效液相色谱的反相检测系统，进一步节省检测时间、节省检测成本的同时，还具有专属性更强、线性更佳、重复性更佳、准确度更高、稳定性更强、检出限更低、精密度更好的优势。
附图说明
[0035]下面结合附图和具体实施方式对本专利技术作进一步详细的说明。
[0036]图1本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种维生素D供试品溶液的制备方法，用于维生素制品中维生素D的检测，其特征在于：包括下列步骤：S1：向所述维生素制品中加入二甲基亚砜，后超声提取，得到提取液；S2：向所述提取液中加入甲醇，后过滤得到滤液，即得。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述维生素制品为维生素D含片、维生素D咀嚼片、维生素D颗粒剂和维生素D片剂中的任意一种。3.根据权利要求1
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2中任一所述的制备方法，其特征在于：所述维生素D包括维生素D2或维生素D3。4.根据权利要求1
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3中任一所述的制备方法，其特征在于：步骤S1中，所述维生素制品与所述二甲基亚砜的质量比为1：1.1～11。5.根据权利要求4中所述的制备方法，其特征在于：步骤S1中，超声时间为10～30min；优选的，超声时间为10min。6.根据权利要求1
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5中任一所述的制备方法，其特征在于：步骤S2中，所述维生素制品与所述甲醇的质量比为1：11.9～79.1。7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：步骤S2中，过滤选用0.22μm滤膜或0.45μm滤膜。8.一种维生素制品中维生素D的检测方法，其特征在于：...
【专利技术属性】
技术研发人员：王光路，朱志铭，赵大鹏，张赞，李丽丽，张玉洁，葛亚哲，
申请(专利权)人：河北御芝林药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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