一种蠲痹汤物质基准HPLC指纹图谱及测定方法技术

本发明专利技术提出了一种蠲痹汤物质基准HPLC指纹图谱及测定方法，属于中药分析技术领域。包括：S1.对照品溶液的制备；S2.供试品溶液的制备；S3.色谱条件；S4.测定。本发明专利技术蠲痹汤物质基准的指纹图谱测定方法专属性强，重现性、稳定性均较好，方法简便，可更好地控制本品内在质量的目的，故将蠲痹汤物质基准的指纹图谱测定作为本品的质量控制的方法。作为本品的质量控制的方法。作为本品的质量控制的方法。

【技术实现步骤摘要】
一种蠲痹汤物质基准HPLC指纹图谱及测定方法


[0001]本专利技术涉及中药分析
，具体涉及一种蠲痹汤物质基准HPLC指纹图谱及测定方法。

技术介绍

[0002]蠲痹汤出自清代程国彭所撰综合性医书《医学心悟》卷三“痹(鹤膝风)”篇。“通治风寒湿三气，合而成痹”。组成为羌活、独活各一钱，桂心五分，秦艽一钱，当归三钱，川芎七分，甘草五分(炙)，海风藤二钱，桑枝三钱，乳香、木香各八分。主治中风身体烦痛，项背拘急，手足冷痹，腰膝沉重，举动艰难。方中羌活、独活、秦艽、肉桂祛风散寒胜湿；当归、川芎、乳香理气养血、活血止痛；桑枝、海风藤通经活络止痛。现代药理研究证明：羌活水溶性成分能抑制迟发型变态反应及炎症反应；独活水提物具有抗炎镇痛作用；当归和川芎中的阿魏酸具有增强心肌的血液供应、缓解心肌缺血的作用；秦艽具有抗炎、镇痛、解热作用，通过神经体液系统间接影响脑垂体，促使肾上腺皮质功能加强，皮质激素分泌增加；全方具有抗炎、镇痛、调节免疫、改善微循环作用，从而增加神经组织供血供氧，促进周围神经损伤的修复，是临床上治疗风寒湿痹的常用方剂，具有疏风散寒、祛湿宣痹之功效。
[0003]蠲痹汤属于2018年国家中医药管理局会同国家药品监督管理局制订《古代经典名方目录(第一批)》中的100首经典名方第79首。经典名方是指以古代医籍记载的古代经典名方制备方法为依据制备而得的中药药用物质的标准，除成型工艺外，其余制备方法应当与古代医籍记载基本一致。成型工艺一般采用冷冻干燥、喷雾干燥等不破坏物质组成的方式。经典名方临床疗效确切，运用现代科学技术将经典名方开发承携带方便、便于服用的中药制剂，不仅是对中医药的传承，也能更好的促进经典名方的临床应用。颗粒剂制备工艺相对简单、易赋形，服用、携带方便，在服用形式上与传统汤剂最为一致，能较大限度的保留传统汤剂的优点，因此以汤剂形式服用的经典名方选择颗粒剂最为适宜。
[0004]中药指纹图谱是控制中药质量的重要分析手段，可确保其内在质量均一和稳定。经过十几年的研究和运用，该项技术已日趋成熟，在中药质量标准控制中得到更广泛应用。中药指纹图谱的制作和应用常包括：(1)采集具有代表性的中药样品，采取适当的方法制备供试品溶液，根据确定的分析方法，对一定批次的中药样品进行分析，将所得的多批次数据进行处理，得到标准指纹图谱；(2)将样品按照与标准指纹图谱制作相同的方法进行样品处理、分离分析后，将所得的指纹图谱与标准指纹图谱进行相似度比较，一般相以度大于0.9即可视为该样品为合格。目前关于蠲痹汤的指纹图谱文献甚少，关于该方的成分分析以及质量控制方面也尚无报道。因此，该方具有较大的开发价值。为了更全面、更有效地控制蠲痹汤制剂临床用药的质量，使其安全性和疗效更加有所保障，需要对蠲痹汤组合物采用更为先进的质量检测手段，达到有效地控制蠲痹汤制剂产品质量的目的。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提出一种蠲痹汤物质基准HPLC指纹图谱及测定方法，蠲痹汤物
质基准的指纹图谱测定方法专属性强，重现性、稳定性均较好，方法简便，可更好地控制本品内在质量的目的，故将蠲痹汤物质基准的指纹图谱测定作为本品的质量控制的方法。
[0006]本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0007]本专利技术提供一种蠲痹汤物质基准HPLC指纹图谱的测定方法，包括以下步骤：
[0008]S1.对照品溶液的制备：精密称定绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸、甘草苷、洋川芎内脂I适量，加甲醇溶解，分别制成混合对照品溶液；
[0009]S2.供试品溶液的制备：精密称定蠲痹汤物质基准，置于容量瓶中，加入甲醇定容，超声提取，放冷至室温，补足减失的重量，摇匀，过滤，即得供试品溶液；
[0010]S3.色谱条件：采用AgilentZORBAXSB
‑
C18柱，流动相A相为乙腈，B相为0.05
‑
0.15wt％的甲酸溶液，采用梯度洗脱，流速为0.5
‑
1.5ml/min，柱温为28
‑
32℃，检测波长：280
‑
320nm；进样量为5
‑
15μl；
[0011]S4.测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照步骤S3所述色谱条件测定，即得。
[0012]作为本专利技术的进一步改进，步骤S1中所述混合对照品溶液中绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸、甘草苷、洋川芎内脂I的浓度为0.19
‑
0.21mg/ml、0.19
‑
0.21mg/ml、0.19
‑
0.21mg/ml、0.09
‑
0.11mg/ml、0.09
‑
0.11mg/ml。
[0013]作为本专利技术的进一步改进，步骤S2中所述超声提取时间为30
‑
50min，功率为180
‑
220W，频率为35
‑
45kHz。
[0014]作为本专利技术的进一步改进，步骤S2中所述超声提取时间为40min，功率为200W，频率为40kHz。
[0015]作为本专利技术的进一步改进，步骤S3中所述AgilentZORBAXSB
‑
C18柱的规格为250mm
×
4.6mm，粒径为5μm。
[0016]作为本专利技术的进一步改进，步骤S3中所述色谱条件：采用AgilentZORBAXSB
‑
C18柱，流动相A相为乙腈，B相为0.1wt％的甲酸溶液，采用梯度洗脱，流速为1ml/min，柱温为30℃，检测波长：300nm；进样量为10μl。
[0017]作为本专利技术的进一步改进，步骤S3中所述梯度洗脱条件为：5min，5％A相；5
→
20min，5
→
12％A相；20
→
40min，12
→
20％A相；40
→
50min，20％A相；50
→
65min，20
→
90％A相；65
→
80min，90％A相。
[0018]本专利技术进一步保护一种上述的测定方法得到的蠲痹汤物质基准HPLC指纹图谱。
[0019]作为本专利技术的进一步改进，所述图谱上共生成11个共有特征峰，从左至右依次编号，第6号色谱峰为阿魏酸。
[0020]本专利技术具有如下有益效果：通过应用HPLC
‑
UV法对10批蠲痹汤进行指纹图谱测定，以阿魏酸的色谱峰为参照峰，建立了蠲痹汤的指纹图谱。通过对10批蠲痹汤指纹图谱进行分析，共生成11个共有峰；将各味药材图谱、样品图谱进行对比，确定了各共有峰的归属。蠲痹汤物质基准的指纹图谱测定方法专属性强，重现性、稳定性均较好，方法简便，可更好地控制本品内在质量的目的，故将蠲痹汤物质基准的指纹图谱测定作为本品的质量控制的方法。
附图说明
[0021]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蠲痹汤物质基准HPLC指纹图谱的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.对照品溶液的制备：精密称定绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸、甘草苷、洋川芎内脂I适量，加甲醇溶解，分别制成混合对照品溶液；S2.供试品溶液的制备：精密称定蠲痹汤物质基准，置于容量瓶中，加入甲醇定容，超声提取，放冷至室温，补足减失的重量，摇匀，过滤，即得供试品溶液；S3.色谱条件：采用AgilentZORBAXSB
‑
C18柱，流动相A相为乙腈，B相为0.05
‑
0.15wt％的甲酸溶液，采用梯度洗脱，流速为0.5
‑
1.5ml/min，柱温为28
‑
32℃，检测波长：280
‑
320nm；进样量为5
‑
15μl；S4.测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪，按照步骤S3所述色谱条件测定，即得。2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤S1中所述混合对照品溶液中绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸、甘草苷、洋川芎内脂I的浓度为0.19
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0.21mg/ml、0.19
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0.21mg/ml、0.19
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0.21mg/ml、0.09
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0.11mg/ml、0.09
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0.11mg/ml。3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤S2中所述超声提取时间为30
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50min，功率为180
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：罗宇东，陈晓艺，韦雯怡，谭安蔷，邹意华，
申请(专利权)人：广西中医药大学百年乐制药有限公司，
类型：发明
国别省市：