本申请涉及一种雌二醇衍生物、其制备方法、检测试剂盒及雌二醇定量检测方法，该雌二醇衍生物具有式一所示结构式，可作为雌二醇单分子发光标记物，其标记比例固定，批间差小，从而提高临床上雌二醇的检测精确度。而提高临床上雌二醇的检测精确度。而提高临床上雌二醇的检测精确度。
【技术实现步骤摘要】
雌二醇衍生物、其制备方法、检测试剂盒及雌二醇定量检测方法
[0001]本申请涉及一种雌二醇衍生物、其制备方法、检测试剂盒及雌二醇定量检测方法，属于化学发光免疫检测领域。
技术介绍
[0002]雌二醇(Estradiol，E2)是一种甾体雌激素，有α，β两种类型。温特斯坦纳等(Wintersteiner et al.1935)曾从妊娠马尿中提取出来，此外也可从妊妇尿、人胎盘、猪卵巢等中获得；同时，雄马的精巢或尿中也存在。
[0003]由于雌二醇有很强的性激素作用，所以认为它或它的酯实际上是卵巢分泌的最重要的性激素。且雌二醇的苯甲酸酯是决定性激素效价的国际单位的基准物质之一而被采用。基于上述原因，检查血、尿中雌二醇对诊断性早熟、发育不良等内分泌及妇科疾病有应用价值。
[0004]目前化学发光免疫检测临床雌二醇样本的方法是：采用竞争法检测血清中的雌二醇含量，所用的抗原原料都是偶联标记到载体蛋白上，然后再把发光分子吖啶盐(AE)也标记到同一蛋白上，和血清中雌二醇进行竞争反应与抗体结合，当血清中雌二醇含量越高，检测到的发光值就越低；当血清中的雌二醇含量越低，检测到的发光值就约高，并通过校准曲线来确定血清中的雌二醇含量。
[0005]然而，该检测方法的弊端是由于雌二醇和发光分子吖啶盐的标记量无法准确控制，造成批间差比较大，从而影响最终检测精确度。
技术实现思路
[0006]本申请的目的在于提供一种雌二醇衍生物、其制备方法、检测试剂盒及雌二醇定量检测方法，该雌二醇衍生物可作为雌二醇单分子发光标记物，其标记比例固定，批间差小，从而提高临床上雌二醇的检测精确度。
[0007]为达到上述目的，本申请提供如下技术方案：
[0008]第一方面，本申请提供雌二醇衍生物，该雌二醇衍生物具有式一所示结构式：
[0009](式一)
[0010][0011]第二方面，本申请提供一种雌二醇衍生物的制备方法，其包括以下步骤：
[0012]【第一方法】
[0013]S101、提供式二表示的化合物；
[0014]S102、将所述式二表示的化合物与AE酸反应，得到所述雌二醇衍生物；
[0015](式二)
[0016][0017]或者，
[0018]包括以下步骤：
[0019]【第二方法】
[0020]S201、提供式三表示的化合物；
[0021]S202、将所述式三表示的化合物与beta
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雌二醇17
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半琥珀酸酯反应，得到所述雌二醇衍生物；
[0022](式三)
[0023][0024]在一些可能的实施方式中，步骤S101中，所述提供式二表示的化合物包括采用以下方法：
[0025]提供beta
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雌二醇17
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半琥珀酸酯，在惰性溶剂、碱存在的条件下，使所述beta
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雌二醇17
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半琥珀酸酯与Boc
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乙二胺进行亲核取代反应；
[0026]脱去反应产物中的Boc基团得到所述式二表示的化合物。
[0027]在一些可能的实施方式中，所述在惰性溶剂、碱存在的条件下，使beta
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雌二醇17
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半琥珀酸酯与Boc
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乙二胺进行亲核取代反应包括：
[0028]将beta
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雌二醇17
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半琥珀酸酯与Boc
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乙二胺加入至N,N
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二甲基甲酰胺(N,N
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Dimethylformamide，DMF)中，并向其中加入N,N
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二异丙基乙胺(N,N
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Diisopropylethylamine，DIEA)和O
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苯并三氮唑
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四甲基脲六氟磷酸酯(O
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Benzotriazole
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N,N,N',N'
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tetramethyl
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uronium
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hexafluophosphate，HBTU)。
[0029]在一些可能的实施方式中，所述beta
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雌二醇17
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半琥珀酸酯与Boc
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乙二胺反应完成后，还包括：
[0030]减压除去DMF，加入适量的乙酸乙酯，并使用稀盐酸、饱和食盐水、饱和NaHCO3中的一种或多种进行洗涤，随后用无水硫酸钠进行干燥，浓缩得到式四所示的化合物；
[0031](式四)
[0032][0033]在一些可能的实施方式中，所述脱去反应产物中的Boc基团得到所述式二表示的化合物包括：
[0034]将反应后的产物加入至二氯甲烷(Dichloromethane，DCM)和三氟乙酸(Trifluoroacetic acid，TFA)溶液中，反应得到所述式二表示的化合物。
[0035]在一些可能的实施方式中，步骤S201中，所述提供式三表示的化合物包括采用以下方法：
[0036]提供AE酸，在惰性溶剂、碱存在的条件下，使所述AE酸与Boc
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乙二胺进行亲核取代反应；
[0037]脱去反应产物的Boc基团得到式三表示的化合物。
[0038]在一些可能的实施方式中，所述提供AE酸，在惰性溶剂、碱存在的条件下，使所述AE酸与Boc
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乙二胺进行亲核取代反应包括：
[0039]将AE酸与Boc
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乙二胺加入至DMF中，并向其中加入DIEA和HBTU进行反应。
[0040]在一些可能的实施方式中，所述AE酸与Boc
‑
乙二胺反应完成后，还包括：
[0041]减压除去DMF，加入适量的乙酸乙酯，并使用稀盐酸、饱和食盐水、饱和NaHCO3中的一种或多种进行洗涤，随后用无水硫酸钠进行干燥，浓缩得到式八所示的化合物：
[0042](式八)
[0043][0044]在一些可能的实施方式中，所述AE酸具有式五所示的结构式：
[0045](式五)
[0046][0047]在一些可能的实施方式中，所述脱去反应产物的Boc基团得到式三表示的化合物包括：
[0048]将反应后的产物加入至DCM和TFA溶液中，反应得到所述式三表示的化合物。
[0049]在一些可能的实施方式中，所述beta
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雌二醇17
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半琥珀酸酯通过雌二醇和丁二酸酐反应得到。
[0050]第三方面，本申请提供根据第一方面所述的雌二醇衍生物的立体异构体或互变异构体。
[0051]第四方面，本申请提供一种检测试剂盒，其含有第一方面所述的雌二醇衍生物和/或第三方面所述的立体异构体或互变异构体在制备免疫检测产品中的应用。
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种雌二醇衍生物，其特征在于，具有式一所示结构式：(式一)2.根据权利要求1所述的雌二醇衍生物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：S201、提供式三表示的化合物；S202、将所述式三表示的化合物与beta
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雌二醇17
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半琥珀酸酯反应，得到所述雌二醇衍生物；(式三)3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S201中，所述提供式三表示的化合物包括采用以下方法：提供AE酸，在惰性溶剂、碱存在的条件下，使所述AE酸与Boc
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乙二胺进行亲核取代反应；脱去反应产物中的Boc基团得到式三表示的化合物。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述提供AE酸，在惰性溶剂、碱存在的条件下，使所述AE酸与Boc
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乙二胺进行亲核取代反应包括：将AE酸与Boc
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乙二胺加入至DMF中，并向其中加入...
【专利技术属性】
技术研发人员：张冬冬，陈梁，
申请(专利权)人：英科新创苏州生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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