一种扩增犬冠状病毒S基因全序列的引物、方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种扩增犬冠状病毒S基因全序列的引物、方法和应用，引物序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.2所示；方法包括以下步骤:步骤一、提取病毒RNA；步骤二、cDNA合成；步骤三、PCR扩增；步骤四、基因片段检测及测序。本发明专利技术还提供了一种犬冠状病毒S基因全序列扩增方法的应用，用于对犬冠状病毒S基因全序列的检测与分析。本公开的扩增方法，无需采用常规多对引物进行拼接的方案，通过设计1对引物即实现了犬冠状病毒S基因S基因全序列的扩增，不仅操作便捷，还可以避免在高变区域无法扩增获得目的片段的风险。的片段的风险。的片段的风险。

【技术实现步骤摘要】
一种扩增犬冠状病毒S基因全序列的引物、方法和应用


[0001]本专利技术涉及犬冠状病毒S基因全序列扩增
，更具体地说是涉及一种扩增犬冠状病毒S基因全序列的引物、方法和应用。

技术介绍

[0002]犬冠状病毒(Canine coroanvires，CCoV)是引起犬肠道疾病最主要的病原之一，可引起犬的急性胃肠炎，临床上表现为频繁呕吐、腹泻、沉郁、厌食以及高发病率和低死亡率。该病毒既能单独致病，也可与犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒等病原微生物发生混合感染，导致严重的临床症状，显著提高致死率，是当前严重威胁我国养犬业的病原之一。
[0003]犬冠状病毒属于套式病毒目、冠状病毒科、冠状病毒属成员，是一种带囊膜的单链正股RNA病毒，基因组大小为27
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32kb之间，编码4个结构蛋白 (S、E、M、N)和6个非结构蛋白(ORF1ab、ORF3a、ORF3b、ORF3c、O RF7a、ORF7b)。其中，S蛋白位于病毒最外层，是一种重要的结构蛋白。研究发现，S蛋白的N端与宿主细胞表面的受体结合相关，可使病毒与细胞膜靠近，并参本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种扩增犬冠状病毒S基因全序列的引物，其特征在于，其核苷酸序列如下:上游引物CCoV
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S1：GTTGGATTACTAAGGAARGGTA；SEQ ID NO.1；其中，R为A或G；下游引物CCoV
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S2：GTACAGCGTCTACGGATG；SEQ ID NO.2。2.权利要求1所述的引物制备扩增和检测犬冠状病毒S基因序列试剂盒中的应用。3.一种扩增和检测犬冠状病毒S基因序列的试剂盒，其特征在于，包括SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.2所示的引物，其中，上游引物为1μL，浓度为10pmol/μL；下游引物为1μL，浓度是10pmol/μL。4.根据权利要求3所述的一种扩增和检测犬冠状病毒S基因序列的试剂盒，其特征在于，还包括：2
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GreenTaqMix 12.5μL、cDNA 1μL、dd...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄翠琴，包银莉，郑灿阳，高峰，曾旭健，
申请(专利权)人：龙岩学院，
类型：发明
国别省市：