一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的方法，涉及生物技术领域，该方法包括：将甜瓜蔓枯病病原菌接种于液体培养基中，培养得到所述甜瓜蔓枯病病原菌的分生孢子；其中，所述液体培养基中含有黄腐酸钾。本发明专利技术改变了培养甜瓜蔓枯病病原菌的PD液体培养基中葡萄糖的含量，并确定了最佳的葡萄糖用量，在此基础上，还在PD液体培养基中添加了黄腐酸钾，优化了培养温度，通过观测甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产生量，证明本发明专利技术的方法可以有效提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢速率和产孢量。和产孢量。和产孢量。

【技术实现步骤摘要】
一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的方法


[0001]本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的方法。

技术介绍

[0002]甜瓜蔓枯病是甜瓜栽培中常见的土传病害之一，主要危害叶片和茎蔓，发生严重时，导致植株死亡，减产严重。在甜瓜抗蔓枯病研究中，诱导甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产生是甜瓜蔓枯病回接试验和育种材料抗性接种鉴定试验中的关键点。在大量的研究中发现，甜瓜蔓枯病病原菌的不同类型菌株产生分生孢子的差异较大，且相较于其他病原菌，甜瓜蔓枯病病原菌不易产生分生孢子，这在一定程度上增加了对甜瓜抗蔓枯病研究的难度。前人研究中，诱导甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产生采用的主要方法包括暗培养和紫外间歇照射对分生孢子的产孢诱导法、菌落培养法(即利用平板上培养甜瓜蔓枯病病原菌菌落，用蒸馏水冲洗分生孢子)和活体产孢法(即利用黄瓜活体培养甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子)。暗培养和紫外间歇照射这种诱导产孢方法为了获得量大的甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子，还会在培养甜瓜蔓枯病病原菌的分生孢子的液体培养基中加入稀酸或乳酸进行调节，虽然能够产生大量的分生孢子，但其试验操作过程要求更为严格和复杂；菌落培养法和活体产孢法难以满足大规模抗病回接鉴定试验或育种材料抗性接种鉴定试验的需要。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的方法，以解决上述现有技术存在的问题，本专利技术的方法可以有效提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢速率和产孢量。
[0004]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0005]本专利技术提供一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的方法，包括：将甜瓜蔓枯病病原菌接种于液体培养基中，培养得到所述甜瓜蔓枯病病原菌的分生孢子；其中，所述液体培养基中含有黄腐酸钾。
[0006]进一步地，所述黄腐酸钾在所述液体培养基中的含量为0.1g/L。
[0007]进一步地，所述液体培养基的配方具体为：土豆200g，葡萄糖10g，黄腐酸钾0.1g，蒸馏水1000mL，pH值自然。
[0008]进一步地，所述培养的温度为28℃。
[0009]进一步地，所述培养的转速为180r/min。
[0010]进一步地，所述黄腐酸钾为黄腐酸钾。
[0011]本专利技术还提供黄腐酸钾在提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢速率或产孢量中的应用。
[0012]进一步地，所述黄腐酸钾为黄腐酸钾。
[0013]本专利技术还提供一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的培养基，所述培养基
包含黄腐酸钾。
[0014]进一步地，所述黄腐酸钾在所述培养基中的添加量为0.1g/L。
[0015]本专利技术公开了以下技术效果：
[0016]本专利技术改变了培养甜瓜蔓枯病病原菌的PD(土豆葡萄糖液体培养基，培养基配方土豆200g，葡萄糖20g，蒸馏水1000mL；pH值自然)液体培养基中葡萄糖的含量，并确定了最佳的葡萄糖用量(10g)，在此基础上，在扩繁甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子的PD液体培养基中添加了黄腐酸钾(最优添加量0.10g)，在不同温度条件下，观测甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产生量。试验结果表明，在28℃条件下诱导的甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子量大，在培养的第12天，孢子量就达到8.8
×
10
11
个/mL，且稳定性好。上述方法在保证甜瓜蔓枯病病原菌诱导分生孢子产生的条件下，简化了诱导甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产生过程，取消了紫外光间歇照射环节、取消了利用对PD培养基进行稀酸或乳酸调节环节。本专利技术在PD培养基中添加黄腐酸钾，提高了PD液体培养基培养甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢速率，缩短了2天的培养时间，提高了甜瓜蔓枯病分生孢子繁殖量。
附图说明
[0017]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0018]图1为实施例1表1中CK处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0019]图2为实施例1表1中T1处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0020]图3为实施例1表1中T2处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0021]图4为实施例1表1中T3处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0022]图5为实施例1表1中T4处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0023]图6为实施例1表2中CK处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0024]图7为实施例1表2中T1处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0025]图8为实施例1表2中T2处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0026]图9为实施例1表2中T3处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0027]图10为实施例1表3中CK处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0028]图11为实施例1表3中T1处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0029]图12为实施例1表3中T2处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0030]图13为实施例1表3中T3处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0031]图14为实施例1表4中CK处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0032]图15为实施例1表4中T1处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0033]图16为实施例1表4中T2处理在40倍显微镜下的观测结果；
[0034]图17为实施例1表4中T3处理在40倍显微镜下的观测结果。
具体实施方式
[0035]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限
制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0036]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值，以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0037]除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
[0038]在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本专利技术说明书和实施例仅是示例本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高甜瓜蔓枯病病原菌分生孢子产孢量的方法，其特征在于，包括：将甜瓜蔓枯病病原菌接种于液体培养基中，培养得到所述甜瓜蔓枯病病原菌的分生孢子；其中，所述液体培养基中含有黄腐酸钾。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述黄腐酸钾在所述液体培养基中的含量为0.1g/L。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述液体培养基的配方具体为：土豆200g，葡萄糖10g，黄腐酸钾0.1g，蒸馏水1000mL，pH值自然。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养的温度为...

【专利技术属性】
技术研发人员：靳亚忠，李春霞，何淑平，吴兴彪，佟瑶，熊亚男，盛云燕，杨凤军，
申请(专利权)人：黑龙江八一农垦大学，
类型：发明
国别省市：