用于针对无症状个体中的癌症、癌症复发和癌前病症的群体筛选的方法、装置和试剂盒。本公开内容涉及用于生物样品中存在的碳水化合物及相关病症(包括癌性和癌前病症)的筛选测试方法、装置和试剂盒。具体地，所述方法使用半乳糖氧化酶试剂和席夫试剂测试生物样品中的异常碳水化合物。所述筛选测试方法、装置和试剂盒在一系列已知条件下和在其他方面健康的群体中提供了扩展的测试能力。本公开内容还涉及所述装置或试剂盒用于在即时设施或家中对无明显体征和症状的人中的癌性和癌前病症以及癌症复发进行初步评价的用途。及癌症复发进行初步评价的用途。及癌症复发进行初步评价的用途。
【技术实现步骤摘要】
用于针对无症状个体中的癌症、癌症复发和癌前病症的群体筛选的方法、装置和试剂盒
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请是于2020年7月23日提交的美国非临时专利申请No.16/937,051的部分继续申请以及于2020年7月23日提交的美国非临时专利申请No.16/936,998的部分继续申请。本申请还要求于2019年8月29日提交的美国临时申请No.62/893,484和62/893,477的优先权和权益；其全部内容通过引用整体并入本文。
[0003]本专利技术涉及对在其他方面健康的群体和/或个体中的癌前病症进行筛选测试，并且涉及包含用于进行该测试所需组分的试剂盒。
技术介绍
[0004]癌症是世界上主要的公共健康问题。即使开发出用于治疗癌症的药剂，早期检测和预防仍然是对抗这种人类悲剧的最大希望。在美国专利No.4,857,457和在Shamsuddin et uno.，Human Pathology，19：7
‑
10，1988中(二者均通过引用整体并入本文)，报道了用于结直肠癌的测试，该测试可使用直肠黏液来检测提高的大肠癌风险。黏液通过润湿纤维素膜过滤器与酶半乳糖氧化酶反应，该过滤器先前已用酶的磷酸盐缓冲溶液浸渍然后冻干；并且然后使润湿的纤维素膜过滤器与带有黏液样品的Metricel膜过滤器接触1至2小时。然后将带有黏液的膜过滤器用蒸馏水洗涤1分钟，与碱性品红(basic fuchsin)反应15分钟，在自来水中洗涤10分钟，然后风干。
[0005]这个基本程序虽然简单，但目前用于检测结直肠癌和癌前病症。然而，此后发现所公开的筛选程序(即，使用其中使用的标志物二糖作为结直肠癌的预测指标)并不限于大肠癌。相反，例如，如通过引用整体并入本文的授予Shamsuddin的美国专利No.5,162,202和5,348,860中所描述的，二糖标志物可存在于身体周围具有类似癌前或癌性特征的其他部位。此外，其中描述的测试是冗长的。
[0006]人中的大多数癌症被认为是通过吸入的空气、摄入的食物、消耗的水和饮料等而暴露于一种或更多种环境致癌物的结果。致癌物通过大肠或肾和膀胱、或肺、皮肤(通过汗液)等排泄。因此，除了同时在带有癌和前癌(precancer)的器官中引起相应变化之外，可预期致癌物和/或其代谢物引起那些器官中的变化。前癌或癌前病症是那些使在其他方面健康的、无症状的个体对随后的癌症(高风险症状)高度易感的阶段或疾病，因为其可发展为癌症。因此，通过本专利技术的方法，首先使用直肠粘液取样，随后如果需要的话，通过对其他体液(例如乳腺、前列腺的分泌物、精液、宫颈和阴道黏液、痰、支气管或肺泡分泌物)进行取样，直到定位癌性或癌前病症的精确位置，可准确地检测个体体内(包括但不限于大肠)中癌性和癌前病症的存在或威胁，而无先前的假阴性风险，所述假阴性风险限制了该技术作为筛选测试，特别是作为一般群体的现场测试的价值。本文中公开的专利技术具有准确且可靠地检测未表现出癌性或癌前病症的体征或症状的个体的任何器官中的癌症和癌前病症的
出乎意料的益处。
[0007]如本文中提供的公开内容可另外地用于通过为无癌前病症的明显体征或症状的人提供常规筛选过程来拯救生命。如古老的格言所说：“一盎司的预防比一磅的治疗更好”，本公开内容不仅降低死亡率和发病率，而且在金钱方面，它将显著降低全球患者和提供者等的国家医疗保健成本。
[0008]专利技术目的
[0009]本公开内容的一般目的是提供这样的测试，该测试可例如作为一般群体筛选实践的一部分在公众(包括目前不存在症状或另外表现出需要诊断测试的那些)上进行。本文中提供的筛选测试允许快速测试和结果，从而促进其在不需要特定诊断实验室的大规模测试程序中使用，并允许将测试结果报道至经测试的一个或更多个个体(或其医师)和/或如果阴性结果被确定为假阴性，则在个体离开测试区域之前获得另外的直肠黏液样品。
[0010]又一个目的是提供这样的试剂盒。
[0011]本专利技术的再一个目的是提供用于进行本专利技术的筛选测试的试剂盒，其关键组分是长期稳定的。
[0012]再一个目的是提供用于使用本专利技术的试剂盒进行筛选测试的方法，该方法可在护理点或在对象家中足够快地完成，以在进行测试的个体等待时为其提供测试结果。
[0013]在进一步研究说明书和所附权利要求书之后，本专利技术的进一步目的和优点对于本领域技术人员将变得明显。
技术实现思路
[0014]本公开内容涉及用于癌性和癌前病症的筛选测试方法、装置和试剂盒。具体地，该方法使用半乳糖氧化酶试剂和席夫试剂(Schiff
’
s Reagent)测试黏液或体液中的异常碳水化合物。筛选测试方法、装置和试剂盒提供了提高的准确性，并使处理过程最小化。本公开内容还涉及该装置或试剂盒在健康护理设施中用于对癌性和癌前病症进行初步评价的用途。
[0015]在一个方面中，用于癌性和癌前病症和病变的筛选方法包括以下步骤：将黏液或体液施加至具有预包埋的半乳糖氧化酶的测试条或膜，通过与半乳糖氧化酶反应来使包含标志物碳水化合物的黏液或体液中的标志物碳水化合物氧化，以及使与测试条或膜相邻的具有席夫试剂溶液的容器活化以接触所述测试条或膜，并且其中席夫试剂溶液最初不与测试条或膜接触。
[0016]在一些实施方案中，用于癌性和癌前病症和病变的筛选方法包括选自以下的一个或更多个另外的步骤：在将黏液或体液施加至测试条或膜之前将水施加到测试条或膜上，在使具有席夫试剂溶液的容器活化之前通过洗涤来去除黏液或体液，在使席夫试剂溶液接触测试条或膜之后，用自来水洗涤测试条或膜，干燥测试条或膜，和/或评价测试条或膜的颜色。
[0017]在另一个方面中，用于癌性和癌前病症和病变的装置包含具有预包埋的半乳糖氧化酶的测试条或膜和具有席夫试剂溶液的容器，其中席夫试剂溶液最初不与测试条或膜接触并且可在标志物碳水化合物经半乳糖氧化酶氧化之后被活化以接触测试条或膜。活化碳水化合物席夫试剂溶液(在标志物碳水化合物经半乳糖氧化酶氧化之后，以与测试条或膜
接触)的机制是不受限制的。在一个方面中，该机制可以是扭转阀、可破坏屏障等，其中在打开扭转阀或破坏屏障之后，席夫试剂溶液接触测试条或膜。
[0018]在另一个方面中，本公开内容提供了用于癌性和癌前病症的测试试剂盒，其包含具有预包埋的半乳糖氧化酶的测试条或膜和具有席夫试剂溶液的容器。在一个方面中，具有预包埋的半乳糖氧化酶的测试条或膜还包含干培养基，其中一旦将水添加到测试条或膜上，干培养基可使半乳糖氧化酶活化。在另一个方面中，测试条或膜中预包埋的半乳糖氧化酶是微囊化的。
[0019]在一个方面中，用于癌性和癌前病症和病变的筛选方法包括以下步骤：将黏液或体液施加至具有预包埋的席夫试剂的测试条或膜，通过与半乳糖氧化酶反应来使包含标志物碳水化合物的黏液或体液中的标志物碳水化合物氧化，并使包埋在测试条或膜中的席夫试剂活化以接触测试条或膜。
[0020]在一些实施方案中，用于癌性本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.用于快速测试对象的癌性或癌前病症的筛选方法，其中所述对象未表现出癌性或癌前病症的明显体征或症状，所述方法包括以下步骤：(a)从个体获得生物样品；(b)通过以下来测定所述样品的一部分中包含选自β
‑
D
‑
Gal
‑
(1
→
3)
‑
D
‑
GalNAc、Fuc
‑
α
‑1→
2Gal
‑
α(1
→
4)
‑
Fuc
‑
α
‑1→3‑
GlcNAc、Fuc
‑
α
‑1→
2Gal
‑
β
‑
(1
→
4)
‑
Fuc
‑
α
‑1→3‑
GlcNAc
‑
β
‑
(1
→
3)
‑
Gal
‑
β
‑
(1
→
4)
‑
GlcNAc和Fuc
‑
α
‑1→2‑
Gal
‑
β
‑
(1
→
4)
‑
Fuc
‑
α
‑1→3‑
GlcNAc
‑
β
‑
(1
→
3)
‑
Gal
‑
β
‑
(1
→
4)
‑
Fuc
‑
α
‑1→3‑
GlcNAc的至少一种碳水化合物的糖蛋白的存在：简短地使所述样品经受氧化条件，该条件能够仅在其带有羟基的环碳原子处选择性氧化该样品的糖蛋白中所存在的任何所述标志物碳水化合物的环状糖部分，以形成醛糖部分，并随后用席夫碱染料使由此形成的任何醛糖基团显现；(c)还通过以下来测定所述生物样品的一部分中任何糖蛋白的存在：使所述样品经受氧化剂的氧化作用，这使其中的任何糖蛋白的糖部分氧化成醛糖部分，并随后使任何由此产生的醛糖部分显现，存在由此形成的醛糖部分证明取样是适当的，而其中缺少由此形成的醛糖部分则说明阴性测试结果是由于取样错误造成的；(d)如果第一样品在步骤(b)和(c)中测定为阴性，则以相同的方式用新的生物样品重新测试所述个体；以及(e)基于所述席夫碱染料中显现的颜色变化，将无症状患者诊断为患有癌症或癌前病症。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述测定包括以下步骤：将所述生物样品吸附到捕获蛋白质的水不溶性基质上，并随后洗涤所述基质以从所述基质上去除样品中的未固定组分。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述不溶性基质是膜过滤器。4.根据权利要求1所述的方法，其中通过以下来测定所述标志物碳水化合物糖部分：选择性氧化所述糖蛋白以使其任何半乳糖部分中的伯羟基选择性氧化成醛基，并随后对由此氧化的糖蛋白测试经氧化的邻近半乳糖部分。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述半乳糖部分用半乳糖氧化酶氧化。6.根据权利要求4所述的方法，其对从多个个体获得的多个生物样品同时进行，作为针对癌症的现场筛查的一部分。7.根据权利要求5所述的方法，其中用碱性品红使所述经氧化的邻近半乳糖部分显现。8.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(c)与步骤(b)用同一生物样品的不同部分同时进行；并且其中在步骤(b)和(c)二者中均获得阴性结果时，随后立即在从所述个体中收集的生物样品的另一个样品中重复步骤(a)、(b)和(c)。9.根据权利要求8所述的方法，其中用碱性品红使进一步用高碘酸氧化的样品中的任何醛糖部分显现。10.根据权利要求1所述的方法，其中在其测定之前，将所述生物样品吸附到捕获蛋白质的水不溶性基质上，并随后洗涤所述基质以从所述基质上去除所述生物样品的未固定组分；...
【专利技术属性】
技术研发人员：阿布卡拉姆，
申请(专利权)人：基姆，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。