肝癌诱导添加剂及其制备方法、肝癌诱导饲料和肝癌动物模型的建立方法技术

本发明专利技术涉及人类疾病动物模型研究技术领域，特别涉及肝癌诱导添加剂及其制备方法、肝癌诱导饲料和肝癌动物模型的建立方法。以重量份计，该肝癌诱导添加剂由如下原料制成：黑米20～25份、红枣7～10份、刀豆3～6份、天麻4～8份、枸骨叶2～5份、2～乙酰氨基芴4～7份。本发明专利技术肝癌动物模型的建立方法，采用成年西藏小型猪为试验对象，能够建立生物学特性稳定的小型猪肝癌模型，建立周期短，发展快，且在建模过程中成年西藏小型猪的病死率低，建模成功率高，具有重要的市场价值和社会价值。具有重要的市场价值和社会价值。

【技术实现步骤摘要】
肝癌诱导添加剂及其制备方法、肝癌诱导饲料和肝癌动物模型的建立方法


[0001]本专利技术涉及人类疾病动物模型研究
，特别涉及肝癌诱导添加剂及其制备方法、肝癌诱导饲料和肝癌动物模型的建立方法。

技术介绍

[0002]现代医药的研发是一个非常漫长和昂贵的过程。在发达国家里，一个新药的上市通常需要十年左右的时间研究开发。需要几亿至几十亿美元的科研经费。如果在研发早期，使用合适动物模型、准确而灵敏的技术，早期深入了解新药候选物对活体的影响，对新药候选物进行筛选，对成药性分析，可提高新药研发成功率，降低临床前和临床试验各阶段的风险，明显降低研发成本。
[0003]新药研发离不开动物实验。构建稳定、高质量的肿瘤、退行性疾病和骨质疏松症动物模型是新药研发的实施的基础条件之一。世界各国均规定，新药临床前安全评价，必须在两种以上动物种类(其中至少一种是非啮齿类大动物，通常为猴子、犬和猪)的毒性安全评价实验中证明是安全的。
[0004]猪作为人类最早豢养的动物，其杂食性与人类相同，而与犬(肉食性)和猴(素食性)相差迥异。其生理功能、物质代谢方式、器官形态和疾病发生机制等与人类非常相似。猪与人类有着相似的细胞色素氧化酶P450系统，重要代谢酶学特征决定着药物在其体内的生物转化与人极为相似，是药物安全性评价及筛选、人类疾病的理想模型动物，尤其在抗肿瘤药物、心血管系统药物、皮肤渗透性药物、非甾体类抗生素、消化系统用药方面表现出明显优于犬和非人灵长类的优势。加之小型猪饲养成本低，操作简便，因此小型猪人类疾病模型应用于新药开发研究已成为国际范围内的焦点。
[0005]我国具有丰富而独特的小型猪资源，其中西藏小型猪在生物医药领域特别是新药筛选及安全性评价的应用备受青睐。研究结果表明，西藏小型猪遗传特性稳定，性成熟早、基因较纯、抗逆行强。在药物筛选及安全性评价、皮肤烧伤研究、心血管疾病研究、糖尿病研究以及器官移植研究等方面，具有独特的优越性。
[0006]肝癌为最常见的一种恶性肿瘤，建立小型猪肝癌模型具有重要的市场价值和社会价值。现有的小型猪肝癌模型建立方法普遍存在建模周期长、病死率高的缺陷。

技术实现思路

[0007]有鉴于此，本专利技术提供了肝癌诱导添加剂及其制备方法、肝癌诱导饲料和肝癌动物模型的建立方法。该肝癌动物模型的建立方法，采用成年西藏小型猪为试验对象，能够建立生物学特性稳定的小型猪肝癌模型，建立周期短，发展快，且在建模过程中成年西藏小型猪的病死率低，建模成功率高。
[0008]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0009]本专利技术提供了一种肝癌诱导添加剂，以重量份计，由如下原料制成：黑米20～25
份、红枣7～10份、刀豆3～6份、天麻4～8份、枸骨叶2～5份、2～乙酰氨基芴4～7份。
[0010]作为优选，以重量份计，由如下原料制成：黑米21～24份、红枣8～9份、刀豆4～5份、天麻5～7份、枸骨叶3～4份、2～乙酰氨基芴5～6份。
[0011]更优选地，以重量份计，由如下原料制成：黑米23份、红枣9份、刀豆4份、天麻6份、枸骨叶4份、2
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乙酰氨基芴5份。
[0012]本专利技术还提供了该肝癌诱导添加剂的制备方法，包括如下步骤：
[0013]将黑米和刀豆粉碎、过筛、混合均匀，获得第一混合物；
[0014]将天麻和枸骨叶采用乙醇水溶液进行回流提取，获得回流提取液和残渣；将残渣采用乙醇水溶液进行超声波提取，获得超声波提取液；将回流提取液和超声波提取液合并，经浓缩、干燥后，得到第二混合物；
[0015]将红枣去核、切粒，获得红枣颗粒；
[0016]将第一混合物、第二混合物、红枣颗粒和2
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乙酰氨基芴合并，混合均匀。
[0017]作为优选，回流提取的条件为：乙醇水溶液的浓度为60％～80％，乙醇水溶液的用量为天麻和枸骨叶总重量的10～15倍，回流提取的次数为1～2次，一次提取的时间为0.5～2小时。
[0018]优选地，回流提取的条件为：乙醇水溶液的浓度为70％，乙醇水溶液的用量为天麻和枸骨叶总重量的10～15倍，回流提取的次数为1～2次，第一次提取的时间为1～2小时，第二次提取的时间为0.5～1小时。
[0019]作为优选，过筛为过30～50目筛。
[0020]作为优选，超声波提取的条件为：乙醇水溶液的浓度为60％～80％，乙醇水溶液的用量为天麻和枸骨叶总重量的10～15倍，超声波提取功率为1000～1200W，提取时间为40～50min。
[0021]优选地，超声波提取的条件为：乙醇水溶液的浓度为70％，乙醇水溶液的用量为天麻和枸骨叶总重量的10～15倍，超声波提取功率为1100W，提取时间为40～50min。
[0022]作为优选，浓缩为蒸发浓缩。
[0023]作为优选，干燥为喷雾干燥。
[0024]本专利技术还提供了一种肝癌诱导饲料，包括肝癌诱导添加剂和标准饲料。
[0025]作为优选，肝癌诱导添加剂与标准饲料的质量百分比为0.10％～0.15％。
[0026]本专利技术还提供了一种肝癌动物模型的建立方法，包括如下步骤：
[0027]一至六周，采用上述肝癌诱导饲料饲喂动物；七至八周，改用标准饲料进行饲喂；
[0028]肝癌诱导饲料饲喂一周后，采用二乙基亚硝胺对动物进行腹腔用药；
[0029]一至二周，采用灭菌水作为动物的自由饮用水；三至四周，采用二乙基亚硝胺水溶液作为动物的自由饮用水；五至八周，采用灭菌水作为动物的自由饮用水。
[0030]本专利技术以成年西藏小型猪作为对象，通过肝癌诱导饲料饲喂、腹腔一次性注射二乙基亚硝胺、采用0.08％的二乙基亚硝胺水溶液作为自由饮用水这三种措施进行诱癌，调整三种措施的实施时机及实施时间，最终获得小型猪肝癌模型。本专利技术小型猪肝癌模型的建立方法，采用成年西藏小型猪能够建立生物学特性稳定的小型猪肝癌模型，建立周期短，发展快，且在建模过程中成年西藏小型猪的病死率低，建模成功率高，具有重要的市场价值和社会价值。
[0031]作为优选，二乙基亚硝胺的腹腔用药剂量为80～100mg/kg体重；
[0032]作为优选，二乙基亚硝胺水溶液的浓度为0.05～0.10％。
[0033]优选地，二乙基亚硝胺水溶液的浓度为0.08％。
[0034]作为优选，动物为小型猪。
[0035]在本专利技术提供的具体实施例中，小型猪为体重为25～28kg的成年西藏小型猪。
[0036]本专利技术提供了肝癌诱导添加剂及其制备方法、肝癌诱导饲料和肝癌动物模型的建立方法。以重量份计，该肝癌诱导添加剂由如下原料制成：黑米20～25份、红枣7～10份、刀豆3～6份、天麻4～8份、枸骨叶2～5份、2～乙酰氨基芴4～7份。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0037]本专利技术肝癌动物模型的建立方法，采用成年西藏小型猪为试验对象，能够建立生物学特性稳定的小型猪肝癌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肝癌诱导添加剂，其特征在于，以重量份计，由如下原料制成：黑米20～25份、红枣7～10份、刀豆3～6份、天麻4～8份、枸骨叶2～5份、2～乙酰氨基芴4～7份。2.根据权利要求1所述的肝癌诱导添加剂，其特征在于，以重量份计，由如下原料制成：黑米21～24份、红枣8～9份、刀豆4～5份、天麻5～7份、枸骨叶3～4份、2～乙酰氨基芴5～6份。3.权利要求1或2所述肝癌诱导添加剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将黑米和刀豆粉碎、过筛、混合均匀，获得第一混合物；将天麻和枸骨叶采用乙醇水溶液进行回流提取，获得回流提取液和残渣；将残渣采用乙醇水溶液进行超声波提取，获得超声波提取液；将回流提取液和超声波提取液合并，经浓缩、干燥后，得到第二混合物；将红枣去核、切粒，获得红枣颗粒；将第一混合物、第二混合物、红枣颗粒和2
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乙酰氨基芴合并，混合均匀。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述回流提取的条件为：乙醇水溶液的浓度为60％～80％，乙醇水溶液的用量为天麻和枸骨叶总重量的10～15倍，回流提取的次数为1～2次，一次提取的时间为0.5～2小时。5.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢水林，别亚男，邹芬，易桦林，欧阳红生，顾为望，
申请(专利权)人：广州华腾生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：