一种阿克曼菌的复合培养基及其制备的粉剂和应用制造技术

本发明专利技术提供一种阿克曼菌的复合培养基，其按质量百分比计，包括以下组分：大豆蛋白胨0.5％

【技术实现步骤摘要】
一种阿克曼菌的复合培养基及其制备的粉剂和应用


[0001]本专利技术涉及培养基领域，尤其涉及一种阿克曼菌的复合培养基及其粉剂的制备方法和应用。

技术介绍

[0002]肥胖和代谢综合征已经成为威胁人们健康生存质量的严重问题。
[0003]阿克曼菌是最具开发潜力的新一代明星肠道有益细菌。最近发表在PNAS和Nature Medicine等期刊的研究结果显示，阿克曼活菌或巴氏灭活菌具有显著改善糖脂代谢、治疗肥胖糖尿病、血脂异常等代谢综合征的作用。作为一种有潜力的益生菌，阿克曼菌以粘蛋白为食，在含有粘蛋白的培养基中生长速度和状态佳。但是，来自粘蛋白培养阿克曼细菌在推广中可能会涉及许多伦理问题。因此，德国研究团队针对阿克曼菌的特性，研制出一套不使用粘蛋白的培养基，被称之为阿克曼菌合成培养基，该培养基由十几种化学物质配成，涉及多种成分且成分占比复杂，这为阿克曼菌的推广及商业化应用带来了许多阻碍。

技术实现思路

[0004]鉴于上述现有技术存在的缺陷，本专利技术的目的是提出一种阿克曼菌的复合培养基及其粉剂的制备方法和应用，可以直接用于培养阿克曼菌，特别适用于大规模的阿克曼菌培养。
[0005]本专利技术的目的将通过以下技术方案得以实现：
[0006]本专利技术的目的之一在于提供一种阿克曼菌的复合培养基，其按质量百分比计，包括以下组分：
[0007]大豆蛋白胨0.5％
‑
3％
[0008]胰蛋白胨0.2％
‑
1％
[0009]脑心浸出粉1％
‑
3％
[0010]葡萄糖0.1％
‑
3％
[0011]氯化钠0.2％
‑
0.3％
[0012]磷酸氢二钠0.1％
‑
0.2％
[0013]N
‑
乙酰基葡糖胺0.4％
‑
0.7％
[0014]L
‑
苏氨酸0.3％
‑
0.5％
[0015]L
‑
半胱氨酸盐0.004％
‑
0.006％。
[0016]本专利技术的另一个目的是提供一种由上述的阿克曼菌的复合培养基制成的粉剂。
[0017]本专利技术的另一个目的是提供一种阿克曼菌的复合培养基及其制备的粉剂在培养阿克曼菌中的应用。
[0018]本专利技术的另一个目的是提供一种阿克曼菌的复合培养基及其制备的粉剂在益生元制剂或组分中的应用。
[0019]本专利技术的另一个目的是提供一种阿克曼菌的复合培养基及其制备的粉剂在美容、
减肥或代谢病防治制品或组分中的应用。
[0020]本专利技术的另一个目的是提供一种阿克曼菌的复合培养基及其制备的粉剂在肠道菌群调理制品或组分中的应用。
[0021]本专利技术的另一个目的是提供一种上述的阿克曼菌的复合培养基制成的粉剂的使用方法，在所述粉剂中加入超纯水，过滤除菌后得到阿克曼菌的复合培养基。
[0022]进一步的，所述过滤的滤孔孔径为0.22微米
‑
0.45微米。
[0023]本专利技术的突出效果为：
[0024]本专利技术提供一种阿克曼菌复合培养基及其粉剂，可以很好的支持阿克曼菌生长，并可大规模生产和推广。其粉剂有利于保存和运输，并简化使用端配制程序，只需加入纯水，经过滤后即可直接用于阿克曼菌的培养，无需繁杂的配制过程及高压灭菌，提高实验效率同时亦扩大推广范围。本专利技术还为大规模培养阿克曼菌提供了一种简单、快捷、高效的培养基制备方法。
[0025]以下便结合实施例，对本专利技术的具体实施方式作进一步的详述，以使本专利技术技术方案更易于理解、掌握。
附图说明
[0026]图1为阿克曼菌在本专利技术实施例和对比例的培养基中的培养效率图；
[0027]图2为本专利技术实施例的培养基培养的阿克曼菌的效果图；
[0028]图3为本专利技术实施例的NCBI网站比对结果图。
具体实施方式
[0029]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。
[0030]实施例
[0031]一、阿克曼菌的复合培养基的配制
[0032]将大豆蛋白胨13g，胰蛋白胨5g，脑心浸出粉17.5g，葡萄糖1g，氯化钠2.8g，磷酸氢二钠1.4g，N
‑
乙酰基葡糖胺5.5g，L
‑
苏氨酸4g， L
‑
半胱氨酸盐0.05g，于1L超纯水，简单摇晃混匀至无可见物质后，使用0.22微米的除菌滤筛过滤即可得可直接用于培养阿克曼菌的复合培养基，该溶液澄清无杂质，属于清洁无菌溶液。
[0033]二、通过阿克曼菌培养证实复合培养基粉剂的高效性
[0034]将2ml处于繁殖对数期的阿克曼菌(OD600＝0.8)分别加入48ml粘蛋白培养基和48ml本实施例培养基(经过滤)，放入厌氧箱中同条件下培养48h。此外，两种培养基设置了相应的对照组(粘蛋白培养基使用 50ml空白培养基作对照；本实施例培养基使用50ml作对照)。分别在12h、 24h、36h、48h检测培养基中OD600吸光度值。以上每组设置三次生物学重复。
[0035]结果：
[0036]将粘蛋白空白培养基的OD600吸光检测值设置为粘空白OD
‑
0h、 OD
‑
12h、OD
‑
24h、OD
‑
36h、OD
‑
48h；同理，粘蛋白培养基的OD600吸光度分别为粘OD
‑
0h、OD
‑
12h、OD
‑
24h、OD
‑
36h、OD
‑
48h；本实施例培养基 OD
‑
0h、OD
‑
12h、OD
‑
24h、OD
‑
36h、OD
‑
48h；本实施例培养基OD
‑
0h、OD
‑
12h、 OD
‑
24h、OD
‑
36h、OD
‑
48h；所述结果以同时间下的有菌培养基减去空白培养基解释，以d值表示。上述结果显示：对于细菌生长速率，本实施例培养基在转接等量菌后12h、24h、36h及48h均比粘蛋白培养基长势更佳(附表1)。将时间作为横坐标、OD差值(d)作为纵坐标进行二维图分析，结果见图1。
[0037]表1.粘蛋白培养基与本实施例培养基对菌生长速率的对比
[0038]时间OD(粘蛋白
‑
粘空白)OD(本实施例
‑
空白)P(T
‑
Test)0h0.011
±
0.0030.009
±
0.0020.2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种阿克曼菌的复合培养基，其特征在于：按质量百分比计，包括以下组分：大豆蛋白胨0.5％
‑
3％胰蛋白胨0.2％
‑
1％脑心浸出粉1％
‑
3％葡萄糖0.1％
‑
3％氯化钠0.2％
‑
0.3％磷酸氢二钠0.1％
‑
0.2％N
‑
乙酰基葡糖胺0.4％
‑
0.7％L
‑
苏氨酸0.3％
‑
0.5％L
‑
半胱氨酸盐0.004％
‑
0.006％。2.一种由如权利要求1所述的阿克曼菌的复合培养基制成的粉剂。3.一种如权利要求1
‑
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【专利技术属性】
技术研发人员：贾世奇，马启明，余国兴，
申请(专利权)人：暨南大学附属第一医院广州华侨医院，
类型：发明
国别省市：