一种外泌体富集系统技术方案

本实用新型专利技术公开了一种外泌体富集系统，包括干细胞存放容器和滤膜管；干细胞存放容器上设置有填料口、出液口和回液口；滤膜管内设置有用于阻截培养细胞的大分子滤膜，大分子滤膜将滤膜管分为第一腔室和第二腔室；第一腔室通过端部的供液管与出液口连通，供液管上设置有供液泵，第一腔室通过底部的回液管与回液口连通，第二腔室通过端部的出液管连接至超滤膜抽滤装置。本实用新型专利技术通过大分子滤膜和超滤膜联合过滤的方式提取外泌体，富集过程对目标产物无损害，可以快速的获取完整且纯度较高的外泌体样品。体样品。体样品。

【技术实现步骤摘要】
一种外泌体富集系统


[0001]本技术涉及外泌体领域，尤其涉及一种外泌体富集系统。

技术介绍

[0002]外泌体(EVs)是由脂质双分子层包绕形成的粒径在30至150nm球状膜性囊泡，是细胞分泌的一种亚细胞结构，在细胞间信息传递过程中起到重要作用。传统的外泌体的富集方法包含超速离心法、依赖聚合物沉降、依赖免疫亲和的方法等等，传统的外泌体的富集方法存在外泌体富集获取时间较长，外泌体纯度低，不能保证外泌体的完整性等各种问题。

技术实现思路

[0003]基于上述问题，本技术的目的是提供一种外泌体富集系统，本技术采用如下技术方案：
[0004]本技术提供了一种外泌体富集系统，包括：
[0005]细胞储存装置，所述细胞储存装置包括干细胞存放容器，所述干细胞存放容器内填充有培养基、培养细胞及外泌体，所述干细胞存放容器上设置有填料口、出液口、回液口和第二回液口；
[0006]富集装置，所述富集装置包括滤膜管，所述滤膜管内设置有用于阻截培养细胞的大分子滤膜，所述大分子滤膜将所述滤膜管分为第一腔室和第二腔室；所述第一腔室通过端部的供液管与所述出液口连通，所述供液管上设置有供液泵，所述第一腔室通过底部的回液管与所述回液口连通，所述第二腔室通过端部的出液管连接至超滤膜抽滤装置。
[0007]优选的，所述滤膜管包括中间管段，以及两侧的端部管段，所述大分子滤膜设置在所述中间管段中，所述中间管段与两侧的所述端部管段螺纹连接。
[0008]优选的，所述大分子滤膜倾斜布置。
[0009]优选的，所述超滤膜抽滤装置包括抽滤瓶，所述抽滤瓶的瓶口处设置有漏斗，所述漏斗中设置有用于阻截外泌体的超滤膜，所述漏斗与所述抽滤瓶通过胶塞密封，所述抽滤瓶的瓶身上设置抽气嘴，所述抽气嘴通过通过管路与抽滤泵连接。
[0010]优选的，所述供液泵为蠕动泵。
[0011]与现有技术相比，本技术的有益技术效果：
[0012]本技术通过大分子滤膜和超滤膜联合过滤的方式提取外泌体，富集过程对目标产物无损害，可以快速的获取完整且纯度较高的外泌体样品。
附图说明
[0013]下面结合附图说明对本技术作进一步说明。
[0014]图1为本技术外泌体富集系统的结构示意图；
[0015]图2为本技术滤膜管的结构示意图。
[0016]附图标记说明：1、干细胞存放容器；101、填料口；102、出液口；103、回液口；2、滤膜
管；201、中间管段；202、端部管段；3、大分子滤膜；301、第一腔室；302、第二腔室；4、供液管；5、供液泵；6、回液管；7、出液管；8、超滤膜抽滤装置；801、抽滤瓶；802、漏斗；803、超滤膜；804、抽气嘴；805、抽滤泵。
具体实施方式
[0017]为了使本技术所要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本技术，并不用于限定本技术。
[0018]需要说明的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本技术的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。“若干”的含义是一个或一个以上，除非另有明确具体的限定。
[0019]在本技术的描述中，需要理解的是，术语“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本技术和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本技术的限制。
[0020]如图1所示，本实施例中公开了一种外泌体富集系统，包括细胞储存装置和富集装置，其中细胞储存装置包括干细胞存放容器1，干细胞存放容器1内填充有培养基、培养细胞及外泌体，干细胞存放容器1上设置有填料口101、出液口102、回液口103。
[0021]富集装置包括滤膜管2，滤膜管2内设置有用于阻截培养细胞的大分子滤膜3，大分子滤膜3将滤膜管2分为第一腔室301和第二腔室302；第一腔室301通过端部的供液管4与出液口102连通，供液管4上设置有供液泵5，第一腔室301通过底部的回液管6与回液口103连通，第二腔室302通过端部的出液管7连接至超滤膜抽滤装置8。在本实施例中，供液泵5选用蠕动泵。
[0022]超滤膜抽滤装置8中设置有用于阻截外泌体的超滤膜，具体来说，超滤膜抽滤装置8包括抽滤瓶801，抽滤瓶801的瓶口处设置有漏斗802，超滤膜803放置在漏斗802，漏斗802与抽滤瓶801的瓶口通过胶塞密封，抽滤瓶801的瓶身上设置抽气嘴804，抽气嘴804通过通过管路与抽滤泵805连接。
[0023]需要说明的是，在漏斗802放置有支撑筛板，超滤膜803铺设在支撑筛板上，便于超滤膜803过滤。
[0024]本装置工作时：细胞储存装置的培养基、培养细胞及外泌体经供液泵5的作用，进入到滤膜管2中通过大分子滤膜3的过滤后，培养细胞以及少部分外泌体被阻截在第一腔室301中，并伴随着培养基通过回液管6回流到干细胞存放容器1中等待下次循环过滤，而大部分外泌体随着随培养基进入到出液管7中，外泌体和培养基从出液管7流入到超滤膜抽滤装置8的漏斗802中，通过抽滤泵805对抽滤瓶801进行抽气，使得抽滤瓶801处于负压状态，漏斗802中的外泌体和培养基在大气压力作用下通过超滤膜803过滤，其中外泌体富集在超滤膜803上，培养基落入到抽滤瓶801中。
[0025]需要说明的是：超滤膜803的外泌体需要再次通过PBS冲洗过滤。通过再次抽滤后，
用镊子取下超滤膜803，用PBS吹打膜表面，得到的溶液中即为外泌体样品。
[0026]在本实施例中，如图2所示，滤膜管2包括中间管段201，以及两侧的端部管段202，中间管段201与两侧的端部管段202螺纹连接。大分子滤膜3设置在中间管段201中，且大分子滤膜3倾斜布置，这样使得平行流过滤膜管2的包含外泌体的流体培养基经过大分子滤膜3时，尽可能避免流体培养基滤液垂直经过滤膜形成细胞堵塞滤膜的情况。
[0027]本实施例中的过滤、超滤的过程，也就是对外泌体进行“提纯”的过程，最终会得到一定粒径范围内的外泌体；而现有技术中一些传统的外泌体的富集方法包含超速离心法、依赖聚合物沉降、依赖免疫亲和等方法，富集到外泌体中可能含有其他一些大分子细胞，或者一些细胞的破碎物，即传统方式得到的外泌体纯度要比本实施例中外泌体的纯度低，因此，本实施例中通过“过滤、超滤”的方式可以有效提高外泌体纯度。考虑外泌体以及细胞的粒径，超滤膜803的孔径控制在30～200nm。大分子滤膜3的孔隙大小控制在220～450nm。
[0028]以本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种外泌体富集系统，其特征在于,包括：细胞储存装置，所述细胞储存装置包括干细胞存放容器(1)，所述干细胞存放容器(1)内填充有培养基、培养细胞及外泌体，所述干细胞存放容器(1)上设置有填料口(101)、出液口(102)和回液口(103)；富集装置，所述富集装置包括滤膜管(2)，所述滤膜管(2)内设置有用于阻截培养细胞的大分子滤膜(3)，所述大分子滤膜(3)将所述滤膜管(2)分为第一腔室(301)和第二腔室(302)；所述第一腔室(301)通过端部的供液管(4)与所述出液口(102)连通，所述供液管(4)上设置有供液泵(5)，所述第一腔室(301)通过底部的回液管(6)与所述回液口(103)连通，所述第二腔室(302)通过端部的出液管(7)连接至超滤膜抽滤装置(8)。2.根据权利要求1所述的外泌体富集系统，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：申长远，孙振娜，周游，张彩娜，李永胜，闫立强，
申请(专利权)人：阿谷巴杭州生物科技发展有限公司，
类型：新型
国别省市：