组合物及其用途制造技术

本公开涉及由海洋细菌产生的胞外多糖、其组合物、所述组合物的用途以及通过抑制或减少微生物病原体在生物和/或非生物表面上的定殖来减弱所述微生物病原体感染(细菌或病毒感染)的毒性的方法。染)的毒性的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】组合物及其用途


[0001]本专利技术涉及源自海洋细菌的胞外多糖(exopolysaccharide，EPS)、其组合物、所述EPS和组合物的非治疗用途以及所述EPS和组合物的治疗用途。本专利技术还涉及用于获得所述EPS的方法。本专利技术进一步涉及包含至少一种分离胞外多糖的鼻腔给药系统和所述鼻腔给药系统的治疗用途。本专利技术还涉及一种配制鼻用组合物的方法。

技术介绍

[0002]传染性疾病通常由侵入人体并进行传播的微生物引起。有许多类型的传染性生物，也称为病原微生物。以下是这些微生物如何侵入人体的一些例子：通过口腔、眼睛或鼻子，通过性接触，通过伤口或咬伤，通过受污染的医疗设备。
[0003]人们主要通过摄入受污染的水或食用受污染的食物而感染这种微生物。他们可能会吸入孢子或灰尘，或吸入其他人咳嗽或打喷嚏时产生的污染飞沫。人们也可能会接触受污染的物体(如门把手)，或直接接触受污染的人，然后触摸自身的眼睛、鼻子或嘴巴。
[0004]一些微生物也会传播到体液中，如血液、精液和粪便。例如，它们可以通过与受感染伴侣的性接触侵入身体。人和动物咬伤以及其它穿透皮肤的伤口会使病原微生物侵入人体。
[0005]病原微生物也可以粘附在植入体内的医疗设备上(如导管、人工关节或人工心脏瓣膜)。如果设备被意外污染，则在植入时，它们可能会出现在设备上。来自其它位置的传染性病原体也可以通过血液传播，并附着在已经植入的设备上。由于植入设备缺乏自然防御，这些微生物很容易生长和传播，从而导致疾病。
[0006]病原微生物侵入人体后，必须繁殖或传播以引起感染。在繁殖或传播开始后，可能会出现三种情况：1)微生物继续繁殖并击垮宿主生物的防御。2)达到平衡状态，导致慢性感染。3)宿主生物无论是否经过医学治疗均破坏和消除入侵微生物。
[0007]消除病原感染的现有解决方案(即抗生素、抗病毒药物)的有效性取决于对病原体的快速识别，然后在微生物不可逆地粘附到表面之前应用病原体抑制组合物。非常需要提供一种不同的方法来限制微生物病原体在表面上的不可逆粘附，从而减少治疗抗性现象，并因此降低其对相关医疗保健成本的影响。

技术实现思路

[0008]根据第一方面，本公开提供了一种分离胞外多糖(EPS)，其重均分子量的范围为40kDa至4000kDa，其中所述EPS通过海洋细菌发酵获得或可获得。在一实施方式中，所述分离EPS的重均分子量(Mw)的范围为40kDa至2000kDa、40kDa至1400kDa、40kDa至1000kDa、40kDa至500kDa、40kDa至400kDa、40kDa至300kDa、40kDa至200kDa、40kDa至150kDa或40kDa至100kDa。在一优选实施方式中，所述分离EPS的Mw的范围为40kDa至150kDa。在一实施方式中，所述分离EPS的Mw的范围为40kDa至150kDa，可选的数均分子量(Mn)的范围为26kDa至100kDa，和/或多分散指数(Mw/Mn)的范围为1.2至1.8。在一实施方式中，相对于所述EPS的
糖基单元的总数，本文所述的分离EPS可包括30％至90％的中性糖基单元、10％至70％的氨基糖基单元和0％至15％的酸性糖基单元。在另一实施方式中，本文所述的分离EPS可包含甘露糖、半乳糖、葡萄糖、N
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乙酰半乳糖胺和N
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乙酰葡萄糖胺。在其它一些实施方式中，本文所述的分离EPS可以基本不含核糖、阿拉伯糖、鼠李糖、果糖和/或岩藻糖。在另一实施方式中，所述海洋细菌可以是革兰氏阳性嗜热细菌，优选地是地衣芽孢杆菌，更优选地是于2020年1月27日在英国食品工业与海洋细菌菌种保藏中心(The National Collection of Industrial,Food and Marine Bacteria，NCIMB)保藏的保藏号为NCIMB43557的地衣芽孢杆菌LP
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T14。在另一实施方式中，本文所述的分离EPS可以基本上缺乏诱导免疫反应的能力。
[0009]根据第二方面，本公开提供了一种用于获得重均分子量(Mw)的范围为40kDa至4000kDa的分离胞外多糖(EPS)的方法，包括以下步骤：在第一培养基中培养海洋细菌，得到培养的海洋细菌；在发酵培养基中发酵所述培养的海洋细菌；热处理所述发酵培养基；将所述发酵培养基离心，得到上清液；过滤所述上清液，得到所述分离EPS。所述分离EPS可以是如本文所述的分离EPS。在一实施方式中，所述海洋细菌可以是革兰氏阳性嗜热细菌，优选地是地衣芽孢杆菌，更优选地是于2020年1月27日在英国食品工业与海洋细菌菌种保藏中心(NCIMB)保藏的保藏号为NCIMB 43557的地衣芽孢杆菌LP
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T14。在一实施方式中，所述发酵培养基可包括海盐(40g/L)、胰蛋白胨(6g/L)、酵母提取物(6g/L)、消泡剂(0.33mL/L)、葡萄糖(12g/L)和去离子水(qsp.)。在一实施方式中，所述发酵可在pH值为5至8、温度为40℃、30％至50％的氧合下进行20小时至40小时。在一实施方式中，所述发酵培养基的热处理可以通过将所述发酵培养基在85℃加热1小时来进行。在一实施方式中，所述发酵培养基的离心可以使用流量为200L/h至800L/h的盘堆叠式离心机在14000g下进行。在一实施方式中，所述上清液的过滤包括使用1.60μm至0.22μm过滤梯级的连续过滤和/或使用10kDa至100kDa截止式滤筒的超滤。在一实施方式中，本公开的方法可以进一步包括将所述分离EPS冷冻干燥以获得冷冻干燥的EPS。在一实施方式中，所述冷冻干燥在
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20℃下进行至少16小时。
[0010]根据第三方面，本公开提供了一种组合物，其包含至少一种如本文所述的分离EPS和合适的载体。本专利技术的组合物可以是口腔用组合物、鼻用组合物、局部用组合物、透皮组合物、眼用组合物或配制用于医疗设备的组合物。
[0011]根据第四方面，本公开提供了一种鼻腔给药系统，其包括至少一种如本文所述的分离EPS或至少一种通过本文所述方法获得或可获得的分离EPS。在一实施方式中，所述鼻腔给药系统可以将所述至少一种分离EPS作为滴鼻剂、液体喷雾剂、干喷雾剂、凝胶或软膏递送。在另一实施方式中，所述至少一种分离EPS可以配制成进一步包含盐溶液的组合物。在另一实施方式中，如本文所述的鼻腔给药系统可用于在有需要的受试者中治疗和/或预防微生物病原体感染。在另一实施方式中，如本文所述的鼻腔给药系统可用于在有需要的受试者中治疗和/或预防微生物病原体感染。在一些实施方式中，如本文所述的鼻腔给药系统可用于通过抑制或减少有需要的受试者的鼻腔的微生物病原体的定殖来减弱所述微生物病原体的毒性。在一些实施方式中，如本文所述的鼻腔给药系统可用于通过抑制或减少有需要的受试者的鼻腔的微生物病原体的定殖来减弱所述微生物病原体的毒性。
[0012]根据第五方面，本公开提供了如本文所述的分离EPS的非治疗用途或通过本文所
述的方法获得或可获本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种分离胞外多糖EPS，其重均分子量Mw的范围为40kDa至4000kDa，其中所述EPS通过海洋细菌的发酵获得或可获得。2.根据权利要求1所述的分离EPS，其重均分子量Mw的范围为40kDa至2000kDa、40kDa至1400kDa、40kDa至1000kDa、40kDa至500kDa、40kDa至400kDa、40kDa至300kDa、40kDa至200kDa、40kDa至150kDa或40kDa至100kDa，优选地为40kDa至150kDa。3.根据权利要求1或2所述的分离EPS，其Mw的范围为40kDa至150kDa，可选的数均分子量Mn的范围为26kDa至100kDa，和/或多分散指数Mw/Mn的范围为1.2至1.8。4.根据权利要求1至3中任一项所述的分离EPS，其相对于所述EPS的糖基单元的总数，包括30至90％的中性糖基单元、10至70％的氨基糖基单元和0至15％的酸性糖基单元。5.根据权利要求1至4中任一项所述的分离EPS，其包含甘露糖、半乳糖、葡萄糖、N
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乙酰半乳糖胺和N
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乙酰葡糖胺。6.根据权利要求1至5中任一项所述的分离EPS，其基本上不含核糖、阿拉伯糖、鼠李糖、果糖和/或岩藻糖。7.根据权利要求1至6中任一项所述的分离EPS，其中所述海洋细菌是革兰氏阳性嗜热细菌，优选地其中所述革兰氏阳性嗜热细菌是地衣芽孢杆菌，更优选地其中所述革兰氏阳性嗜热细菌是于2020年1月27日在英国食品工业与海洋细菌菌种保藏中心NCIMB保藏的保藏号为NCIMB 43557的地衣芽孢杆菌LP
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T14。8.根据权利要求1至7中任一项所述的分离EPS，其基本上缺乏诱导免疫反应的能力。9.一种用于获得重均分子量Mw的范围为40至4000kDa的分离胞外多糖EPS的方法，包括以下步骤：在第一培养基中培养海洋细菌，得到培养的海洋细菌；在发酵培养基中发酵所述培养的海洋细菌；热处理所述发酵培养基；将所述发酵培养基离心，得到上清液；并且过滤所述上清液，得到所述分离EPS。10.根据权利要求9所述的方法，其中：所述分离EPS如权利要求2至6中任一项所述；所述海洋细菌是革兰氏阳性嗜热细菌，优选地其中所述革兰氏阳性嗜热细菌是地衣芽孢杆菌，更优选地其中所述革兰氏阳性嗜热细菌是于2020年1月27日在英国食品工业与海洋细菌菌种保藏中心NCIMB保藏的保藏号为NCIMB 43557的地衣芽孢杆菌LP
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T14；所述发酵培养基包括海盐(40g/L)、胰蛋白胨(6g/L)、酵母提取物(6g/L)、消泡剂(0.33mL/L)、葡萄糖(12g/L)和去离子水(qsp.)；所述发酵在pH值为5至8、温度为40℃、30％至50％的氧合下进行20小时至40小时；所述发酵培养基的热处理是通过将所述发酵培养基在85℃加热1小时来进行；所述发酵培养基的离心是使用流量为200L/h至800L/h的盘堆叠式离心机在14000g下进行；和/或所述上清液的过滤包括使用1.60μm至0.22μm过滤梯级的连续过滤和/或使用10kDa至100kDa截止式滤筒的超滤。11.根据权利要求9或10所述的方法，其进一步包括将所述分离EPS冷冻干燥以获得冷
冻干燥的EPS，可选地其中所述冷冻干燥在
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20℃下进行至少16小时。12.一种组合物，其包含至少一种根据权利要求1至8中任一项所述的分离胞外多糖EPS或至少一种通过权利要求9至11中任一项所述的方法获得或可获得的分离EPS和合适的载体。13.根据权利要求12所述的组合物，其为口腔用组合物、鼻用组合物、局部用组合物、透皮组合物、眼用组合物或配制用于医疗设备的组合物。14.一种鼻腔给药系统，其包含至少一种根据权利要求1至8中任一项所述的分离胞外多糖EPS或至少一种通过权利要求9至11中任一项所述的方法获得或可获得的分离EPS。15.根据权利要求14所述的鼻腔给药系统，其中：所述鼻腔给药系统将所述至少一种分离EPS作为滴鼻剂、液体喷雾剂、干喷雾剂、凝胶或软膏递送；将所述至少一种分离EPS配制成进一步包含盐溶液的组合物；所述鼻腔给药系统用于在有需要的受试者中治疗和/或预防微生物病原体感染；和/或所述鼻腔给药系统用于通过抑制或减少有需要的受试者的鼻腔的微生物病原体的定殖来减弱所述微生物病原体的毒性。16.权利要求1至8中任一项所述的分离EPS的非治疗用途、一种通过权利要求9至11中任一项所述的方法获得或可获得的分离EPS或者一种权利要求12或13所述的组合物用于应用在非生物表面上以防止或减少微生物病原体在所述表面的定殖，可选地其中所述表面是医疗设备的表面。17.一种权利要求1至8中任一项所述的分离胞外多糖EPS、一种通过权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：F，
申请(专利权)人：丹斯塔发酵股份公司，
类型：发明
国别省市：