白皮杉醇在制备洋刀豆脲酶抑制剂中的应用制造技术

本发明专利技术属于天然化合物应用技术领域，公开了白皮杉醇在制备洋刀豆脲酶抑制剂中的应用。本发明专利技术指出白皮杉醇抑制洋刀豆脲酶的效果显著，且具有结构简单、安全性好、成本低等特点，可作为洋刀豆脲酶抑制剂应用于植物肥料或动物饲料添加剂中，丰富了现有脲酶抑制剂的可选种类。种类。种类。

【技术实现步骤摘要】
白皮杉醇在制备洋刀豆脲酶抑制剂中的应用


[0001]本专利技术属于天然化合物应用
，具体涉及白皮杉醇在制备洋刀豆脲酶抑制剂中的应用。

技术介绍

[0002]脲酶(Urease,EC 3.5.1.5)，又称尿素胺基水解酶，能够水解尿素生成氨和氨基甲酸酯。脲酶广泛存在于各种细菌、真菌、放线菌和植物中，其中植物来源的洋刀豆脲酶是首次被发现含有镍离子的金属酶，在生物化学发展史上具有里程碑意义。脲酶有助于植物和微生物体利用内源性和外源性尿素作为氮源，并能将分解产生的氨合成机体蛋白质。但脲酶的存在也加速了尿素分解释放氨气的进程，大大降低了动物和植物对氮的利用率，引起土壤的pH值升高，增加了农业生产成本，污染农业产品。同时，动物体内的挥发性氨气容易引起动物血氨中毒，甚至死亡；而挥发性氨气通过淋溶进入环境水体后，可导致严重的土壤污染和水体富营养化；人体内的脲酶可将人体的代谢产物尿素重新分解后再次被吸收，改变体内的酸碱平衡，使体液和尿液的pH值升高，引发肾及尿结石、胃肠道溃疡、泌尿系统感染、甚至引起脑瘫、肝病等多种疾病。因此，了解脲酶的水解机理，抑制脲酶活性，降低脲酶带来的负面影响具有重要的意义。
[0003]目前，针对脲酶对人类生产和生活中带来的严重危害，国内外学者研究并使用脲酶抑制剂进行预防与治疗。迄今，脲酶抑制剂被广泛应用于医药、农业、畜牧业等领域，其种类主要包括尿素类似物，异羟肟酸类，重金属离子类，磷酰胺酯类，醌类，多酚类等。然而，现有的洋刀豆脲酶抑制剂因为大多具有稳定性差、毒副作用明显、成本高等问题，在实际应用中具有一定的限制。
[0004]因此，亟需提供一种生物活性物质副作用少且成本低的洋刀豆脲酶抑制剂。

技术实现思路

[0005]本专利技术旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出白皮杉醇在制备洋刀豆脲酶抑制剂中的应用。利用白皮杉醇制备的洋刀豆脲酶抑制剂，抑制洋刀豆脲酶的效果显著，且具有结构简单、安全性好、成本低等特点。
[0006]本专利技术第一方面提供了白皮杉醇在制备洋刀豆脲酶抑制剂中的应用。
[0007]所述白皮杉醇的结构式如式(Ⅰ)所示：
[0008][0009]白皮杉醇，是一种多酚羟基类化合物，主要存在于葡萄皮、百香果以及红酒中，也是大黄、虎杖等多种中药的活性成分，其化学结构式如式(Ⅰ)所示，分子式为C
14
H
12
O4。白皮杉醇是已知的一种安全、无毒的化合物，具有多种药理作用，如抗氧化、提高免疫力、降血糖、抑制α
‑
葡萄糖苷酶、抗肿瘤、抗炎等。专利技术人率先发现白皮杉醇具有优异的抑制洋刀豆脲酶活性的作用，因而可应用于制备洋刀豆脲酶抑制剂。
[0010]本专利技术第二方面提供了一种洋刀豆脲酶抑制剂。
[0011]具体地，一种洋刀豆脲酶抑制剂包括白皮杉醇。
[0012]优选地，所述洋刀豆脲酶抑制剂还包括所述白皮杉醇在药学上可接受的盐。
[0013]优选地，所述洋刀豆脲酶抑制剂还包括所述白皮杉醇在药学上可接受的辅料。
[0014]本专利技术第三方面提供了上述洋刀豆脲酶抑制剂的应用。
[0015]具体地，所述洋刀豆脲酶抑制剂在制备动物饲料添加剂中的应用。
[0016]优选地，所述动物为反刍动物或单胃动物。
[0017]将白皮杉醇或其在药物上可接受的盐作为动物饲料添加剂添加至饲料中，可以减慢尿素在奶牛、肉牛、肉羊以及肉鸡等反刍动物或单胃动物体内的分解速度，提高尿素的利用率，并降低禽舍和畜舍内空气中氨气含量。
[0018]具体地，所述洋刀豆脲酶抑制剂在制备植物肥料中的应用。将所述洋刀豆脲酶抑制剂添加于氮肥中，有利于提高尿素利用率，增加农作物产量，提高生产性能。
[0019]相对于现有技术，本专利技术的有益效果如下：
[0020]本专利技术提出白皮杉醇在制备洋刀豆脲酶抑制剂中的应用。利用白皮杉醇制备的洋刀豆脲酶抑制剂，抑制洋刀豆脲酶的效果显著，且具有结构简单、安全性好、成本低等特点。该洋刀豆脲酶抑制剂可以应用于植物肥料或动物饲料添加剂中，丰富了现有脲酶抑制剂的可选种类，有助于减少药物的耐药性。同时，由于白皮杉醇本身为天然药物成分，并具有高效无毒的特点，因此在抑制洋刀豆脲酶活性方面具有良好的开发前景。
附图说明
[0021]图1为白皮杉醇对洋刀豆脲酶的抑制活性图；
[0022]图2为白皮杉醇抑制洋刀豆脲酶的Lineweaver
‑
Burk双倒数图；
[0023]图3为白皮杉醇抑制洋刀豆脲酶Lineweaver
‑
Burk双倒数图中曲线的斜率与抑制剂浓度关系图；
[0024]图4为含疏基化合物对白皮杉醇抑制洋刀豆脲酶活性影响的条形图；
[0025]图5为无机化合物对白皮杉醇抑制洋刀豆脲酶活性影响的条形图。
具体实施方式
[0026]为了让本领域技术人员更加清楚明白本专利技术所述技术方案，现列举以下实施例进行说明。需要指出的是，以下实施例对本专利技术要求的保护范围不构成限制作用。
[0027]以下试验中所用的原料、试剂或装置如无特殊说明，均可从常规商业途径得到，或者可以通过现有已知方法得到。
[0028]1.实验材料
[0029](1)受试药物
[0030]白皮杉醇，购自成都德思特生物技术有限公司，纯度≥98％；洋刀豆脲酶(Type III，40.3U/mg)，购自美国西格玛奥德里奇公司；尿素，二硫苏糖醇、半胱氨酸均购自索莱宝；谷胱甘肽购自美仑生物；氟化钠、硼酸均购自麦克林。HEPES、水杨酸钠、硝普钠、氢氧化钠、次氯酸钠、丙三醇，均购自广州化学试剂厂，均为分析纯。
[0031](2)药物的配制
[0032]分别称取适量白皮杉醇，用20mM的HEPES缓冲液(pH为7.5)配制成相应浓度，置于4℃避光保存，备用。
[0033](3)洋刀豆脲酶的配制
[0034]称取适量洋刀豆脲酶，溶于20mM的HEPES缓冲液(pH为7.5)中，配制成10U/mL的洋刀豆脲酶溶液，置于4℃冰箱中保存，备用。
[0035](4)尿素的配制
[0036]称取尿素适量，溶解于20mM的HEPES缓冲液(pH为7.5)中，配制成150mM的尿素溶液，放于4℃冰箱中保存，备用。
[0037](5)Berthelot显色液的配制
[0038]A液：分别称取适量的硝普钠和水杨酸钠粉末，溶解于20mM的HEPES缓冲液(pH为7.5)中，配制成含9.73mM亚硝基铁氰化钠、700mM水杨酸钠的显色A液，置于4℃避光保存，备用。
[0039]B液：称取氢氧化钠9g，溶解于20mM的HEPES缓冲液(pH为7.5)中，放冷，加入12mL次氯酸钠，混匀，定容至50mL，置4℃避光保存，备用。
[0040]2.测试实验
[0041]试验1：白皮杉醇对洋刀豆脲酶的抑制作用研究
[0042]将洋刀豆本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.白皮杉醇在制备洋刀豆脲酶抑制剂中的应用，其特征在于，所述白皮杉醇的结构式如式(Ⅰ)所示：2.一种洋刀豆脲酶抑制剂，其特征在于，包括白皮杉醇或其在药学上可接受的盐。3.根据权利要求1所述的洋刀豆脲酶抑制剂，其特征在于，所述洋刀豆脲酶抑制剂还包括药学上可接受的辅料。4.权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲁强，李彩兰，
申请(专利权)人：遵义医科大学珠海校区，
类型：发明
国别省市：