一种四倍体紫雨桦的创制方法技术

本发明专利技术公开了一种四倍体紫雨桦的创制方法，属于植物育种技术领域。上述创制方法包括以下步骤：(1)切取二倍体紫雨桦叶片或幼茎，接种于预培养基中，预培养0

【技术实现步骤摘要】
一种四倍体紫雨桦的创制方法


[0001]本专利技术涉及植物育种
，特别是涉及一种四倍体紫雨桦的创制方法。

技术介绍

[0002]紫雨桦(Betula pendula 'Purple Rain')是来自欧洲白桦(Betula pendula Roth.)的一个彩叶树品种，其叶片紫色，树干灰白色，观赏价值较高，在欧洲及北美广泛应用于庭院装饰和城市绿化。哈尔滨市于2001年引进的是二倍体紫雨桦，试验多年后发现，该品种秋天结束生长较晚，枝条顶部常常受早霜危害，导致主干和侧枝弯曲，观赏价值明显降低。因此，提高紫雨桦的抗寒性是当前急需解决的问题。
[0003]研究团队前期对白桦四倍体研究显示，与其它林木多倍体一样，具有叶片、花序、果序形态均表现巨大性以及较强等特点。借鉴白桦倍性育种经验，紫雨桦多倍体育种途径有望突破其在寒冷北方生长差的问题。虽然利用秋水仙碱诱导染色体加倍选育四倍体在白桦等林木中都已成功应用，但在紫雨桦中利用该方法选育四倍体尚未见报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种四倍体紫雨桦的创制方法，以解决上述现有技术存在的问题，同时进一步提升紫雨桦的观赏性。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0006]本专利技术提供一种四倍体紫雨桦的创制方法，包括以下步骤：
[0007](1)切取二倍体紫雨桦叶片或幼茎，接种于预培养基中，预培养0
‑
4天后，再转接于含有秋水仙素的诱导培养基中，诱导培养6
‑
>10天；
[0008](2)经诱导培养后，再转接于所述预培养基培养至长出愈伤组织；
[0009](3)将所述愈伤组织转接于分化培养基中进行分化培养，获取不定芽；
[0010](4)不定芽长到2cm
‑
3cm高时，转接于生根培养基中进行生根培养，生根培养35
‑
45天；
[0011](5)炼苗及移栽，获得四倍体紫雨桦。
[0012]优选的是，在步骤(1)中，所述预培养基的组分包括WPM+2.0mg/L 6
‑
BA+0.2mg/L NAA+0.5mg/L GA3。
[0013]优选的是，在步骤(1)中，所述诱导培养基的组分包括WPM+2.0mg/L 6
‑
BA+0.2mg/L NAA+0.5mg/L GA3+(0.4
‑
1.0)g/L秋水仙素。
[0014]优选的是，在步骤(3)中，所述分化培养基的组分包括WPM+0.8mg/L 6
‑
BA+0.02mg/L NAA+0.5mg/L GA3。
[0015]优选的是，在步骤(4)中，所述生根培养基组分包括WPM+0.4mg/L IBA。
[0016]优选的是经分化培养得到所述不定芽，并且在所述不定芽转接所述生根培养基之前，还包括将所述不定芽转接于继代培养基继代培养的步骤。
[0017]优选的是，所述继代培养基组分包括WPM+0.8mg/L 6
‑
BA+0.02mg/L NAA。
[0018]本专利技术公开了以下技术效果：
[0019]本专利技术采用预培养2天的叶片，经0.04％秋水仙素诱导10天；或预培养2天的幼茎，经0.10％秋水仙素诱导8天，获得四倍体紫雨桦，诱导率分别为34.84％、20.97％，由于四倍体紫雨桦具有红绿饱和度及花青素含量高的特点，对于提升紫雨桦的抗寒特性及观赏性，美化城市环境具有重要意义。
附图说明
[0020]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0021]图1为生根培养的二倍体紫雨桦；
[0022]图2为秋水仙素诱导获得的愈伤组织；
[0023]图3为获得的生根培养的四倍体紫雨桦；
[0024]图4为移栽2个月的紫雨桦；
[0025]图5为四倍体紫雨桦的染色体倍性分析仪检测结果；
[0026]图6为移栽的紫雨桦平视图(左：二倍体、右：四倍体)；
[0027]图7为移栽的紫雨桦俯视图，其中，a为二倍体紫雨桦，b为四倍体紫雨桦；
[0028]图8为二倍体及四倍体紫雨桦L*值及a*值的变化，其中，a为L*值的变化，b为a*值的变化；
[0029]图9为二倍体及四倍体紫雨桦花青素及叶绿素相对含量的变化，其中，a为花青素相对含量，b为叶绿素相对含量；
[0030]图10为二倍体及四倍体紫雨桦叶片长和叶片宽比较，其中，a为叶片长，b为叶片宽；
[0031]图11为二倍体及四倍体紫雨桦株高比较。
具体实施方式
[0032]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，实施例中方法如无特殊说明均采用常规方法，使用试剂如无特殊说明，均为常规市售试剂或采用常规方法配置的试剂。该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0033]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值，以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0034]除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所
有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
[0035]在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本专利技术说明书和实施例仅是示例性的。
[0036]关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
[0037]在下文的描述中，所涉及的方法如无特别说明，则均为本领域的常规方法。所涉及的原料如无特别说明，则均是能从公开商业途径获得的原料。
[0038]实施例1秋水仙素诱导紫雨桦培育四倍体植株
[0039]1、材料与方法
[0040]试验材料取自黑龙江省帽儿山实验林场场部的二倍体紫雨桦单株。
[0041]1.1外植体消毒
[0042]采集带有腋芽的紫雨桦枝条带回实验室，将枝条上腋芽小心取下后放入组培瓶中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种四倍体紫雨桦的创制方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)切取二倍体紫雨桦叶片或幼茎，接种于预培养基中，预培养0
‑
4天后，再转接于含有秋水仙素的诱导培养基中，诱导培养6
‑
10天；(2)经诱导培养后，再转接于所述预培养基培养至长出愈伤组织；(3)将所述愈伤组织转接于分化培养基中进行分化培养，获取不定芽；(4)不定芽长到2
‑
3cm高时，转接于生根培养基中进行生根培养，生根培养35
‑
45天；(5)炼苗及移栽，获得四倍体紫雨桦。2.根据权利要求1所述的创制方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述预培养基的组分包括WPM+2.0mg/L 6
‑
BA+0.2mg/LNAA+0.5mg/L GA3。3.根据权利要求1所述的创制方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述诱导培养基的组分...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘桂丰，曹莉，李晶楠，李天芳，姜静，李慧玉，
申请(专利权)人：东北林业大学，
类型：发明
国别省市：