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一种特异性识别并结合循环胎儿有核红细胞的核酸适体、互补序列及它们的应用制造技术

技术编号:35064794 阅读:52 留言:0更新日期:2022-09-28 11:21
本发明专利技术公开了一种特异性识别并结合循环胎儿有核红细胞的核酸适体、互补序列及它们的应用;利用核酸适体与外周血中胎儿细胞的特异性结合实现稀有细胞的分离富集。本发明专利技术方法具有以下显著优势:1)发展了新型胎儿细胞捕获及无损释放方法,具有重要临床意义;2)基于临床样本筛选的特异性探针,具有更强的临床适用性;3)核酸适体在识别过程中对循环胎儿有核红细胞特异性强、亲和力高,准确性和灵敏度好;4)核酸适体探针生产制备简单、重复性好,稳定性好、易存储运输。为产前疾病筛查与诊断提供了新的方法与途径。新的方法与途径。新的方法与途径。

【技术实现步骤摘要】
一种特异性识别并结合循环胎儿有核红细胞的核酸适体、互补序列及它们的应用


[0001]本专利技术属于稀有细胞分离富集
,具体涉及一种识别富集外周血中循环胎儿有核红细胞的核酸适体、无损分离互补释放序列及它们的应用。

技术介绍

[0002]循环胎儿有核红细胞是指在妊娠期间经母体

胎盘物质交换进入母亲血液循环中的胎儿有核红细胞。循环胎儿有核红细胞直接来源于胎儿血液组织且包含胎儿完整的遗传信息,理论上可实现胎儿遗传性疾病的全基因组分析和诊断;此外,其具有生命周期短,分娩后快速从母体外周血中消失,不受既往妊娠影响等优势,是目前公认最理想的无创产前诊断材料之一。然而,母体外周血中的循环胎儿有核红细胞含量极低,每毫升血液中仅6

10个胎儿有核红细胞。因此,特异性分离富集母体外周血中循环胎儿有核红细胞是实现全面、准确无创产前诊断的关键技术瓶颈。
[0003]目前,循环胎儿有核红细胞的分离富集方法主要包括两大类:一类是基于有核红细胞物理化学性质的分离方法,包括有密度梯度离心法、微孔过滤法和介电泳分离法,使用这类本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种特异性识别并结合循环胎儿有核红细胞的核酸适体,其特征在于,能特异性识别并结合孕妇外周血中的循环胎儿有核红细胞,所述的核酸适体LXD

11序列如下:5
’‑
ATCCAGAGTGACGCAGCAAAGTCGTCTTTGCCAAATACCGGTCTGTCGGTGGGTATTGTGGACACGGTGGCTTAGT
‑3’
。2.根据权利要求1所述的特异性识别并结合循环胎儿有核红细胞的核酸适体,其特征在于,通过对所述的核酸适体LXD

11部分增加或者删减碱基,或者碱基替换获得具有相同功能的核酸适体LXD

11b序列如下:5
’‑
TCCAGAGTGACGCAGCAAAGTCGTCTTTGCCAAATACCGGTCTGTCGGTGGGTATTGTGGACACTCTGGC
‑3’
。3.根据权利要求1或2所述的特异性识别并结合循环胎儿有核红细胞的核酸适体,其特征在于,所述的核酸适体标记上荧光物质、放射性物质、治疗性物质、生物素、或酶标记物质,得到与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体衍生物。4.权利要求1

3任一项所述的核酸适体在制备特异性识别并结合循环胎儿有核红细胞制剂中的应用。5.一种基于核酸适体的循环胎儿有核红细胞识别与富集方法,其特征在于,所述核酸适体包括权利要求1

3任一项所述的核酸适体。6.一种基于互补核酸序列无损释放循环胎儿有核红细胞的方法,其特征在于,利用互补释放序列释放被权利要求1

3任一项所述的核酸适体识别与富集的循环胎儿有核红细胞,针对所述的核酸适体LXD

11的互补释放序列RA1和/或RA2如下:RA1:5
’‑
ACTAAGCCACCGTGTCCACAATACCCACCGACAGACCGGTAT
‑3’
。RA2:5
’‑
ACCGGTATTTGGCAAAGACGACTTTGCTGCGTCACTCTGGAT
‑3’
;针对所述的核酸适体LXD

11b的互补释放序列RA3和/或RA4如下:RA3:5

【专利技术属性】
技术研发人员:谭蔚泓叶茂彭天欢李小东
申请(专利权)人:湖南大学
类型:发明
国别省市:

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