一种滇龙胆中性多糖及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种滇龙胆中性多糖及其制备方法与应用，所述滇龙胆中性多糖由岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、葡萄糖醛酸组成，其摩尔比为3.544：6.973：4.635：31.364：37.149：1.962：12.190：2.182，分子量为3074 Da，所述滇龙胆中性多糖的主要衍生物为3,4,6

【技术实现步骤摘要】
一种滇龙胆中性多糖及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于天然产物提取
，具体涉及一种滇龙胆中性多糖及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]多糖（Polysaccharide）是一类天然大分子物质，由单糖之间脱水缩合，通过糖苷键连接而成的聚合物。与核酸、蛋白质一样，是生命活动的基础物质之一。多糖具有多种生理功能，广泛参与细胞识别、胚胎发育、细胞分化、生长、代谢、病毒感染、免疫应答等生命活动，具有抗肿瘤、抗凝血、抗氧化、抗突变、抗病毒、降血糖、抗溃疡、降血脂等生物活性，在药品及保健食品领域有很多的研究与应用。
[0003]滇龙胆（Gentiana rigescens Franch.ex Hemsl.）为龙胆科龙胆属多年生宿根小草本植物，是我国常用中药之一，具有清热燥湿，泻肝胆火等功效。目前，对滇龙胆的有效成分的研究较多，但针对滇龙胆中多糖的研究未见报道，本专利技术旨在提供一种自滇龙胆中提取的具有显著的抗炎及抗氧化活性的多糖。

技术实现思路

[0004]本专利技术的第一目的是提供一种滇龙胆中性多糖；本专利技术的第二目的是提供一种滇龙胆中性多糖的制备方法，本专利技术的第三目的是提供一种滇龙胆中性多糖的应用。
[0005]本专利技术的第一目的是这样实现的，所述滇龙胆中性多糖由岩藻糖：鼠李糖：阿拉伯糖：半乳糖：葡萄糖：木糖：甘露糖：葡萄糖醛酸摩尔比为3.544：6.973：4.635：31.364：37.149：1.962：12.190：2.182，分子量为3074 Da，所述滇龙胆中性多糖的主要衍生物为3,4,6
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Me3
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Man(p)、3,4,6
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Me4
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Glc (p)以及2,3,6
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Me3
‑
Gal(p)组成，主要连接方式为
→
1)
‑ꢀ
Man(p)
‑
(2
→
、
→
1)
‑ꢀ
Gal(p)
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(2
→
以及
→
1)
‑ꢀ
Gal(p)
‑
(4
→
。
[0006]本专利技术的第二目的是这样实现的，所述滇龙胆多糖的制备方法按以下步骤实现：（1）将干燥的滇龙胆药材，粉碎为粗粉，过3号筛（50目筛），石油醚索氏回流脱脂2
‑
3次后，以80
‑
85℃水提，每次提取2.5
‑
3 h，提取次数为2
‑
3次，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；（2）将步骤1得到的浸膏以无水乙醇醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀用蒸馏水重溶，以sevege法除蛋白，离心，弃去沉淀，共5
‑
6次，直至离心再无沉淀，减压浓缩，冷冻干燥，得到滇龙胆粗多糖；（3）将步骤2得到的滇龙胆粗多糖用蒸馏水溶解，离心过滤后，采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析纯化，以去离子水洗脱，收集洗脱液，经透析、浓缩后得到中性多糖；本专利技术的第三目的是这样实现的，所述滇龙胆中性多糖的应用为作为活性成分或者是药用载体在制备抗炎症药物中的应用。
[0007]本专利技术的有益效果为：
（1）本专利技术提供了一种从滇龙胆中提取的中性多糖，所述中性多糖具有较高的抗炎及抗氧化活性，其抑制TNF
‑
α及IL
‑
6分泌的最低浓度为25μg/mL，所述中性多糖在浓度为6.4 mg/mL时就已经具有了78.5%的VC的DPPH自由基清除能力。另外，本专利技术提供的中性多糖毒副作用小，因此，在制备低毒高效的抗炎及抗氧化药品开发中具有广泛的应用前景，有利于滇龙胆资源的进一步开发利用。
[0008]（2）本专利技术制备中性多糖的方法不仅操作简单成本低廉，而且更加高效实用，同时更好的保护了多糖的生物活性，值得推广应用。
附图说明
[0009]图1为本专利技术滇龙胆中性多糖GAP的葡萄糖标准曲线（y=0.0138x
‑
0.0265 (R2=0.9946)）；图2为本专利技术滇龙胆中性多糖GAP的纤维素阴离子交换柱分离谱图；图3为本专利技术滇龙胆中性多糖GAP的气质联用色谱仪数据图；图4为本专利技术滇龙胆中性多糖GAP 的HPGPC色谱图；图5为本专利技术滇龙胆中性多糖GAP的总离子流图；图6为本专利技术滇龙胆中性多糖GAP 的红外光谱图；图7为本专利技术滇龙胆中性多糖GAP细胞活力数据图；图8为本专利技术滇龙胆中性多糖GAP抑制脂多糖诱导的RAW 264.7巨噬细胞产生促炎细胞因子IL
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6的作用示意图；图9为本专利技术滇龙胆中性多糖GAP抑制脂多糖诱导的RAW 264.7巨噬细胞产生促炎细胞因子TNF
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α的作用示意图；图10为本专利技术滇龙胆中性多糖GAP及维生素C对DPPH自由基的清除作用的曲线图；图11为白云参中性多糖（CJP
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C）以及白云参酸性多糖（CJP）DPPH自由基清除能力曲线图。
具体实施方式
[0010]下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步的说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所作的任何变更或改进，均属于本专利技术的保护范围。
[0011]本专利技术提供了一种滇龙胆中性多糖，所述中性多糖由岩藻糖：鼠李糖：阿拉伯糖：半乳糖：葡萄糖：木糖：甘露糖：葡萄糖醛酸摩尔比为3.544：6.973：4.635：31.364：37.149：1.962：12.190：2.182，分子量为3074 Da，所述滇龙胆中性多糖的主要衍生物为3,4,6
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Me3
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Man(p)、3,4,6
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Me4
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Glc (p)以及2,3,6
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Me3
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Gal(p)组成，主要连接方式为
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1)
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Gal(p)
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(2
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以及
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[0012]本专利技术滇龙胆中性多糖的制备方法按以下步骤实现：（1）将干燥的滇龙胆药材粉碎为粗粉，过3号筛（50目筛），经石油醚索氏回流脱脂2
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3次后，以80
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85℃水提，每次提取2.5
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3 h，提取次数为2
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3次，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；（2）将步骤1得到的浸膏以无水乙醇醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀用蒸馏水重溶，以sevege法除蛋白，离心，弃去沉淀，共5
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6次，直至离心再无沉淀，减压浓缩，冷冻干燥，
得到滇龙胆粗多糖；（3）将步骤2得到的滇本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种滇龙胆中性多糖，其特征在于，所述滇龙胆中性多糖由岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、葡萄糖醛酸组成，其摩尔比为3.544：6.973：4.635：31.364：37.149：1.962：12.190：2.182，分子量为3074 Da，所述滇龙胆中性多糖的主要衍生物为3,4,6
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Man(p)、3,4,6
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Me4
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Glc (p)以及2,3,6
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Me3
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Gal(p)组成，主要连接方式为
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1)
‑ꢀ
Man(p)
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(2
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、
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1)
‑ꢀ
Gal(p)
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(2
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以及
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1)
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Gal(p)
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(4
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。2.权利要求1所述的一种滇龙胆中性多糖的制备方法，其特征在于，按以下步骤实现：（1）将干燥的滇龙胆药材，粉碎为粗粉，过50目筛，经石油醚索氏回流脱脂2
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3次后，以80

【专利技术属性】
技术研发人员：刘录，张鹏，刘小莉，冯佳怡，周倩，周志宏，谭文红，杨竹雅，
申请(专利权)人：云南中医药大学，
类型：发明
国别省市：