一种具有抗氧化活性的龙须菜高纯度低分子量多糖及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种具有抗氧化活性的龙须菜高纯度低分子量多糖及其制备方法和应用，属于藻类多糖提取技术领域。该方法包括以下步骤：将处理后的龙须菜进行加热提取，提取液离心、浓缩后，进行醇沉，沉淀复溶、透析和冷冻干燥，得龙须菜多糖；加入维生素C和过氧化氢，微波辅助降解，之后进行浓缩、醇沉、复溶、透析和冷冻干燥，得龙须菜低分子量粗多糖；将其纯化得到龙须菜低高纯度分子量多糖。本发明专利技术从龙须菜中提取得到一种低分子量多糖，该多糖结构简单，分子量低，粘度小，利于开发利用。经试验验证，本发明专利技术制备的龙须菜低分子量多糖相比于未降解的普通多糖，纯度高，且显著提高抗氧化活性，为抗氧化产品的开发和推广应用提供理论依据。据。据。

【技术实现步骤摘要】
一种具有抗氧化活性的龙须菜高纯度低分子量多糖及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及藻类多糖提取
，特别是涉及一种具有抗氧化活性的龙须菜高纯度低分子量多糖及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]龙须菜是一种可食性的经济型红藻，在我国的主要产地为福建(75.5％)、广东(12.3％)和山东(12.3％)，是我国传统的药食两用的海藻类植物。龙须菜不仅可直接食用，还可加工成食品添加剂、保湿剂、凝胶剂、药物等，在食品、化妆品、化工、医药等行业都进行了广泛的应用，创造了极大的经济价值。龙须菜的主要活性物质是多糖，具有抗氧化性、抗癌、降血压和增强免疫力等生理功能。然而，多糖的分子量可以显著影响生物活性，若分子量过大(>1000kDa)，多糖粘度过高，不利于发挥生物学活性，多糖开发利用率低；而分子量过小(<5kDa)，多糖往往会丧失生物活性。现有技术提取的龙须菜多糖往往存在分子量大，粘度高，不易开发利用的问题，因此，本专利技术拟提供一种具有生物活性的龙须菜高纯度低分子量多糖，为其开发利用提供理论基础。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种具有抗氧化活性的龙须菜高纯度低分子量多糖及其制备方法和应用，以解决上述现有技术存在的问题，该龙须菜低分子量多糖结构简单，分子量低，粘度小，纯度高，利于开发利用，且具有显著的抗氧化活性，为抗氧化产品的开发和推广应用提供理论依据。
[0004]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0005]本专利技术提供一种具有抗氧化活性的龙须菜高纯度低分子量多糖的制备方法，包括以下步骤：
[0006](1)提取龙须菜多糖：龙须菜经清洁、干燥、粉碎和乙醇除杂后，进行加热提取，提取液离心、浓缩后，进行醇沉，沉淀复溶后，进行透析和冷冻干燥，得龙须菜多糖；
[0007](2)降解龙须菜多糖：向龙须菜多糖溶液中加入维生素C和过氧化氢，搅拌均匀，微波加热辅助降解，之后进行浓缩、醇沉，沉淀复溶后，进行透析和冷冻干燥，得龙须菜低分子量粗多糖；
[0008](3)纯化龙须菜低分子量多糖：将步骤(2)所述龙须菜低分子量粗多糖的溶液加入葡萄糖凝胶柱进行分离纯化，得到龙须菜高纯度低分子量多糖。
[0009]进一步地，在步骤(1)中，提取龙须菜多糖的具体步骤包括：龙须菜经清洁、干燥、粉碎，用95％乙醇除杂，之后烘干，得龙须菜粉末，向其中加入料液比为1g：40
‑
50mL的水，于80
‑
100℃加热提取2
‑
4h，之后离心取上清液，于40
‑
60℃旋蒸浓缩，加入4倍体积无水乙醇进行醇沉，沉淀复溶后进行透析处理48
‑
72h，冷冻干燥48
‑
72h后，得龙须菜多糖。
[0010]进一步地，所述加热提取还包括超声波辅助提取10
‑
40min；所述醇沉的温度为4
℃，时间为12h。
[0011]进一步地，在步骤(2)中，所述龙须菜多糖溶液的浓度为2
‑
8mg/mL，所述维生素C和过氧化氢的加入量为1：1，其终浓度均为5
‑
25mM。
[0012]进一步地，在步骤(2)中，所述微波加热的功率为500
‑
900W，温度为40
‑
56℃，降解时间为0.1
‑
1h；所述浓缩的温度为40
‑
60℃，所述透析和冷冻干燥的时间均为48
‑
72h。
[0013]进一步地，在步骤(3)中，所述龙须菜低分子量粗多糖的溶液浓度为2
‑
8mg/mL，将其加入葡萄糖凝胶G
‑
75柱子，用0
‑
1M的NaCl溶液进行洗脱，收集洗脱组分，采用苯酚
‑
硫酸法检测，收集多糖组分，得龙须菜低分子量多糖。
[0014]本专利技术还提供一种根据上述的制备方法获得的具有抗氧化活性的龙须菜高纯度低分子量多糖。
[0015]进一步地，其分子量为16kDa，由半乳糖和葡萄糖组成。
[0016]本专利技术还提供一种上述的具有抗氧化活性的龙须菜高纯度低分子量多糖在制备抗氧化产品中的应用。
[0017]本专利技术公开了以下技术效果：
[0018]本专利技术从龙须菜中提取得到一种低分子量多糖，该多糖结构简单，分子量低，粘度小，纯度高，利于开发利用。同时本专利技术以水提醇沉法获得安全无毒的龙须菜多糖，再以自由基降解制备龙须菜高纯度低分子量多糖，此方法绿色安全高效，成本低，操作简单，可应用于实际生产。另外经试验验证，本专利技术制备的龙须菜低分子量多糖相比于未降解的普通多糖纯度高，显著提高抗氧化活性，为抗氧化产品的开发和推广应用提供理论依据。
附图说明
[0019]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0020]图1是龙须菜多糖降解前后的分子量分布图；
[0021]图2是龙须菜低分子量多糖纯化的洗脱曲线图；
[0022]图3是龙须菜多糖降解前后相对粘度的变化；
[0023]图4是龙须菜多糖降解前后XRD分析结果；
[0024]图5是龙须菜多糖降解前后扫描电镜图；
[0025]图6是龙须菜多糖降解前后原子力显微镜图；A：GLP；B：GLP
‑
HV；C：GLP
‑
H；D：GLP
‑
V；
[0026]图7是龙须菜多糖降解前后对氧化损伤HepG2细胞的保护作用；
[0027]图8是龙须菜多糖降解前后对氧化损伤HepG2细胞活力的影响；
[0028]图9是龙须菜多糖降解前后对HepG2细胞总抗氧化能力的影响；
[0029]图10是龙须菜多糖降解前后对HepG2细胞CAT活性的影响；
[0030]图11是龙须菜多糖降解前后对HepG2细胞GSH
‑
PX活性的影响；
[0031]图12是龙须菜多糖降解前后对HepG2细胞SOD活性的影响；
[0032]图13是龙须菜多糖降解前后对HepG2细胞MDA活性的影响；
[0033]图14是龙须菜多糖降解前后对HepG2细胞Ca
2+
强度的影响；
[0034]图15是龙须菜多糖降解前后对HepG2细胞内ROS含量的影响。
具体实施方式
[0035]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0036]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有抗氧化活性的龙须菜高纯度低分子量多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取龙须菜多糖：龙须菜经清洁、干燥、粉碎和乙醇除杂后，进行加热提取，提取液离心、浓缩后，进行醇沉，沉淀复溶后，进行透析和冷冻干燥，得龙须菜多糖；(2)降解龙须菜多糖：向龙须菜多糖溶液中加入维生素C和过氧化氢，搅拌均匀，微波加热辅助降解，之后进行浓缩、醇沉，沉淀复溶后，进行透析和冷冻干燥，得龙须菜低分子量粗多糖；(3)纯化龙须菜低分子量多糖：将步骤(2)所述龙须菜低分子量粗多糖的溶液加入葡萄糖凝胶柱进行分离纯化，得到龙须菜高纯度低分子量多糖。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，提取龙须菜多糖的具体步骤包括：龙须菜经清洁、干燥、粉碎，用95％乙醇除杂，之后烘干，得龙须菜粉末，向其中加入料液比为1g：40
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50mL的水，于80
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100℃加热提取2
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4h，之后离心取上清液，于40
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60℃旋蒸浓缩，加入4倍体积无水乙醇进行醇沉，沉淀复溶后进行透析处理48
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72h，冷冻干燥48
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72h后，得龙须菜多糖。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述加热提取还包括超声波辅助提取10
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40min；所述醇沉的温度为4℃，时间为12h。4.根据权利要求1所述的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨贤庆，龙晓珊，胡晓，潘创，戚勃，赵永强，陈胜军，李来好，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院南海水产研究所，
类型：发明
国别省市：