一种促生抗病生物菌剂制造技术

本发明专利技术公开了一种促生抗病生物菌剂，所述生物菌剂为蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)、苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)、尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)、溜曲霉菌(Aspergillustamarii)其中一种或多种组合制成的生物菌剂。本发明专利技术利用微生物与植物的共生关系，促进药用植物生长，并且提高植物的抗病性，缓解市场对重楼需求量大与自然资源紧缺之间的矛盾，促进烟草各个生长指标显著提高，有效提高烟草的产量及质量。效提高烟草的产量及质量。效提高烟草的产量及质量。

【技术实现步骤摘要】
一种促生抗病生物菌剂


[0001]本专利技术涉及微生物菌剂
，特别涉及一种促生抗病生物菌剂。

技术介绍

[0002]重楼为延龄草科(Trillaceae)重楼属(Paris)多年生草本植物，以根状茎入药具有活血散瘀、消肿止痛、凉肝定惊、清热解毒、抗癌和抑菌等疗效，目前是云南白药、宫血宁胶囊、四川白药等一些重要中成药的主要成分，甾体皂苷是重楼的主要药用活性成分。
[0003]烟草黑胫病(Tobacco Black Shank)是一种由土传真菌烟草疫霉菌(Phytophthora nicotianae)侵染而引起的。土传病害是指由生活史中一部分或大部分存在于土壤中的病原物在条件适宜时侵染植物根部或茎部而发生的病害。烟草黑胫病主要发生在大田期，在烟草幼苗期和成株期均可发生，典型症状为萎焉、叶片发黄、矮化、根部和茎基部坏死，侵染后期全株死亡，且病原菌在土壤中可存活数年，对烟草种植危害极大。在田间，烟草黑胫病影响茎基部，一般使用化学杀菌剂甲霜灵防治病害。但这种做法不利于烟草可持续农业的发展，过度依赖化学药剂，留下杀菌剂残留，造成环境污染。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种促生抗病生物菌剂，利用微生物与植物的共生关系，提高药用植物活性成分积累、促进植物生长，并且提高植物的抗病性，缓解市场对高品质重楼需求量大与自然资源紧缺之间的矛盾，促进烟草各个生长指标显著提高，有效提高烟草的产量及质量。
[0005]本专利技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：
[0006]一种促生抗病生物菌剂，所述生物菌剂为蜡样芽孢杆菌 (Bacillus cereus)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)、溜曲霉菌(Aspergillus tamarii) 其中一种或多种组合制成的生物菌剂。
[0007]进一步优选的，所述生物菌剂为蜡样芽孢杆菌 (Bacillus cereus)制成的生物菌剂。
[0008]进一步优选的，所述生物菌剂为苏云金芽孢杆菌 (Bacillus thuringiensis)制成的生物菌剂。
[0009]进一步优选的，所述生物菌剂为尖孢镰刀菌 (Fusariumoxysporum)制成的生物菌剂。
[0010]进一步优选的，所述生物菌剂为溜曲霉菌(Aspergillus tamarii) 制成的生物菌剂。
[0011]进一步优选的，所述生物菌剂用于重楼的促生抗病。
[0012]进一步优选的，所述生物菌剂用于烟草的促生抗病。
[0013]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0014]其一、本专利技术的四种共生菌对滇重楼幼苗生长均有不同程度的促进作用，以尖孢
镰刀菌对株高、根长、根重、叶长、叶宽、地上鲜重的促进作用最显著；而苏云金芽孢杆菌对叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素的促进作用最显著；尖孢镰刀菌对净光合速率(Pn)、气孔导度(Cond)、蒸腾速率(Tr)的提高最显著。单一回接4株促生菌能有效刺激滇重楼幼苗对重楼皂苷的合成，显著增加滇重楼总皂苷含量。所有处理都不同程度的提高了皂苷合成通路基因的表达，苏云金芽孢杆菌菌株处理下HMGS、SE2、CAS的表达量最高，尖孢镰刀菌菌株处理的 GGPS和FPPS的表达量最高，SE1在蜡样芽孢杆菌处理下表达量最高。
[0015]其二、促生组和拮抗组植株生理指标均有不同程度的增加，蜡样芽孢杆菌菌株处理对烟草株高、冠幅、叶长和叶宽提升最显著；4株促生拮抗菌对烟草植株酶活性均有不同程度的促进作用，单独接种苏云金芽孢杆菌的促生组对SOD酶活性影响最显著，单独接种蜡样芽孢杆菌菌株的促生组对POD酶活性促进作用最显著，接种尖孢镰刀菌和苏云金芽孢杆菌菌株的促生组对PPO酶活性影响最显著，PAL酶活性在单独接种苏云金芽孢杆菌菌株的促生组和尖孢镰刀菌+Y的拮抗组处理下含量最高。对烟草黑胫病病原菌接种促生拮抗菌后的病情指数和抑制率进行分析，接种4株促生拮抗菌对烟草疫霉起拮抗作用。基因分析结果表明，尖孢镰刀菌和苏云金芽孢杆菌菌株处理的烟草生长及抗性相关基因均表达上调，其余处理均不表达。
附图说明
[0016]图1是不同菌株与烟草疫霉病原菌平板对峙试验；
[0017]图2是两年生幼苗共生后表型图；
[0018]图3展示共生菌对两年生幼苗叶片叶绿体色素含量的影响；
[0019]图4展示共生菌对两年生滇重楼甾体皂苷含量的影响；
[0020]图5展示共生菌对滇重楼根状茎中各相关基因表达的影响；
[0021]图6展示不同菌处理下烟草SOD酶活性；
[0022]图7展示不同菌处理下烟草POD酶活性；
[0023]图8展示不同菌处理下烟草PPO酶活性；
[0024]图9展示不同菌处理下烟草PAL酶活性；
[0025]图10展示接种尖孢镰刀菌和细菌烟草发病情况；
[0026]图11展示不同菌处理下烟草防疫酶基因表达量；
[0027]图12展示不同菌处理下烟草生长相关抗性基因表达量；
[0028]图13展示不同菌处理下烟草黑胫病相关抗性基因表达量。
具体实施方式
[0029]为了使本
的人员更好地理解本专利技术的技术方案，下面结合实施例对本专利技术作进一步的详细描述。本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限定本专利技术的范围。
[0030]实施例1
[0031]一种促生抗病生物菌剂，生物菌剂为蜡样芽孢杆菌 (Bacillus cereus)制成的生物菌剂，生物菌剂用于重楼和烟草的促生抗病。
[0032]实施例2
[0033]一种促生抗病生物菌剂，生物菌剂为苏云金芽孢杆菌 (Bacillus thuringiensis)制成的生物菌剂，生物菌剂用于重楼和烟草的促生抗病。
[0034]实施例3
[0035]一种促生抗病生物菌剂，生物菌剂为尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)制成的生物菌剂，生物菌剂用于重楼和烟草的促生抗病。
[0036]实施例4
[0037]一种促生抗病生物菌剂，生物菌剂为溜曲霉菌 (Aspergillus tamarii)制成的生物菌剂，生物菌剂用于重楼和烟草的促生抗病。
[0038]设置实验，验证4种菌株促生抗病的效果，并对四种菌株进行编号：蜡样芽孢杆菌(LgD2)、苏云金芽孢杆菌(LgD10)、尖孢镰刀菌 (TPB)、溜曲霉菌(TPD11)。
[0039]1、设置实验验证四种菌株对烟草黑胫病的抑制作用
[0040]将LgD2、LgD10、TPB、TPD11这四株菌分别与病原菌对峙培养，并且设置只有烟草疫霉病原菌的对照CK，7d后测量对照与处理病原菌直径，参照图1(图A:菌株TPB；图B:菌株TPD11；图C:菌株LgD10；图D:菌株LgD2；图E:只有烟草疫霉病原菌)。根据公式：抑菌率(100本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种促生抗病生物菌剂，其特征在于：所述生物菌剂为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)、溜曲霉菌(Aspergillus tamarii)其中一种或多种组合制成的生物菌剂。2.根据权利要求1所述的一种促生抗病生物菌剂，其特征在于：所述生物菌剂为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)制成的生物菌剂。3.根据权利要求1所述的一种促生抗病生物菌剂，其特征在于：所述生物菌剂为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘涛，王宪菊，杨汝军，字淑慧，
申请(专利权)人：玉龙县五晟种养殖有限公司，
类型：发明
国别省市：