DHA油脂和DHA粉末的制备方法技术

本申请公开了一种DHA油脂和DHA粉末的制备方法，如下：首先将菌种经扩大培养后接种到发酵培养基中，进行三次发酵，每次发酵结束后进行转罐，得发酵液；调节发酵液的pH值至碱性并升温后，利用复合酶对发酵液酶解破壁，得酶解液；对酶解液在氮气环境下离心，取上层清液脱水处理后，得DHA油脂和发酵滤液；对发酵滤液进行浓缩、乳化均质、干燥处理后得DHA粉末。本申请提供的方法制备DHA油脂和DHA粉末，可以减少破壁后的油脂损失，产油量及油脂中的DHA含量均有所提高，同时获得DHA油脂和DHA粉末两种产物，减少了环境污染。减少了环境污染。减少了环境污染。

【技术实现步骤摘要】
DHA油脂和DHA粉末的制备方法


[0001]本申请涉及生物科技领域，具体涉及一种DHA油脂和DHA粉末的制备方法。

技术介绍

[0002]DHA(二十二碳六烯酸)俗称脑黄金，是一种对人体非常重要的多不饱和脂肪酸，属于Omega
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3不饱和脂肪酸家族中的重要成员。DHA不能在体内自我合成，必须通过食物摄取。其具有增强智力、促进脑细胞发育、治疗心脑血管疾病等作用，被誉为新一代功能保健因子，广泛应用于婴幼儿食品添加剂和医药行业。
[0003]目前，DHA油脂主要来源于发酵生产，采用酶法破壁后通过溶剂萃取DHA油脂，但该工艺成本高、处理难度大，容易存在溶剂残留或溶剂污染等后续问题。目前，也可以通过酶法破壁后离心得到DHA油脂，但该工艺伴随着DHA油脂的分离提取会产生大量的发酵滤液，这些发酵滤液中会残存有一定含量的DHA；若将发酵滤液直接排放，不仅造成残存的DHA的浪费，同时发酵滤液中含有的蛋白质、葡糖糖、生物纤维、COD和BOD等也会增加废水处理成本。

技术实现思路

[0004]鉴于上述问题，本申请提出了一种DHA油脂和DHA粉末的制备方法，将菌种经扩大培养后接种到发酵培养基中进行三次发酵，调节发酵液的pH值至碱性并升温后利用复合酶对发酵液酶解破壁，对酶解液在氮气环境下离心，取上层清液脱水处理后得到DHA油脂和发酵滤液，对发酵滤液进行脱水、乳化均质、干燥处理后得DHA粉末。能够避免溶剂萃取工艺所导致的溶剂残留或溶剂污染，使DHA油脂制备过程更加简单，提高产油量及油脂中的DHA含量。也能够避免发酵滤液直接排放所造成的DHA浪费和环境污染。还能够同时得到DHA油脂和DHA粉末两种产物而应用于不同场景。
[0005]为了达到上述目的，本申请提供如下技术方案：
[0006]一种DHA油脂的制备方法，包括以下步骤：
[0007]步骤一、将菌种经扩大培养后接种到发酵培养基中；
[0008]步骤二、进行三次发酵，每次发酵结束后进行转罐，得发酵液；
[0009]步骤三、调节发酵液的pH值至碱性并升温；
[0010]步骤四、利用复合酶对发酵液酶解破壁，得酶解液；
[0011]步骤五，对酶解液在氮气环境下离心，取上层清液；
[0012]步骤六，对上层清液进行脱水处理，得DHA油脂和发酵滤液；
[0013]步骤七，对所述发酵滤液进行浓缩、乳化均质、干燥处理后得DHA粉末。
[0014]优选的，菌种包括：裂殖壶菌、吾肯氏壶藻菌、寇氏隐甲藻菌中的任一种。
[0015]优选的，发酵培养基包括：葡萄糖、酵母膏、玉米干粉和无机盐的混合物。
[0016]优选的，步骤二中，每次转罐后，通过补加方式使发酵培养基保持在预设浓度。
[0017]优选的，预设浓度为5％～25％。
[0018]优选的，步骤二中，第一次发酵温度为35～40℃、第二次发酵温度为30～35℃、第三次发酵温度为25～30℃。
[0019]优选的，步骤三中，调节发酵液的pH值至7.5～9并升温至50～60℃。
[0020]优选的，复合酶包括：纤维素酶、碱性蛋白酶、果胶酶、胰蛋白酶、脂肪酶中的至少两种的混合物。
[0021]优选的，步骤四之后，该方法还包括：步骤八，对酶解液进行研磨。
[0022]优选的，步骤六之后，该方法还包括：步骤九，将DHA油脂中加入纯水进行研磨，在氮气环境下离心，取上层清液进行脱水处理，得DHA精油。
[0023]首先取DHA菌种单菌落，接种至装有种子培养基的摇瓶中，置于摇床中进行种子的活化，得到具有较高活力的种子液。种子液再经扩大培养得到二级种子液后，接种至装有发酵培养基的发酵罐中进行发酵培养。发酵所用的菌种为裂殖壶菌、吾肯氏壶藻菌、寇氏隐甲藻菌中的任一种。种子培养基包括：葡萄糖、酵母膏和无机盐混合物。发酵培养基包括：葡萄糖、酵母膏、玉米干粉和无机盐混合物。
[0024]发酵过程共进行三次发酵，每次发酵结束后均进行转罐。三次发酵的温度逐渐降低：第一次发酵温度为35～40℃、发酵2～3天，第二次发酵温度为30～35℃、发酵2～3天，第三次发酵温度为25～30℃、发酵2～3天。发酵中，通过补加发酵培养基(葡萄糖、酵母膏、玉米干粉和无机盐混合物)使发酵培养基的浓度始终控制在5％～25％。
[0025]发酵结束后得发酵液。将发酵液的pH值调节到7.5～9并升温至50～60℃，利用包括纤维素酶、碱性蛋白酶、果胶酶、胰蛋白酶、脂肪酶中的至少两种的混合物的复合酶进行酶解破壁，酶解4～6h得酶解液。
[0026]在氮气环境下对酶解液离心，取上层清液脱水处理后得到DHA油脂和发酵滤液。离心力为5000～8000g，分离因数为3000～5000。
[0027]发酵滤液再经过浓缩、乳化均质、干燥处理后得DHA粉末，DHA粉末可以作为禽畜、水产养殖动物或伴侣性动物的饲料添加剂。
[0028]为了更加精炼DHA油脂，可以在离心之前对酶解液进行研磨。
[0029]上述工艺制备的DHA油脂为毛油，为了进一步进行精炼。可以将DHA油脂中继续添加纯水混匀，研磨。在氮气环境下对酶解液离心，取上层清液脱水处理后得到DHA精油。离心力为8000～12000g，分离因数为5000～6000。
[0030]本申请提出了一种DHA油脂的制备方法，将菌种经扩大培养后接种到发酵培养基中进行三次发酵，调节发酵液的pH值至碱性并升温后利用复合酶对发酵液酶解破壁，对酶解液在氮气环境下离心，取上层清液脱水处理后得到DHA油脂和发酵滤液，对发酵滤液进行脱水、乳化均质、干燥处理后得DHA粉末，对毛油进行研磨和二次离心，制备得到DHA精油。能够避免溶剂萃取工艺所导致的溶剂残留或溶剂污染，使DHA油脂和DHA粉末制备过程更加简单，提高产油量及油脂中的DHA含量。也能够避免发酵滤液直接排放所造成的DHA浪费和环境污染。还能够同时得到DHA油脂和DHA粉末两种产物而应用于不同场景。
附图说明
[0031]通过阅读下文优选实施方式的详细描述，各种其他的优点和益处对于本领域普通技术人员将变得清楚明了。附图仅用于示出优选实施方式的目的，而并不认为是对本申请
的限制。而且在整个附图中，用相同的参考符号表示相同的部件。在附图中：
[0032]图1是本申请的一种DHA油脂的制备方法的流程框图；
[0033]图2是本申请的另一种DHA油脂的制备方法的流程框图。
具体实施方式
[0034]下面将结合本申请的实施例，对本申请的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
[0035]根据图1所示，通过实施例1
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实施例3说明本申请的一种DHA油脂的制备方法。
[0036]实施例1
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种DHA油脂和DHA粉末的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，将菌种经扩大培养后接种到发酵培养基中；步骤二，进行三次发酵，每次发酵结束后进行转罐，得发酵液；步骤三，调节所述发酵液的pH值至碱性并升温；步骤四，利用复合酶对所述发酵液酶解破壁，得酶解液；步骤五，对所述酶解液在氮气环境下离心，取上层清液；步骤六，对所述上层清液进行脱水处理，得DHA油脂和发酵滤液；步骤七，对所述发酵滤液进行浓缩、乳化均质、干燥处理后得DHA粉末。2.根据权利要求1所述的DHA油脂和DHA粉末的制备方法，其特征在于，所述菌种包括：裂殖壶菌、吾肯氏壶藻菌、寇氏隐甲藻菌中的任一种。3.根据权利要求1所述的DHA油脂和DHA粉末的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基包括：葡萄糖、酵母膏、玉米干粉和无机盐的混合物。4.根据权利要求1所述的DHA油脂和DHA粉末的制备方法，其特征在于，所述步骤二中，每次转罐后，通过补加方式使所述发酵培养基保持在预设浓度。5.根据权利要求4所述的DHA油脂和...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩姝媛，朱春怡，高海峰，
申请(专利权)人：挪亚圣诺太仓生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：