一种具有酸碱指示功能的粪便样本常温保护液制造技术

本发明专利技术是一种具有酸碱指示功能的粪便样本常温保护液，包括有硫氰酸胍、乙醇、EDTA

【技术实现步骤摘要】
一种具有酸碱指示功能的粪便样本常温保护液


[0001]本专利技术涉及微生物检测
，尤其涉及一种具有酸碱指示功能的粪便样本常温保护液。

技术介绍

[0002]随着人们对肠道微生态的研究深入，肠道健康与肠道菌群受到了更多的关注。许多文献报道称，粪便样本的pH会随着饮食习惯及身体健康状况变化。素食主义者的粪便pH普遍在6.0
‑
6.3之间；而喜食肉类蛋白的人群粪便pH则多为6.0
‑
7.0；多数正常人的粪便pH为6.6
±
0.3；结直肠癌患者的pH则为碱性(pH≥7.0)，且粪便pH为碱性的人群相较于其他人，结直肠癌病发的概率更高。当肠道菌群失衡、消化不良或患有急性肠炎时，粪便就会呈酸性。除此之外，患有一些其他疾病时，粪便的pH也会发生改变。因此粪便的酸碱性可以快速粗略的反映人体的健康状况。
[0003]在临床粪便样本检测中，经常会结合粪便菌群的结构丰度来预测分析人体的各项健康指标。然而，在粪便排泄出体外后，菌群结构会随着细菌的繁殖及死亡不断的发生改变，从而导致长时间放置后的粪便样本与初始的粪便样本菌群结构差异大，检测结果出现大幅偏差。因此如何保存粪便样本，使其菌群结构不会发生明显改变成了肠道菌群研究的重中之重。
[0004]目前医院及检测机构常用的粪便样本保存方法为
‑
80℃超低温冻存，这种保存方式对设备要求高，保存成本高，难以长途运输，并且反复冻融容易破坏其中的DNA，导致检测结果不准确。因此，粪便常温保护液成为了保存粪便样本的最佳选择。它能使粪便样本摆脱低温保存的限制，可以在常温环境中保存和运输，同时也能最大程度的减小肠道菌群结构发生的变化。
[0005]如专利申请2017113700585公开了一种粪便保存液及其应用。本专利技术的粪便保存液利用乙醇作为固定剂、柠檬酸钠作为固定辅助剂、EDTA
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二钠为抗凝剂、Tris
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HCl为缓冲液、NaCl为离子强度维持剂，并配方有十二烷基硫酸钠，实现粪便样本的常温保存。又如专利申请2018115344096公开了一种粪便保存液，所述粪便保存液的溶剂为水，以所述粪便保存液的体积计，各组分的浓度如下：乙二胺四乙酸9
‑
13g/L，异硫氰酸胍400
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600g/L，1M Tris
‑
HCl(pH＝7
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10)体积百分数为8％
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10％，氯化钠7
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10g/L，山梨醇50
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80g/L，十二烷基硫酸钠20
‑
40g/L。该粪便保存液实现了粪便样本的常温保存以及随时随地的采集粪便样本。
[0006]然而，现如今检测粪便酸碱性的常规方法多为使用pH检测仪直接插入粪便样本中进行检测，然而这种方法不但容易使得粪便样本交叉污染，且仪器清洗困难，检测所需的粪便量也较大。不论是对检测者还是被检测者都造成了不小的麻烦。
[0007]因此，需要设计出一种可以检测粪便酸碱性的常温保护液。这种保护液在保证其能在常温条件下稳定保存粪便样本菌群结构的前提下，也同时具备快速检测粪便酸碱性的功能。

技术实现思路

[0008]为解决上述问题，本专利技术的首要目的在于提供一种具有酸碱指示功能的粪便样本常温保护液，该保护液在保证其能在常温条件下稳定保存粪便样本菌群结构的前提下，也同时具备快速检测粪便酸碱性的功能。
[0009]为实现上述目的，本专利技术的技术方案如下。
[0010]一种具有酸碱指示功能的粪便样本常温保护液，包括有硫氰酸胍、乙醇、EDTA
‑
Na2、NaCl、磷酸缓冲液、吐温20、BSA、甲基红、溴甲酚绿、儿茶酚紫、溴甲酚紫；其中，硫氰酸胍、乙醇、EDTA
‑
Na2、NaCl、磷酸缓冲液、吐温20和BSA 构成保护液A，用于在常温下保存粪便；在保护液A的基础上增加甲基红、溴甲酚绿、儿茶酚紫和溴甲酚紫构成的保护液B，用于快速检测粪便的酸碱性。
[0011]具体的保护液配方如下：
[0012]以重量百分比计算，保护液A包括有：硫氰酸胍0.01
‑
5M、乙醇30％
‑
60％、EDTA
‑
Na
2 0.001
‑
0.35M、NaCl 0.15M、磷酸缓冲液5％
‑
15％、吐温20 0.05％
‑
1％、BSA 2.5
‑
100mM，PH7.0；
[0013]保护液B包括有：硫氰酸胍0.01
‑
5M、乙醇30％
‑
60％、EDTA
‑
Na
2 0.001
‑
0.35M、NaCl 0.15M、磷酸缓冲液5％
‑
15％、吐温20 0.05％
‑
1％、BSA 2.5
‑
100mM、0.5％
‑
2％的甲基红、0.01％
‑
1％的溴甲酚绿、0.01
‑
0.8％的儿茶酚紫、0.05％
‑
1％的溴甲酚紫；保护液B具有酸碱指示功能，其变色范围为4.2
‑
9.0。
[0014]最优的组方为：硫氰酸胍(Guanidinethiocyanate)2M、乙醇30％、EDTA
‑
Na
2 0.25M、NaCl 0.15M、磷酸缓冲液10％、吐温20 0.5％、BSA 5mM，0.5％的甲基红、0.25％的溴甲酚绿、0.5％的儿茶酚紫、1％的溴甲酚紫，pH7.0；保护液B具有酸碱指示功能，其变色范围为4.2
‑
9.0。
[0015]本专利技术的保护液A对粪便样本中的DNA具有良好的保护效果从而起到保护菌群结构的目的，同时，在保护液A的基础上增加甲基红、溴甲酚绿、儿茶酚紫和溴甲酚紫构成保护液B能够根据不同的酸碱度进行变色，在保持原有的DNA保护功能的前提下，具有快速指示粪便样本酸碱性的功能。
[0016]本专利技术具有以下几个优点：
[0017](1)成本低廉；
[0018](2)菌群结构能长时间保持稳定及完整性；
[0019](3)保护液物理及化学性质稳定；
[0020](4)生产工艺简单；
[0021](5)能够快速简便的检测粪便酸碱性。
附图说明
[0022]图1为本专利技术的常温保护液颜色对照图。
[0023]图2为本专利技术的保护液B恒温环境下颜色变化示意图。
[0024]图3为第一个志愿者粪便样本在两种常温保护液中的菌群丰度图。
[0025]图4为第二个志愿者粪便样本在两种常温保护液中的菌群丰度图。
[0026]图5为第三个志愿者粪便样本在两种常温保护液中的菌群丰度图。
[0027]图6为本专利技术的粪便样本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有酸碱指示功能的粪便样本常温保护液，其特征在于所述保护液包括有硫氰酸胍、乙醇、EDTA
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Na2、NaCl、磷酸缓冲液、吐温20、BSA、甲基红、溴甲酚绿、儿茶酚紫、溴甲酚紫；其中，硫氰酸胍、乙醇、EDTA
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Na2、NaCl、磷酸缓冲液、吐温20和BSA构成保护液A，用于在常温下保存粪便；在保护液A的基础上增加甲基红、溴甲酚绿、儿茶酚紫和溴甲酚紫构成的保护液B，用于快速检测粪便的酸碱性。2.根据权利要求1所述的具有酸碱指示功能的粪便样本常温保护液，其特征在于以重量百分比计算，保护液A包括有：硫氰酸胍0.01
‑
5M、乙醇30％
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60％、EDTA
‑
Na
2 0.001
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0.35M、NaCl 0.15M、磷酸缓冲液5％
‑
15％、吐温20 0.05％
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1％、BSA 2.5
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：张帮周，林檀，罗联根，李源涛，何剑全，肖传兴，
申请(专利权)人：厦门承葛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：