RCN2重组蛋白在制备预防和/或治疗骨质疏松症以及提升免疫力的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种RCN2重组蛋白在制备预防和/或治疗骨质疏松症以及提升免疫力的药物中的应用。本发明专利技术中发现RCN2重组蛋白可以通过促进骨髓脂肪脂解、免疫祖细胞生成和骨形成，从而提高机体免疫力和维持骨量，为制备预防和/或治疗骨质疏松症、提升机体免疫力的药物提供了新的思路，有助于丰富促进骨形成一类药物以及有效提高机体免疫药物的品类，为药物的开发提供新的研究理论基础。开发提供新的研究理论基础。开发提供新的研究理论基础。

【技术实现步骤摘要】
RCN2重组蛋白在制备预防和/或治疗骨质疏松症以及提升免疫力的药物中的应用


[0001]本专利技术属于分子生物学和生物化学
，具体涉及一种Reticulocalbin
‑
2蛋白(Reticulocalbin
‑
2，RCN2)重组蛋白在制备预防和/或治疗骨质疏松症以及提升免疫力的药物中的应用。

技术介绍

[0002]随着人均预期寿命的增加，慢性病高发也成为老龄化社会的一大挑战，其中骨质疏松症是老年人慢性病总患病率最高的疾病之一。骨质疏松症是一种由于多种原因导致骨密度和骨质量下降，骨微结构破坏，造成骨脆性增加，从而容易发生骨折的全身性骨病。老年人每日运动活动量减少，特别是对于长期卧床的病人来说，由于缺乏运动机械应力的刺激，导致骨重塑失衡，骨吸收增加，进而引起骨质疏松甚至全身多发性骨折的发生。这显著增加了卧床病人骨折及全因死亡的风险，降低了患者生活质量，为社会带来沉重的经济及医疗负担。目前，临床上治疗骨质疏松症以抑制骨吸收功能的药物为主，如双磷酸盐类，但其会产生一些严重的副作用，如下颌骨坏死及非典型骨折等缺陷。而目前临床上通过促进骨形成来治疗骨质疏松症的一类药物种类稀少，可供选择的药物不多，亟需丰富治疗骨质疏松疾病的药物市场。
[0003]同时，随着年龄增长，机体的免疫系统功能会不断受损，这种损伤的一个表现就是老年人机体内存在的慢性炎症。在这种情况下，机体的免疫系统会持续异常活跃并释放出炎性物质，参与多种年龄相关疾病的发生发展。而老年人作为骨质疏松症发生的常见群体，其机体免疫功能的下降，免疫稳态的破坏则是疾病发生发展不可忽视的一个因素。目前提升老年人免疫力，改善免疫稳态的方式主要以提倡合理均衡饮食、加强运动为主，并没有一款有效的药物来快速准确的对症治疗。
[0004]Reticulocalbin
‑
2蛋白(Reticulocalbin2，RCN2)是一个具有6个EF手形模体的钙结合蛋白，是属于CREC蛋白质家族的一员，RCN2对钙离子结合具有低亲和力，介导钙离子信号转导通路。但迄今为止尚未见到有关RCN2重组蛋白用于制备治疗骨质疏松症、提升机体免疫力药物的报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种RCN2重组蛋白在制备预防和/或治疗骨质疏松症以及提升免疫力的药物中的应用。本专利技术中利用昆虫细胞表达系统获得的RCN2重组蛋白可以通过促进骨髓脂肪脂解、免疫祖细胞生成和骨形成，从而提高机体免疫力和维持骨量，为制备预防和/或治疗骨质疏松症、提升机体免疫力的药物提供了新的思路，有助于丰富促进骨形成一类药物以及有效提高机体免疫药物的品类，为药物的开发提供新的研究理论基础。
[0006]本专利技术所采用的技术方案具体如下。
[0007]本专利技术提供了一种RCN2重组蛋白在制备预防和/或治疗骨质疏松症的药物中的应
用。
[0008]本专利技术中，优选地，所述RCN2重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
[0009]本专利技术提供了一种RCN2重组蛋白在制备提高机体免疫的药物中的应用。
[0010]本专利技术中，优选地，所述RCN2重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
[0011]本专利技术还提供了一种RCN2重组蛋白促进骨髓内普通淋巴祖细胞生成的应用。
[0012]本专利技术中，优选地，所述RCN2重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
[0013]本专利技术还提供了一种RCN2重组蛋白作为基因Hsl和/或Atgl表达促进的应用。
[0014]本专利技术中，优选地，所述RCN2重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
[0015]本专利技术所用试剂和原料均市售可得。
[0016]本专利技术的积极进步效果在于：
[0017]本专利技术中的RCN2重组蛋白可有效促进骨骼内脂肪细胞脂解从而减少脂肪堆积，同时通过促进骨形成明显改善骨量，延缓骨质疏松症的发展。更有益处的是RCN2重组蛋白可促进普通淋巴祖细胞生成，提升机体免疫功能。具体的说明如下：
[0018](1)RCN2重组蛋白能促进骨髓内脂肪细胞的脂肪分解。
[0019](2)RCN2重组蛋白能改善骨量，增加骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)及骨形成率，而减少骨小梁分离度(Tb.Sp)；RCN2重组蛋白减少骨髓内脂肪细胞数量。
[0020](3)RCN2重组蛋白能增加OCN
+
的成骨细胞、降低脂肪细胞的数量及面积。
[0021](4)RCN2重组蛋白能促进骨髓内普通淋巴祖细胞的生成。
附图说明
[0022]图1为经过筛选获得的RCN2重组蛋白；
[0023]图2为RCN2重组蛋白干预骨髓内脂肪细胞后脂肪细胞脂解作用增强的WB结果示意图；
[0024]图3A为15月龄的老年鼠鼠尾静脉注射RCN2重组蛋白后并对骨进行苏木素
‑
伊红染色后示意图；
[0025]图3B
‑
C为15月龄的老年鼠鼠尾静脉注射RCN2重组蛋白后骨髓脂肪细胞数量及面积统计分析图；
[0026]图4A为15月龄的老年鼠鼠尾静脉注射RCN2重组蛋白后骨量增加的骨扫描三维重建图；
[0027]图4B
‑
E为15月龄的老年鼠鼠尾静脉注射RCN2重组蛋白后骨量增加的骨参数分析统计图；其中，图4B为骨体积分数(BV/TV)，图4C为骨小梁厚度(Tb.Th)，图4D为骨小梁数量(Tb.N)，图4E为皮质骨厚度(Ct.Th)；
[0028]图5A为15月龄的老年鼠鼠尾静脉注射RCN2后进行钙荧双标实验的染色骨形成示意图；
[0029]图5B为15月龄的老年鼠鼠尾静脉注射RCN2后进行钙荧双标实验的染色骨矿化沉积率(MAR)增加的统计分析图；
[0030]图6A为15月龄的老年鼠鼠尾静脉注射RCN2后骨钙素染色的示意图，箭头表示OCN
+
阳性的细胞；
[0031]图6B为15月龄的老年鼠鼠尾静脉注射RCN2后骨钙素染色后增加的OCN
+
细胞数量统计分析图；
[0032]图7A为15月龄的老年鼠鼠尾静脉注射RCN2后骨髓内普通淋巴祖细胞生成增加的流式细胞图；
[0033]图7B为15月龄的老年鼠鼠尾静脉注射RCN2后骨髓内普通淋巴祖细胞生成增加的统计分析图；
[0034]图8A为2月龄的小鼠悬尾时经鼠尾静脉注射RCN2重组蛋白并对骨进行苏木素
‑
伊红染色后示意图；
[0035]图8B
‑
C为2月龄的小鼠悬尾时经鼠尾静脉注射RCN2重组蛋白骨髓脂肪细胞数量及体积统计分析图；
[0036]图9A为2月龄的小鼠悬尾时经鼠尾静脉注射RCN2重组蛋白后骨量增加的骨扫描三维重建图；
[0037]图9B
‑
E为2月龄的小鼠本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种RCN2重组蛋白在制备预防和/或治疗骨质疏松症药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述RCN2重组蛋白具有促进骨形成的作用。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述RCN2重组蛋白具有基因Hsl和/或Atgl表达促进的作用。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的应用，其特征在于，所述RCN2重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。5.一种R...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗湘杭，彭慧，
申请(专利权)人：中南大学湘雅医院，
类型：发明
国别省市：