一种无乳链球菌菌株ΔessC及其构建方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种essC基因敲除的无乳链球菌菌株ΔessC及其构建方法和应用，所述essC基因序列如SEQIDNO.1所示，或为与SEQIDNO.1完全互补配对的序列，或为如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或添加一个或多个核苷酸，且能编码相同功能蛋白质的核苷酸序列，或为编码氨基酸序列如SEQIDNO.2所示的核苷酸序列。经研究发现essC基因缺失造成了分泌免疫原性胞外蛋白ESAT6产生分泌障碍，从而降低了无乳链球菌株毒性。同时，本发明专利技术所构建的无乳链球菌基因敲除菌株ΔessC与野生株生长速率基本一致，且具有明显减毒特征，本研究对无乳链球菌

【技术实现步骤摘要】
一种无乳链球菌菌株
Δ
essC及其构建方法和应用


[0001]本专利技术涉及属于生物
，更具体地，本专利技术涉及一种无乳链球菌菌株ΔessC及其构建方法和应用。

技术介绍

[0002]无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)属于B族链球菌(GBS)，具有广泛的宿主范围，能感染人类、哺乳动物、爬行动物、两栖动物和鱼类等宿主，对全球公共卫生和人体健康造成了很大的危害。我国属罗非鱼养殖大国，属链球菌病高流行地区，其发病率和死亡率为罗非鱼传染病之首，疫情呈三高特征(发病率高、死亡率高、耐药率高)，形成全国性的防治压力。
[0003]近年来研究发现，在放线杆菌门和厚壁菌门等革兰氏阳性细菌中，存在一种新型分泌系统，即
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型分泌系统(Type 7 secretion system,T7SS)。
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型分泌系统由多种组分构成，分泌两种免疫原性胞外蛋白，ESAT6和CFP
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10，与菌株毒力密切相关。无乳链球菌研究显示，ESAT6蛋白以同源二聚体形式发挥作用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种essC基因在无乳链球菌毒性调控中的应用，其特征在于，所述essC基因序列如SEQ ID NO.1所示，或为与SEQ ID NO.1完全互补配对的序列，或为如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或添加一个或多个核苷酸，且能编码相同功能蛋白质的核苷酸序列，或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。2.一种essC蛋白在无乳链球菌毒性调控中的应用，其特征在于，所述essC蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，或如SEQ ID NO.2所示氨基酸序列经取代、缺失和/或添加一个或多个氨基酸，但蛋白活性相同。3.根据权利要求1
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2中任一项所述应用，其特征在于，所述毒性表现为分泌免疫原性胞外蛋白，优选为分泌ESAT6蛋白。4.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述毒性调控为正向调控，优选为essC基因敲除下调无乳链球菌ESAT6蛋白表达。5.一种essC基因重组敲除载体，其特征在于，所述重组载体上插入以氯霉素抗性基因CAT代替essC基因的融合片段，所述融合片段由如权利要求1所示essC基因的上、下游片段和CAT基因片段组成。6.根据权利要求5所述重组敲除载体，其特征在于，所述essC基因上游片段为其上游632bp同源臂，所述essC基因下游片段为其下游571bp同源臂。7.一种essC基因重组敲除载体的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(...

【专利技术属性】
技术研发人员：马艳平，刘振兴，吴梓鋆，郝乐，马江耀，梁志凌，柯浩，
申请(专利权)人：广东顺安丰泰水产科技有限公司，
类型：发明
国别省市：