一种何首乌中6种二蒽酮类化合物的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种何首乌中6种二蒽酮类化合物的检测方法，属于化学分析检测技术领域。本发明专利技术采用液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种何首乌中6种二蒽酮类化合物的检测方法


[0001]本专利技术属于化学分析检测
，具体涉及一种何首乌中6种二蒽酮类化合物的检测方法。

技术介绍

[0002]《中国药典》2020版一部规定何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根。制何首乌是何首乌的炮制加工品，具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨、化浊降脂的功效。制何首乌具有悠久的药用历史，作为补益良药广泛应用在处方药、非处方药及保健用品中。何首乌中化学成分复杂，主要有二苯乙烯类、蒽醌类、二蒽酮类、多酚类及萘类等化学成分。近年来，有关何首乌肝毒性等不良反应报道引起了广泛关注。前期研究发现，何首乌中二蒽酮类成分，具有一定的肝毒性：反式大黄素
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大黄素二蒽酮(trans
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emodin
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emodin dianthrones)和顺式大黄素
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大黄素二蒽酮(cis
‑
emodin
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emodin dianthrones)，在斑马鱼的胚胎发育和肝毒性评价模型中均表现一定的毒性作用，顺式大黄素
‑
大黄素甲醚二蒽酮在人肝HepG2细胞模型上表现出显著肝毒性，提示该类成分可能为何首乌中潜在的肝毒性成分。
[0003]根据中医学理论，炮制具有“减毒增效”的作用。炮制是何首乌化学成分和比例发生变化，何首乌生物活性改变的关键，是决定制何首乌质量的重要生产过程。前期研究表明，何首乌中二蒽酮类成分具有一定的肝毒性，且在炮制后含量降低或消失，提示其可能为何首乌炮制减毒的机制之一。徐文运用高分辨质谱技术(徐文.液质联用技术在两种中药成分分析中的应用[D].广州:广州中医药大学,2015)证实了何首乌中二蒽酮糖苷成分为大黄素(10
→
10
′
)大黄素或大黄素(10
→
10
′
)大黄素甲醚的母核。因此，有必要去增加何首乌中反式大黄素
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大黄素二蒽酮、顺式大黄素
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大黄素二蒽酮、反式大黄素
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大黄素甲醚二蒽酮、顺式大黄素
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大黄素甲醚二蒽酮、反式大黄素甲醚
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大黄素甲醚二蒽酮和顺式大黄素甲醚
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大黄素甲醚二蒽酮这6种二蒽酮类化合物的检测方法。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种何首乌中6种二蒽酮类化合物的检测方法。本专利技术的检测方法可以同时检测反式大黄素
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大黄素二蒽酮、顺式大黄素
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大黄素二蒽酮、反式大黄素
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大黄素甲醚二蒽酮、顺式大黄素
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大黄素甲醚二蒽酮、反式大黄素甲醚
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大黄素甲醚二蒽酮和顺式大黄素甲醚
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大黄素甲醚二蒽酮这6种二蒽酮类化合物，具有灵敏度高、精密度好、稳定性高、重复性好、回收率好的优点。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种何首乌中6种二蒽酮类化合物的检测方法，包括以下步骤：
[0007]将何首乌样品依次进行醇提、酸水解、萃取、浓缩有机相和复溶，得到供试品溶液；
[0008]将所述供试品溶液进行液相色谱
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质谱分析，得到供试品色谱图；
[0009]所述液相色谱
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质谱分析的色谱条件包括：
[0010]色谱柱：WatersACQUITYUPLC CSH C18；
[0011]流动相：A为乙腈，B为质量分数0.1％的甲酸水溶液；
[0012]流速：0.3mL/min；
[0013]梯度洗脱程序为：0～4min：A的体积比由45％上升到60％；4～14min：A的体积比保持60％；14～16min：A的体积比由60％上升到70％；16～21min：A的体积比保持70％；21～24min：A的体积比由70％上升到95％；24～30min：A的体积比保持45％；
[0014]柱温：25～35℃；
[0015]进样量：1.0～3.0μL；
[0016]所述液相色谱
‑
质谱分析的质谱条件包括：
[0017]电喷雾离子源，负离子模式，扫描方式：多反应监测(MRM)，温度：150℃，毛细管电压：3.0KV，除溶剂温度：350℃，除溶剂气体：氮气，流速：650L/min；
[0018]根据所述供试品色谱图与预定的标准谱图进行比对，确定何首乌样品中二蒽酮类化合物的种类；
[0019]所述二蒽酮类化合物包括：反式大黄素
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大黄素二蒽酮、顺式大黄素
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大黄素二蒽酮、反式大黄素
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大黄素甲醚二蒽酮、顺式大黄素
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大黄素甲醚二蒽酮、反式大黄素甲醚
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大黄素甲醚二蒽酮和顺式大黄素甲醚
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大黄素甲醚二蒽酮。
[0020]优选的，所述醇提的溶剂包括乙醇溶液，所述乙醇溶液的体积分数为40～60％。
[0021]优选的，所述醇提的溶剂与何首乌样品的用量比为40～60mL:0.5～1.5g。
[0022]优选的，所述醇提包括超声提取，所述超声提取的时间为20～40min。
[0023]优选的，所述酸水解的溶剂包括盐酸溶液，所述盐酸溶液的质量分数为8～12％。
[0024]优选的，所述酸水解的溶剂与何首乌样品的用量比为5～15mL:0.1～0.3g。
[0025]优选的，所述酸水解的温度为40～60℃，时间为20～40min。
[0026]优选的，所述萃取的溶剂包括乙酸乙酯。
[0027]优选的，所述复溶的溶剂与何首乌样品的用量比为25mL:0.1～0.3g。
[0028]优选的，得到供试品色谱图后还包括以下步骤：利用标准方程计算何首乌中6种二蒽酮类化合物的含量，所述标准方程是以6种二蒽酮类化合物的质量浓度为自变量、峰面积为因变量的方程。
[0029]本专利技术与现有技术相比，具有如下有益效果：
[0030]本专利技术采用液相色谱
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质谱分析，可以同时检测何首乌中的反式大黄素
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大黄素二蒽酮、顺式大黄素
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大黄素二蒽酮、反式大黄素
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大黄素甲醚二蒽酮、顺式大黄素
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大黄素甲醚二蒽酮、反式大黄素甲醚
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大黄素甲醚二蒽酮和顺式大黄素甲醚
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大黄素甲醚二蒽酮这6种二蒽酮类化合物。本专利技术选择乙腈和质量浓度为0.1％的甲酸水溶液作为流动相，使何首乌中的这6种难分离的二蒽酮类化合物具有很好的分离度。本专利技术的检测方法操作简单，可实现这6种二蒽酮类化合物的快速定性和定量分析，具有灵敏度高、精密度好、稳定性高、重复性好、回收率好的优点。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种何首乌中6种二蒽酮类化合物的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将何首乌样品依次进行醇提、酸水解、萃取、浓缩有机相和复溶，得到供试品溶液；将所述供试品溶液进行液相色谱
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质谱分析，得到供试品色谱图；所述液相色谱
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质谱分析的色谱条件包括：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH C18；流动相：A为乙腈，B为质量分数0.1％的甲酸水溶液；流速：0.3mL/min；梯度洗脱程序为：0～4min：A的体积比由45％上升到60％；4～14min：A的体积比保持60％；14～16min：A的体积比由60％上升到70％；16～21min：A的体积比保持70％；21～24min：A的体积比由70％上升到95％；24～30min：A的体积比保持45％；柱温：25～35℃；进样量：1.0～3.0μL；所述液相色谱
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质谱分析的质谱条件包括：电喷雾离子源，负离子模式，扫描方式：多反应监测(MRM)，温度：150℃，毛细管电压：3.0KV，除溶剂温度：350℃，除溶剂气体：氮气，流速：650L/min；根据所述供试品色谱图与预定的标准谱图进行比对，确定何首乌样品中二蒽酮类化合物的种类；所述二蒽酮类化合物包括：反式大黄素
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大黄素二蒽酮、顺式大黄素
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大黄素二蒽酮、反式大黄素
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大黄素甲醚二蒽...

【专利技术属性】
技术研发人员：高慧宇，马双成，魏锋，杨建波，于健东，程显隆，王莹，姚令文，汪祺，王雪婷，宋云飞，
申请(专利权)人：中国食品药品检定研究院，
类型：发明
国别省市：