一株抗动物腹泻动物联合乳杆菌ZJUIDS-R2及其应用制造技术

本发明专利技术提供一株抗动物腹泻动物联合乳杆菌ZJUIDS

【技术实现步骤摘要】
一株抗动物腹泻动物联合乳杆菌ZJUIDS
‑
R2及其应用


[0001]本专利技术属于动物微生物
，涉及具有抗腹泻功能的动物联合乳杆菌，尤其涉及一株抗动物腹泻动物联合乳杆菌ZJUIDS
‑
R2及其应用。

技术介绍

[0002]在家兔和一些动物饲养过程中，因其脆弱的消化系统常发生胃肠道疾病。腹泻的发生通常与肠道微生物的区系变化有关，约80％的患病兔会出现腹泻这一症状。出现该症状的原因可以分为环境因素、营养因素和病原因素，在宠物兔的饲养过程中，占比最大的原因是营养因素，例如饲喂高蛋白、高纤维或含高碳水化合物饲料，以及饲料发霉、饲料中随意添加抗生素等都会引起兔子发生腹泻。
[0003]目前，市面上用于预防家兔、猫狗等动物腹泻的疫苗较少，进行治疗时主要采用药物调控和生物调控。随着禁止使用抗生素的进程，腹泻等疾病防治开始寻找新的出路，益生菌、寡聚糖和酶制剂等具有巨大的应用前景，其中益生菌相关的研究最多。
[0004]2001年，FAO和WHO联合专家咨询会将益生菌定义为“活的微生物，当摄入足够的数量时，会给宿主带来未指明的健康益处”。机体摄入的外来有益细菌，通过与胃肠道免疫系统和微生物菌群相互作用，对宿主健康产生积极的影响。当受到外界刺激后，肠道内菌群失调，有害菌大量繁殖，有益菌难以对抗，自身稳态被打破，此时补充益生菌事半功倍，能在较短时间内发挥作用。益生菌在动物机体内通过免疫调节、增加肠道屏障功能、维持肠道菌群平衡、调节营养物质等作用机制影响宿主健康，能有效降低幼龄动物的发病率和死亡率、提高成年动物生产性能、改善肉质、提高饲料转化率等。益生菌作为一种天然高效环保的添加剂，是目前为止最有效的抗生素替代品。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一株抗动物腹泻动物联合乳杆菌ZJUIDS
‑
R2，所述动物联合乳杆菌ZJUIDS
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R2(Ligilactobacillus animalis)已于2022年3月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC NO.24560。本专利技术所提供的动物联合乳杆菌ZJUIDS
‑
R2(Ligilactobacillus animalis)的16s rDNA全序列如SEQ ID No.1所示。
[0006]本专利技术从健康宠物兔的粪便中筛选出一株动物联合乳杆菌ZJUIDS
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R2(Ligilactobacillus animalis)，通过细菌形态学、生理学、培养特性和16S rDNA测序等对该菌进行了鉴定。
[0007]本专利技术所提供动物联合乳杆菌ZJUIDS
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R2(Ligilactobacillus animalis)的菌落形态学特征为：在MRS琼脂培养基上形成明显的菌落，直径1～2mm、圆形、凸起、边缘整齐、表面光滑、乳白色、不透明；革兰氏染色阳性，两端钝圆，短棒状，单个排列或短链状排列，无芽孢，无鞭毛。
[0008]本专利技术的另一个目的是提供所述动物联合乳杆菌ZJUIDS
‑
R2在制备预防宠物腹泻
产品中的应用。本专利技术涉及的宠物主要有：犬、猫、兔、豚鼠、龙猫、仓鼠等。本专利技术主要是针对动物的细菌性腹泻，且偏向多种致病菌混合感染导致的腹泻。导致动物腹泻的病原微生物主要又分为细菌、真菌、病毒、寄生虫等。引起动物腹泻的细菌常见于大肠杆菌、沙门氏菌、魏氏梭菌、巴氏杆菌、产气荚膜梭菌等，其中以大肠杆菌为病因的腹泻占首位，单一病原菌可以引起动物腹泻，也可以与其他病原菌混合感染发病，在生产和生活中混合感染引起的腹泻占比最大。
[0009]所述产品为具有抗腹泻功能的药品、保健品、宠物饲料和宠物零食等。
[0010]本专利技术所述的具有预防腹泻功能的药品包括具有抗腹泻功能的活菌制剂和菌液，该活菌制剂中动物联合乳杆菌ZJUIDS
‑
R2的活菌数为1.0
×
10
10
～5.0
×
10
10
CFU/g。
[0011]所述具有抗腹泻功能的保健品是具有预防腹泻功能的宠物奶粉(ZJUIDS
‑
R2有效菌保证值1
×
108CFU/g)和滴剂(ZJUIDS
‑
R2有效菌保证值1
×
109CFU/ml)。
[0012]本专利技术所述的具有抗动物腹泻功能的饲料由动物联合乳杆菌ZJUIDS
‑
R2单独或与其他菌株混合发酵制备。所述饲料优选为具有预防腹泻功能的草粉(例如为提摩西草草粉)混合物。
[0013]本专利技术所提供的动物联合乳杆菌ZJUIDS
‑
R2(Ligilactobacillus animalis)在动物试验中腹泻预防率达到87.5％(n＝8)。其具有以下能力：(1)具有较强的胆盐水解酶活力；(2)能耐受酸和胆盐，并且具有一定的增殖能力；对常见的抗生素敏感；具有抗菌活性；具有较高的凝集率和疏水性。即，能耐受胃肠道环境、无抗生素耐性、能抑制肠内有害的病原菌，与肠上皮细胞具有较高的亲和力，能阻碍致病菌在肠道的定植的和感染。
[0014]本专利技术从健康宠物兔粪便中分离获得的益生菌中筛选出来具有预防动物腹泻功能的动物联合乳杆菌。该菌株具有较强的胆盐水解酶活力，该菌株在耐酸耐胆盐方面比其他乳酸菌有明显的优势，适合肠胃环境并具有增殖能力。无抗生素耐性，具有抗菌活性。本专利技术中的动物联合乳杆菌可广泛用于开发预防动物腹泻相关益生功能产品。
附图说明
[0015]图1为动物联合乳杆菌ZJUIDS
‑
R2的菌落形态图。
[0016]图2为动物联合乳杆菌ZJUIDS
‑
R2革兰氏染色的菌体形态图(放大倍数100
×
40)。
[0017]图3为动物联合乳杆菌ZJUIDS
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R2的16S rDNA的电泳鉴定图。其中1：ZJUIDS
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R2；N：阴性对照；M：5000bp DNA Marker。条带从上自下分别为100bp，250bp，500bp，750bp，1000bp，2000bp，3000bp，5000bp。
[0018]图4为动物联合乳杆菌ZJUIDS
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R2抗菌活性的平板示例。其中A：ZJUIDS
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R2对大肠杆菌的抗菌活性；B：ZJUIDS
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R2对鼠伤寒沙门氏菌的抗菌活性；C：ZJUIDS
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R2对金黄色葡萄球菌的抗菌活性；D：ZJUIDS
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R2对单核细胞增生李斯特菌的抗菌活性。
[0019]图5为动物联合乳杆菌ZJUIDS
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R2抗生素敏感性的平板示例。其中1：氨苄西林；2：青霉素；3头孢曲松；4：庆大霉素；5：四环素；6：红霉素；7：环丙沙星；8：林可霉素；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株抗动物腹泻动物联合乳杆菌ZJUIDS
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R2，其特征在于，所述动物联合乳杆菌ZJUIDS
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R2(Ligilactobacillus animalis)的保藏号为：CGMCC NO.24560。2.权利要求1所述的动物联合乳杆菌ZJUIDS
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R2在制备预防宠物腹泻产品中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品为具有抗腹泻功能的药品、保健品、宠物饲料或宠物零食。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述药品包括具有抗腹泻功能的活菌制剂和菌液，该活菌制剂中动物联合乳杆菌ZJUIDS

【专利技术属性】
技术研发人员：王华南，李慧敏，任大喜，冷超粮，原依照，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：