一种前白蛋白的纯化方法技术

本发明专利技术提供了一种前白蛋白的纯化方法。本发明专利技术提供的前白蛋白的纯化方法，先从血清中获得前白蛋白粗制品，再进行阴离子交换层析去除大部分杂质蛋白，然后依次经过前白蛋白抗体亲和层析、视黄醇结合蛋白抗体亲和层析和白蛋白抗体亲和层析，获得高纯度的前白蛋白样品。获得高纯度的前白蛋白样品。

【技术实现步骤摘要】
一种前白蛋白的纯化方法


[0001]本专利技术属于蛋白纯化
，具体涉及一种前白蛋白的纯化方法。

技术介绍

[0002]前白蛋白(Prealbumin，PA)又称转甲状腺素蛋白(transthyretin)，是由肝细胞合成的一种血浆蛋白质，具有重要的生物活性。在血浆中，前白蛋白与甲状腺素结合，参与血液中甲状腺激素的运转，也能与视黄醇和视黄醇结合蛋白三者缔合成复合物，参与维生素A的运转和代谢。前白蛋白在维生素A和甲状腺素代谢，蛋白质营养不良和肝脏毒性等方面研究较为广泛。
[0003]与白蛋白和转铁蛋白相比，测定前白蛋白在血浆中的浓度，对于了解蛋白质的营养不良、肝功能不全具有更高的敏感性。现有的方法尽管能够获取前白蛋白，但是生产周期长，操作复杂，在纯化过程中会有大量前白蛋白失去活性，造成前白蛋白有效产率低，且纯度不高，特别是难以去除视黄醇结合蛋白及白蛋白。
[0004]因此，如何能够高效制备满足需要的前白蛋白成为亟待解决的问题。

技术实现思路

[0005]针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的在于提供一种前白蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种前白蛋白的纯化方法，其特征在于，所述纯化方法包括如下步骤：从血清中获得前白蛋白粗制品；将所述前白蛋白粗制品进行阴离子交换层析，收集第一洗脱液；将收集的第一洗脱液进行前白蛋白抗体亲和层析，收集第二洗脱液；将收集的第二洗脱液进行视黄醇结合蛋白抗体亲和层析，收集第一穿透液；将收集的第一穿透液进行白蛋白抗体亲和层析，收集第二穿透液。2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述从血清中获得前白蛋白粗制品包括以下步骤：对所述血清进行过滤处理，收集滤液；利用中性饱和硫酸铵溶液对所述滤液进行透析，之后离心取上清液。3.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述阴离子交换层析的填料配体选自DEAE、ANX或QAE；优选地，所述阴离子交换层析的填料选自DEAE交联纤维素、DEAE交联琼脂糖凝胶、DEAE交联葡聚糖、ANX交联琼脂糖凝胶、ANX交联葡聚糖、QAE交联纤维素、QAE交联琼脂糖凝胶或QAE交联葡聚糖。4.根据权利要求3所述的纯化方法，其特征在于，阴离子交换层析柱选自DEAE
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纤维素层析柱、DEAE
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葡聚糖层析柱、QAE
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纤维素层析柱、Sephadex G
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150或Sephadex G
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200。5.根据权利要求1
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4任一项所述的纯化方法，其特征在于，所述阴离子交换层析包括以下步骤：将所述前白蛋白粗制品加载到阴离子交换层析柱；利用第一洗脱液洗脱所述阴离子交换层析柱，收集第一洗脱液；其中，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟理，晏智，
申请(专利权)人：贵州黔大生态环境与健康研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：