波生坦在制备治疗临床患者止血带疼痛药物方面的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，本发明专利技术公开了波生坦在制备治疗临床患者止血带疼痛药物方面的应用。本发明专利技术还公开了一种验证方法，包括以下过程：动物分组：选取10只的成年雄性野生型C57BL/6J小鼠，小鼠在标准条件下饲养，并提供自由饮水和进食；制备外周血管痛模型：对上述对照组和给药组进行制备外周血管痛模型，将制备成功的小鼠放回笼子里如常饲养；外周血管痛4周时随机选取5只小鼠腹腔注射对照溶剂作为对照组，其余5只腹腔注射波生坦作为给药组；对上述的外周血管痛模型对照组和给药组小鼠实施Von Frey实验。本发明专利技术通过验证结果表明用波生坦阻断ET

【技术实现步骤摘要】
波生坦在制备治疗临床患者止血带疼痛药物方面的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及波生坦在制备治疗临床患者止血带疼痛药物方面的应用。

技术介绍

[0002]止血带通常用于提供一个几乎无血的环境，将手术出血量降到最低，从而有助于全身、局部或区域麻醉下的骨科手术。止血带充气通常与术中和术后疼痛有关。接受了足够的手术区域麻醉的病人仍然会出现术后止血带疼痛。止血带疼痛，通常是指由于止血带的压力过大以及时间较久而导致肢体出现疼痛的反应。在长时间使用止血带后，患者会出现一种局部或远部位的酸、胀和疼痛感，给患者带来种种不适，这种疼痛被不同的患者描述为烧灼痛、痉挛痛、沉重感和麻木感。同时，大多数患者也会出现全身性的情绪反应，诸如冷汗、烦躁不安、躁动、焦虑等精神变化和心血管系统的反应，即使是借助麻醉等药物手段也无法有效缓解患者的心动过速、高血压等不良反应，给后续的治疗和手术的实施造成了巨大的阻力。目前，对于止血带疼痛，在疼痛机制研究方面以及疼痛药物研发上，少有研究报道。

技术实现思路

[0003]专利技术目的：针对现有技术中存在问题或不足，本专利技术提供波生坦在制备治疗临床患者止血带疼痛（绷带痛）药物方面的应用，以解决
技术介绍
中所提出的问题。
[0004]为实现上述专利技术目的，本专利技术的实施例提供波生坦在制备治疗临床患者止血带疼痛（绷带痛）药物方面的应用。
[0005]进一步的，波生坦为ET
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1A型受体/ET
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1B型受体混合拮抗剂。
>[0006]进一步的，所述药物中增加医学上可接受的其他试剂。
[0007]进一步的，所述波生坦为干预药物。
[0008]本专利技术的实施例另外还提出一种非治疗为目的验证波生坦在治疗临床患者止血带疼痛（绷带痛）的方法，其特征在于，包括以下过程：（1）动物分组：选取10只的成年雄性野生型C57BL/6J小鼠，小鼠在标准条件下饲养，并提供自由饮水和进食；随机选取5只小鼠腹腔注射对照溶剂作为对照组，其余5只腹腔注射波生坦作为给药组；（2）制备外周血管痛模型：对步骤（1）的对照组和给药组进行制备外周血管痛模型，将制备成功的小鼠放回笼子里如常饲养；（3）系统给药（腹腔注射）：小鼠外周血管痛4周时随机选取5只小鼠腹腔注射对照溶剂作为对照组，其余5只腹腔注射波生坦作为给药组；（4）对步骤（3）中的溶剂对照组和给药组外周血管痛小鼠实施Von Frey实验。
[0009]进一步的，所述步骤（4）中，包括以下过程：测量造模前机械痛基础值以及造模后4周的机械痛，然后对两组小鼠进行给药，在给药后1、3、24小时测量机械痛；机械痛的测量是
通过小鼠对Von Frey纤毛刺激的缩足阈值来确定的；即把小鼠放在高架金属网上的箱子里，允许他们在里面适应30分钟；然后，用一系列硬度呈对数增长的Von Frey纤毛（0.16、0.40、0.60、1.00和2.00克）来刺激它们的后足；纤毛垂直于小鼠后足的跖面，使用Dixon
’
s up
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down法确定50 %的缩足阈值。
[0010]进一步的，步骤（3）中，给药组：药物干预组小鼠腹腔注射10 mg/kg波生坦，对照组均给予同剂量生理盐水。
[0011]本专利技术的上述技术方案的有益效果如下：（1）、本ET
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1在炎性痛和神经病理性疼痛中发挥一定的作用，通过专利技术人团队研究发现，本专利技术的首次发现ET
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1一种非选择性的内皮素受体拮抗剂即波生坦有缓解临床患者止血带疼痛（绷带痛）的作用。止血带疼痛（绷带痛）是血管痛的一种表现形式，本专利技术也验证了在外周血管痛动物模型中，波生坦有一定的治疗血管痛的作用。
[0012]（2）、本专利技术采用一种拮抗剂阻断内皮素（ET
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1）信号通路，具体涉及一种非选择性的内皮素受体拮抗剂即波生坦，选取徐州医科大学附属医院全麻下接受单侧全膝关节置换术的89名患者作为研究对象，分两组给予波生坦和安慰剂治疗。止血带疼痛（绷带痛）是一种血管痛，通过结扎小鼠后腿浅层血管来建立外周血管痛模型，然后采用药理学方法来验证波生坦在外周血管痛中的作用。结果表明用波生坦阻断ET
‑
1通路有利于血带疼痛（绷带痛）的治疗。
附图说明
[0013]图1为本专利技术的实施例中腹腔注射波生坦缓解外周血管痛小鼠的机械痛敏图。
[0014]图2为本专利技术的实施例中阻断ET
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1信号可改善临床患者的止血带疼痛图。
具体实施方式
[0015]为使本专利技术要解决的技术问题、技术方案和优点更加清楚，下面将结合具体实施例进行详细描述。
[0016]本专利技术采用以下的技术方案：实施例1、动物实验（1）动物分组：选取10只的成年雄性野生型（WT）C57BL/6J小鼠，小鼠（2~5只/笼）在标准条件下饲养（21~24 ℃，60 %湿度，12:12
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h光照/黑暗周期），并提供自由饮水和进食。随机选取5只小鼠腹腔注射对照溶剂作为对照组，其余5只腹腔注射波生坦作为给药组。在此步骤中，并不进行注射对照溶剂与腹腔注射波生坦，仅做分组。
[0017]（2）外周血管痛模型制备：对步骤（1）中的给药组及对照组均进行外周血管痛模型制备，制备过程如下：用1 %戊巴比妥钠（100 mg/kg，腹腔注射）麻醉小鼠后，剃除左后肢大腿内侧的毛发，将小鼠置于仰卧位，此时通过皮肤能够清楚地看到大隐静脉和隐动脉；常规消毒后，用眼科剪刀沿血管内侧约0.5厘米和胫骨的一半做一个约0.5厘米的纵向切口；在手术显微镜下可看到大隐静脉（内侧）和其伴随的隐动脉及隐神经（外侧），用眼科剪的尖端把动静脉和神经之间的黏膜小心地分离开，然后用6
‑
0线把动脉和静脉完全结扎，作为外周血管痛模型组；缝合皮肤；术后把动物放在电热毯上恢复，随后把他们放回笼子里如常饲养。
[0018]（3）系统给药（腹腔注射）：采用步骤（2）制备的10只外周血管痛模型小鼠进行系统给药，在外周血管痛小鼠4周时，对给药组和对照组分别进行腹腔给药波生坦以及溶剂对照。左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴，另外三个手指抓住小鼠的颈部和背部皮肤，右手持1 ml注射器，将针头刺入腹白线稍左侧或稍右侧皮下。针头到达皮下后，再向前推进3
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5 mm左右，接着使注射器针头与皮肤呈45
ꢀ°
刺入腹腔，此时有落空感。随后固定针头，保持针尖不动，回抽针栓，如无回流物即可缓慢注射药液。动物模型波生坦给药方法：本专利技术中主要干预药物“波生坦”为提纯化学试剂，由Sigma公司提供。专利技术研究结果表明，波生坦是ET
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1A型受体/ET
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1B型受体混合拮抗剂，是一种可用于治疗肺动脉高压的药物。本部分中应用“波生坦”预防性干预外周血管痛动物模型，观察“波生坦”的对于外周血管的改善效应。给药方法：药物干预组小鼠腹腔注射10 mg/kg波生坦，对照组均给予同剂量生理盐水本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.波生坦在制备治疗临床患者止血带疼痛药物方面的应用。2.根据权利要求1所述的波生坦在制备治疗临床患者止血带疼痛药物方面的应用，其特征在于，波生坦为ET
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1A型受体/ET
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1B型受体混合拮抗剂。3.根据权利要求1所述的波生坦在制备治疗临床患者止血带疼痛药物方面的应用，其特征在于，所述药物中增加医学上可接受的其他试剂。4.根据权利要求1所述的波生坦在制备治疗临床患者止血带疼痛药物方面的应用，其特征在于，所述波生坦为干预药物，所述波生坦通过阻断ET
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1通路来治疗止血带疼痛。5.一种非治疗为目的验证波生坦在治疗临床患者止血带疼痛的方法，其特征在于，包括以下过程：（1）动物分组：选取10只的成年雄性野生型C57BL/6J小鼠，小鼠在标准条件下饲养，并提供自由饮水和进食，随机选取5只小鼠作为对照组，其余5只作为给药组；（2）制备外周血管痛模型：对步骤（1）的对照组和给药组进行制备外周血管痛模型，将制备成功的小鼠放回笼子里如常饲养；（3）系统给药（腹腔注射）：小鼠外周血管痛4周时，对所选取5只对照...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘兴君，刘苏，李清怡，
申请(专利权)人：南通大学，
类型：发明
国别省市：