一种哈维氏弧菌感染的生物标志物制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，公开了一种哈维氏弧菌感染的生物标志物，具体公开了一种哈维氏弧菌感染的生物标志物，所述生物标志物包括氨基肽酶、钙转运ATP酶、组蛋白H2B和组蛋白H2A中的至少一种。本发明专利技术在感染哈维氏弧菌的病鱼的细菌感染特征中，对海洋硬骨鱼半滑舌鳎粘液中的DEPs进行了鉴定和开发，并进过qRT

【技术实现步骤摘要】
一种哈维氏弧菌感染的生物标志物


[0001]本专利技术属生物
，具体涉及一种哈维氏弧菌感染的生物标志物。

技术介绍

[0002]粘液是抵抗不利环境的第一道天然屏障，与外部因素直接接触，在逆境阶段，粘液中分子成分的改变将为评估病理状态和过程提供一个指示性标准。同时，粘液是一种友好的样本类型，极易获得，几乎不会对宿主造成损害。粘液是一种来源于鱼体最大的组织—皮肤的外分泌体液，它含有多种特定的蛋白质和代谢物，这些蛋白质和代谢物具有特定的功能特征，这些功能特征具体描述了生物体的生理状态，这使得它在无创诊断和生理状态检测方面具有天然优势。
[0003]感染哈维氏弧菌的半滑弧菌的腐烂尾巴、皮肤溃疡和鳞片脱落都反映了皮肤粘膜屏障的破坏，因此感染哈维氏弧菌容易导致海鱼养殖业出现严重损失。作为第一道防线，鱼类表皮粘液富含多种蛋白质和多糖，包括许多免疫相关分子，如免疫球蛋白、C3、肌动蛋白、凝集素、组蛋白、溶菌酶、粘蛋白、热休克分子、超氧化物歧化酶和转铁蛋白。研究了鱼类皮肤粘液的组成及其在不同条件下的相对变化。现研究表明，在感染方面，当面临细菌或寄生虫入侵时，如黄鲶(Pelteobagrus fulvidraco)、褐斑石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus)、大西洋鳕鱼(Gadus morhua)、金枪鱼(Sparus aurata)、大安伯杰克(Seriola dumerili)和鲤鱼(Cyprinus carpio)等鱼类皮肤粘液的蛋白质组学图谱将发生改变；当用某些益生菌或昆虫幼虫喂养鱼类时，也观察到皮肤粘液中免疫蛋白的显著变化；正(有利)或负(不利)刺激干扰宿主皮肤粘液系统的稳态，导致部分硬骨鱼的外观表型、基因表达水平、酶活性和蛋白质组学特征发生不同程度的变化。上述研究表明皮肤粘液与鱼类的免疫和感染存在着密切相关。
[0004]蛋白质组研究经历了二维电泳、无标记LC/MS
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MS、相对和绝对定量的等压标签(iTRAQ)和TMT从低通量和分辨率到高通量定量蛋白质组筛选的过程。其中iTRAQ分析是一种广泛应用的高通量技术，用于蛋白质组研究，适用于细胞质蛋白、膜蛋白和核蛋白。iTRAQ测序侧重于组间常见蛋白质的相对表达丰度，而不考虑特定组中呈现的特定类型的蛋白质。目前的鱼类感染检测方法主要是针对病原体的微生物学、免疫学和分子技术，而硬骨鱼中很少报告生物标记物指示疾病的相关技术。在人类中，C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、血清淀粉样蛋白A(SAA)和白细胞介素(IL)
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6都是指示炎症和感染的常见生物标记物，其浓度被认为与炎症的程度和模式有关。然而，到目前为止，在鱼类中还没有这样的生物标记物。

技术实现思路

[0005]本专利技术第一方面的目的，在于提供一种哈维氏弧菌感染的生物标志物。
[0006]本专利技术第二方面的目的，在于提供检测本专利技术第一方面的生物标志物表达量的试剂在制备细菌感染检测试剂盒中的应用。
[0007]本专利技术第三方面的目的，在于提供检测本专利技术第一方面生物标志物表达量的试剂在制备细菌感染预测制剂中的应用。
[0008]本专利技术第四方面的目的，在于提供一种试剂盒。
[0009]本专利技术第五方面的目的，在于提供本专利技术第四方面的试剂盒的使用方法。
[0010]本专利技术第六方面的目的，在于提供一种用于检测鱼类哈维氏弧菌感染的检测装置。
[0011]本专利技术第七方面的目的，在于提供一种用于检测鱼类哈维氏弧菌感染的检测系统。
[0012]为了实现上述目的，本专利技术所采取的技术方案是：
[0013]本专利技术的第一个方面，提供一种哈维氏弧菌感染的生物标志物，所述生物标志物包括氨基肽酶、钙转运ATP酶、组蛋白H2B和组蛋白H2A中的至少一种。
[0014]优选地，所述生物标志物为氨基肽酶。
[0015]本专利技术的第二个方面，提供检测本专利技术第一方面的生物标志物表达量的试剂在制备细菌感染检测试剂盒中的应用。
[0016]优选地，所述试剂包括在基因或蛋白水平上检测生物标志物的试剂。
[0017]优选地，所述在基因水平上检测生物标志物的试剂包括通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术或免疫测定的方法检测标志物基因表达水平的试剂。
[0018]优选地，所述在蛋白水平上检测生物标志物的试剂包括免疫组化、蛋白免疫印迹、酶联免疫吸附(ELISA)、流式细胞术、化学发光、电化学、紫外分光光度法
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近红外光谱法、液相芯片法、高效液相色谱法、比色法或质谱鉴定的方法检测蛋白表达水平的试剂。
[0019]优选地，所述细菌为哈维氏弧菌。
[0020]本专利技术的第三个方面，提供检测本专利技术第一方面的生物标志物表达量的试剂在制备细菌感染预测制剂中的应用。
[0021]优选地，所述试剂包括在基因或蛋白水平上检测生物标志物的试剂。
[0022]优选地，所述在基因水平上检测生物标志物的试剂包括通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术或免疫测定的方法检测标志物基因表达水平的试剂。
[0023]优选地，所述在蛋白水平上检测生物标志物的试剂包括免疫组化、蛋白免疫印迹、酶联免疫吸附(ELISA)、流式细胞术、化学发光、电化学、紫外分光光度法
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近红外光谱法、液相芯片法、高效液相色谱法、比色法或质谱鉴定的方法检测蛋白表达水平的试剂。
[0024]优选地，所述细菌为哈维氏弧菌。
[0025]本专利技术的第四个方面，提供一种试剂盒，包括检测本专利技术第一方面的生物标志物的表达水平的试剂。
[0026]优选地，所述试剂包括在基因或蛋白水平上检测生物标志物的试剂。
[0027]优选地，所述试剂盒包括生化诊断试剂盒、免疫诊断试剂盒、或分子诊断试剂盒中的一种或多种。
[0028]优选地，所述试剂盒为免疫诊断试剂盒。
[0029]优选地，所述试剂盒包括Western印迹试剂盒、酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒、放射免疫测定(RIA)试剂盒、放射免疫扩散试剂盒、ouchterlony免疫扩散试剂盒、火箭免疫电泳试剂盒、免疫组织化学染色试剂盒、免疫沉淀测定试剂盒、补体结合测定试剂盒、荧光
激活细胞分选(FACS)试剂盒、适体芯片试剂盒、微阵列试剂盒、蛋白质芯片试剂盒中的一种或多种。
[0030]本专利技术的第五个方面，提供本专利技术第四方面的试剂盒的使用方法，以下步骤：采集待测样品，检测所述样品中生物标志物的表达水平。
[0031]优选地，所述样品为鱼类皮肤粘液。
[0032]本专利技术的第六个方面，提供一种用于检测鱼类哈维氏弧菌感染的检测装置，所述检测装置包括用于检测本专利技术第一方面的生物标志物表达量的试剂。
[0033]优选地，所述鱼类为硬骨鱼；进一步为半滑舌鳎。
[0034]本专利技术的第七个方面，提供一种用于检测鱼类哈维氏弧菌感染的检测系统，所述检测系统包括用于检测本专利技术第一方面的生物标志物表达量的试剂。<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种哈维氏弧菌感染的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物包括氨基肽酶、钙转运ATP酶、组蛋白H2B和组蛋白H2A中的至少一种。2.检测权利要求1所述的生物标志物表达量的试剂在制备细菌感染检测试剂盒中的应用。3.检测权利要求1所述的生物标志物表达量的试剂在制备细菌感染预测制剂中的应用。4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述试剂包括在基因或蛋白水平上检测生物标志物的试剂。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述细菌为哈维氏弧菌。6.一种试剂盒，包括检测权...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵娜，张博，朱春华，黄洋，王秋梅，邓秋霞，茹笑影，朱旭枫，胡琴，
申请(专利权)人：南方海洋科学与工程广东省实验室湛江，
类型：发明
国别省市：