本发明专利技术属于外泌体提取技术领域，具体涉及一种外泌体提取装置及提取方法。所述提取装置包括离心管、过滤组件和管盖，所述管盖盖合在所述离心管管口处，所述过滤组件包括多个过滤板、多个弹性套、转动连接部件和提杆，所述过滤板和多个所述弹性套用于截留外泌体，多个所述过滤板呈之字形排列，且相邻的过滤板之间或者相邻的弹性套之间通过转动连接部件连接，所述提杆贯穿所述过滤板以及所述管盖设置，且可上下活动，所述提杆还通过限位装置限位在管盖上。本发明专利技术的外泌体提取装置及提取方法可实现外泌体的快速提取，节约了时间消耗，也相应的节约了人力消耗，节能环保。节能环保。节能环保。
【技术实现步骤摘要】
一种外泌体提取装置及提取方法
[0001]本专利技术属于外泌体提取
，具体涉及一种外泌体提取装置及提取方法。
技术介绍
[0002]外泌体(Exosome)是由活细胞分泌的直径约为30
‑
150nm的小囊泡，具有典型的脂质双分子层结构；存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中；外泌体携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息，不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用，更有望成为多种疾病的早期诊断标志物，具有很好的临床应用前景。
[0003]常见的外泌体提取方法是离心方法、亲和层析分离法、凝胶排阻方法、免疫磁珠法等，其中离心方法由于消耗的设备成本低，所以是最常见的方法。外泌体的离心提取方法包括密度梯度离心、超速离心、过滤离心等，利用细胞分泌物中不同物质的分子量不同的特点，在特定的离心转速下将外泌体离心并收集出来，然而离心的方法需要经过复杂的样品处理步骤，以及对外泌体的处理步骤，所以总体上耗时较长，因此，寻找一种快速简单的外泌体提取方法一直是本领域技术人员追求的目标。
[0004]YEASEN外泌体快速抽提试剂盒是一种较快的外泌体提取试剂，其将收集的细胞上清液先经过3000g左右的离心，去除大的细胞碎片，然后收集上清并利用特殊的外泌体抽提试剂进行处理，然后再经过10000g左右的高速离心，使外泌体沉淀，最后利用PBS重悬，在12000g离心，收集含外泌体的上清。该试剂盒由于开发的特殊配方的抽提试剂，大大缩短的外泌体的总提取时间，提高了提取效率，该方法适用于血清、细胞培养液等样本中外泌体的提取，即适用范围广。该试剂盒仅仅是对提取试剂的改进，在进行离心操作时，采用的主要装置仍然为离心管以及与离心管配套使用的离心机，试剂盒使用方法要求“经过10000g左右的离心1h，然后吸走上清，收集外泌体沉淀”，然而外泌体的直径很小，不容易沉淀，所以仍然需要消耗较长的离心时间。
[0005]综上，所述需要开发一种可减少离心时间的提取装置，以配套YEASEN外泌体快速抽提试剂盒，从而进一步提高外泌体的提取效率。
技术实现思路
[0006]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种外泌体提取装置及提取方法，所述装置可以配套YEASEN外泌体快速抽提试剂盒的使用，实现了外泌体的快速提取，节约了时间消耗，也相应的节约了人力消耗，节能环保。
[0007]本专利技术的目的是提供一种外泌体提取装置，包括离心管和管盖，所述管盖盖合在所述离心管的管口处，还包括过滤组件，所述过滤组件包括多个过滤板、多个弹性套、转动连接部件和提杆，所述过滤板和多个所述弹性套用于截留外泌体，多个所述过滤板呈之字形排列，且相邻的所述过滤板之间或者相邻的所述弹性套之间通过转动连接部件连接，所述提杆的一端连接在位于最底层的所述过滤板上，另一端向上延伸并贯穿其余所有的所述
过滤板，且所述提杆可沿贯穿处上下活动，所述提杆的顶端还能贯穿所述管盖，并通过限位装置限位在所述管盖上。
[0008]优选的，上述外泌体提取装置，所述过滤板采用硬质材料制备；或者，所述过滤板采用软质材料制备，先用硬质环将所述过滤板的外周固定，然后在每个所述硬质环的外周对应套设有一个所述弹性套。
[0009]优选的，上述外泌体提取装置，所述转动连接部件为合页、转轴、铰链或者弹力带。
[0010]优选的，上述外泌体提取装置，所述限位装置为夹子结构或者固定套结构，所述固定套结构包括两个半圆形套，所述两个半圆形套的一端转动连接，另一端可拆卸连接，其中一个所述半圆形套固定在所述管盖顶部，所述提杆贯穿两个所述半圆形套之间，且两个所述半圆形套拼接并闭合后，能将所述提杆固定。
[0011]优选的，上述外泌体提取装置，所述提杆的位于顶部的所述过滤板上方的部分为可卷曲条。
[0012]优选的，上述外泌体提取装置，相邻的所述过滤板之间通过弹簧连接。
[0013]优选的，上述外泌体提取装置，每个所述过滤板上均开设有贯穿所述提杆的贯穿孔，相邻所述过滤板的所述贯穿孔之间通过柔性的防水套连接，相邻的所述防水套之间是连通的，所述提杆贯穿所有的所述防水套设置。
[0014]优选的，上述外泌体提取装置，还包括安装套，所述安装套套设在最顶层的所述过滤板的外部，所述安装套侧边安装在所述离心管管口处，所述管盖安装在所述安装套上。
[0015]优选的，上述外泌体提取装置，所述过滤板包括用于截留外泌体的底层过滤层和用于截留细胞碎片的顶层过滤层，所述顶层过滤层的边缘可拆卸插接在所述底层过滤层上，所述弹性套套设于所述顶层过滤层外部，并且套设在所述底层过滤层外周；相邻的所述底层过滤层与所述顶层过滤层之间通过所述转动连接部件连接，或者相邻的所述弹性套通过所述转动连接部件连接。
[0016]本专利技术还提供了一种外泌体提取方法，包括以下步骤：
[0017]第一步：采集样本，制备含有外泌体的上清液；
[0018]第二步：将所述上清液与外泌体提取试剂加入离心管中，混合均匀，然后将所述过滤组件放入所述离心管中，盖好所述管盖，打开所述限位装置，向下移动所述提杆，使所述过滤组件展开，然后利用所述限位装置固定好所述提杆，静置；
[0019]第三步：静置结束后，开启所述限位装置，将所述提杆向上移动，并使所述过滤组件压缩，离心；
[0020]第四步：离心结束后，将所述过滤组件移出所述离心管，然后回收所述过滤组件上的外泌体。
[0021]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0022]1、本专利技术的离心管与离心机配套使用，过滤组件用于截留外泌体，其上的外泌体可以被PBS等试剂重悬，管盖盖合在离心管的管口处，用于阻止离心管内的液体流出。
[0023]2、本专利技术中，过滤组件的作用是在离心的时候截留外泌体，则外泌体可以沉淀在就近的过滤板上，无需沉淀至距离较远的离心管内底部，缩短外泌体的离心所需沉淀时间，节能环保。可设置好提取试剂的体积以及含有外泌体的上清液的体积，使得过滤组件展开时浸入溶液中，压缩时离开液面，则离心的时间和转速只需要满足能将过滤组件中的水沥
掉即可，可大大缩短离心时间。
[0024]3、本专利技术中，弹性套的一个作用是固定过滤板，防止其脱落，另一作用是与提杆等部件配合使用，对过滤板进行限位，防止过滤板在离心的过程中上下浮动；防水套的作用是防止外泌体从提杆与过滤板之间的间隙向下流动；安装套以及限位装置的作用是防止在离心过程中提杆与管盖脱离；弹簧的作用是维持过滤组件的展开结构；双层结构的过滤板的作用是对细胞碎片进行隔离，收集的大部分外泌体位于底层过滤层与顶层过滤层之间的空间，进一步节省了外泌体提取时间。
附图说明
[0025]图1为本专利技术实施例1的外泌体提取装置的结构透视图一；
[0026]图2为本专利技术实施例1的外泌体提取装置的结构透视图二；
[0027]图3为本专利技术实施例1的管盖与限位装置的连接结构俯视图；
[0028]图4为本专利技术实本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种外泌体提取装置，包括离心管(1)和管盖(3)，所述管盖(3)盖合在所述离心管(1)的管口处，其特征在于，还包括过滤组件(2)，所述过滤组件(2)包括多个过滤板(21)、多个弹性套(22)、转动连接部件和提杆(23)，所述过滤板(21)和多个所述弹性套(22)用于截留外泌体，多个所述过滤板(21)呈之字形排列，且相邻的所述过滤板(21)之间或者相邻的所述弹性套(22)之间通过转动连接部件连接，所述提杆(23)的一端连接在最底层的所述过滤板(21)上，另一端向上延伸并贯穿其余的所述过滤板(21)，且所述提杆(23)可沿贯穿处上下活动，所述提杆(23)的顶端还能贯穿所述管盖(3)，并通过限位装置(4)限位在所述管盖(3)上。2.根据权利要求1所述的一种外泌体提取装置，其特征在于，所述过滤板(21)采用硬质材料制备；或者，所述过滤板(21)采用软质材料制备，所述过滤板(21)的外周固定有硬质环，每个所述硬质环的外周对应套设有一个所述弹性套(22)。3.根据权利要求2所述的一种外泌体提取装置，其特征在于，所述转动连接部件为合页、转轴、铰链或者弹力带。4.根据权利要求2所述的一种外泌体提取装置，其特征在于，所述限位装置(4)为夹子结构或者固定套结构，所述固定套结构包括两个半圆形套(41)，所述两个半圆形套(41)的一端转动连接，另一端可拆卸连接，其中一个所述半圆形套(41)固定在所述管盖(3)顶部，所述提杆(23)贯穿两个所述半圆形套(41)之间，且两个所述半圆形套(41)拼接并闭合后，能将所述提杆(23)固定。5.根据权利要求4所述的一种外泌体提取装置，其特征在于，所述提杆(23)的位于顶部的所述过滤板(21)上方的部分为可卷曲条。6.根据权利要求2所述的一种外泌体提取装置，其特征在于，相邻的所述过滤板(21)之间通过弹簧(212)连接。7...
【专利技术属性】
技术研发人员：王艳歌，肖二卫，王刚，李苗，宋宗明，陶冶，王娇娇，张贝贝，史平玲，魏圆梦，
申请(专利权)人：河南省人民医院，
类型：发明
国别省市：
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