一种多肽及其设计方法和在制备抑制具核梭杆菌产品或预防结直肠癌药物中的应用技术

本发明专利技术公开了一种多肽及其设计方法和在制备抑制具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum，简称F.nucleatum)产品或预防结直肠癌药物中的应用，涉及多肽领域。多肽包括有疏水基氨基酸和带电荷氨基酸，所述多肽的氨基酸序列分布为对称性结构。本申请获得的多肽以天然氨基酸残基为基本成分，具有固有的生物相容性和生物降解性，可以特异性杀灭F.nucleatum，而对其他细菌具有较低的抗菌活性，不具有抗生素杀灭正常菌群的副作用。因此，多肽可以用来长期限制体内F.nucleatum的载量，进而实现对多种F.nucleatum相关疾病的治疗和预防；同时具有杀菌速率快、无残留、无污染、分子组成高度灵活、免疫原性低等优点。免疫原性低等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种多肽及其设计方法和在制备抑制具核梭杆菌产品或预防结直肠癌药物中的应用


[0001]本专利技术涉及多肽领域，尤其涉及一种多肽及其设计方法和在制备抑制具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum，简称F.nucleatum)产品或预防结直肠癌药物中的应用。

技术介绍

[0002]F.nucleatum主要存在于人类口腔中，是一种人类的有害共栖菌，直接参与急、慢性牙周炎、牙龈炎、根管感染等口腔疾病。F.nucleatum还被发现与一系列疾病相关，包括结直肠癌、炎症性肠病、阑尾炎等肠道疾病，以及呼吸道感染、不良妊娠后果、心血管疾病、脑动脉瘤、类风湿性关节炎，阿兹海默症等疾病。
[0003]虽然F.nucleatum可被广谱抗生素杀灭，急性F.nucleatum感染可被抗生素治愈，但是抗生素具有杀灭正常菌群的副作用，因此不能长期使用。一旦停用抗生素，F.nucleatum作为人类的共栖菌，极易在人类体内重新恢复到一个较高的载量，进而增加急、慢性感染复发的风险，以及促进上述F.nucleatum相关疾病的发生发展。
[0004]因此，急需对人体正常菌群无害、可以杀灭F.nucleatum的制剂，用以长期限制体内F.nucleatum的载量，进而实现对上述多种疾病的治疗和预防。

技术实现思路

[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术针对F.nucleatum，提供了一种氨基酸序列呈对称性分布、且包含疏水性氨基酸和带电荷氨基酸的多肽。所述多肽中的一些版本对F.nucleatum具有抗菌活性，其中的一些版本更是具有针对F.nucleatum的特异性杀菌作用。由于所述多肽针对F.nucleatum的特异性杀菌作用，且不会杀伤宿主正常菌群，所述多肽可被用于降低宿主体内的F.nucleatum载量，从而治疗或长期预防F.nucleatum相关疾病。
[0006]本专利技术目的之一：提供了一种多肽，所述多肽包括有疏水基氨基酸和带电荷氨基酸，所述多肽的氨基酸序列分布为对称性结构。
[0007]作为优选方案，所述多肽的氨基酸序列呈对称性分布在以脯氨酸和甘氨酸为中心的两侧，脯氨酸和甘氨酸提供β
‑
转角，使多肽获得β
‑
折叠结构。
[0008]作为优选方案，所述多肽的总电荷区间为0至+8。
[0009]作为优选方案，所述带电荷氨基酸包括带正电荷氨基酸和/或带负电荷氨基酸，所述带负电荷氨基酸为谷氨酸和/或天冬氨酸，所述带正电荷氨基酸为组氨酸、赖氨酸和精氨酸中的至少一种。
[0010]作为优选方案，相邻两个带同种电荷的带电荷氨基酸间隔排列设置有一个及以上带不同或不带电荷的氨基酸。
[0011]作为优选方案，所述疏水性氨基酸为色氨酸。
[0012]作为优选方案，所述疏水性氨基酸比例区间为40％
‑
50％。
[0013]作为优选方案，所述多肽的总长度区间为10至20个氨基酸。
[0014]作为优选方案，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11或SEQ ID NO.12所示。
[0015]本专利技术目的之二：一种多肽的设计方法，包括以下步骤：
[0016](1)固定疏水基氨基酸的种类和含量，设计氨基酸分布为对称性结构，挑选带电荷氨基酸的种类和含量；
[0017](2)采用固相化学合成法通过多肽合成仪获得肽树脂，再经过TFA切割后，获得多肽。
[0018]本专利技术目的之三：一种多肽在制备抑制具核梭杆菌产品或预防结直肠癌药物中的应用。
[0019]作为优选方案，所述多肽包括氨基酸序列如SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示中的一种或多种多肽，其对具核梭杆菌具有抑菌的作用，杀菌机制是通过破坏F.nucleatum的细胞壁实现的。
[0020]作为优选方案，所述多肽包括氨基酸序列如SEQ ID NO.8和/或SEQ ID NO.11所示的多肽，其具有针对F.nucleatum的特异性抗菌活性，即对除F.nucleatum之外的测试菌不具有或只具有较低的抗菌活性。
[0021]作为优选方案，当所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.11所示时，所述多肽的用药剂量为20mg/kg，用药对象为小鼠。
[0022]相比于现有技术，本专利技术实施例具有如下有益效果：
[0023]目前在临床实践中，针对F.nucleatum感染的治疗主要依靠抗生素。然而，抗生素具有杀灭正常菌群的副作用，因此不能长期使用。一旦停用抗生素，F.nucleatum作为人类的共栖菌，极易在人类体内重新恢复到一个较高的载量，进而增加急、慢性感染复发的风险，以及促进各种F.nucleatum相关疾病的发生发展。本专利技术针对F.nucleatum，提供了一种多肽，可以特异性杀灭F.nucleatum，而对其他细菌具有较低的抗菌活性，不具有抗生素杀灭正常菌群的副作用。因此，所述多肽可以用来长期限制体内F.nucleatum的载量，进而实现对多种F.nucleatum相关疾病的治疗和预防。
附图说明
[0024]图1：为本专利技术实施例一中获得多肽P1的电喷雾质谱结果；
[0025]图2：为本专利技术实施例一中获得多肽P2的电喷雾质谱结果；
[0026]图3：为本专利技术实施例一中获得多肽P3的电喷雾质谱结果；
[0027]图4：为本专利技术实施例一中获得多肽P4的电喷雾质谱结果；
[0028]图5：为本专利技术实施例一中获得多肽P5的电喷雾质谱结果；
[0029]图6：为本专利技术实施例一中获得多肽P6的电喷雾质谱结果；
[0030]图7：为本专利技术实施例一中获得多肽P7的电喷雾质谱结果；
[0031]图8：为本专利技术实施例一中获得多肽P8的电喷雾质谱结果；
[0032]图9：为本专利技术实施例一中获得多肽P9的电喷雾质谱结果；
[0033]图10：为本专利技术实施例一中获得多肽P10的电喷雾质谱结果；
[0034]图11：为本专利技术实施例一中获得多肽P11的电喷雾质谱结果；
[0035]图12：为本专利技术实施例一中获得多肽P12的电喷雾质谱结果；
[0036]图13：为本专利技术抗菌肽P1的化学分子式结构；
[0037]图14：为本专利技术抗菌肽P2的化学分子式结构；
[0038]图15：为本专利技术抗菌肽P3的化学分子式结构；
[0039]图16：为本专利技术抗菌肽P4的化学分子式结构；
[0040]图17：为本专利技术抗菌肽P本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽，其特征在于，所述多肽包括有疏水基氨基酸和带电荷氨基酸，所述多肽的氨基酸序列分布为对称性结构。2.如权利要求1所述的一种多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列呈对称性分布在以脯氨酸和甘氨酸为中心的两侧，所述脯氨酸和甘氨酸提供β
‑
转角，使多肽获得β
‑
折叠结构。3.如权利要求1所述的一种多肽，其特征在于，所述多肽的总电荷区间为0至+8。4.如权利要求3所述的一种多肽，其特征在于，所述带电荷氨基酸包括带正电荷氨基酸和/或带负电荷氨基酸，所述带负电荷氨基酸为谷氨酸和/或天冬氨酸，所述带正电荷氨基酸为组氨酸、赖氨酸和精氨酸中的至少一种，相邻两个带同种电荷的带电荷氨基酸间隔排列设置有一个及以上带不同或不带电荷的氨基酸。5.如权利要求1所述的一种多肽，其特征在于，所述疏水基氨基酸比例区间为40％
‑
50％，所述疏水基氨基酸为色氨酸。6.如权利要求1所述的一种多肽，其特征在于，所述多肽的总长度区间为10
‑
20个氨基酸。7.如权利要求1
‑
6任一所述的一种多肽，其特征在于，所述多肽的氨基...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵文婧，丑淑丽，牟相宇，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：