一种维生素K1滴剂有关物质的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种维生素K1滴剂有关物质的测定方法，采用高效液相色谱法测定，其色谱条件为：色谱柱：硅胶填充柱；流动相：以体积比为1000∶1

【技术实现步骤摘要】
一种维生素K1滴剂有关物质的测定方法
[0001]

[0002]本专利技术涉及色谱分析
，具体涉及一种维生素K1滴剂有关物质的测定方法。

技术介绍

[0003]维生素K1化学名为2
‑
甲基
‑3‑
叶绿基
‑
1,4
‑
萘醌，简称叶绿醌，是顺式和反式异构体的混合物。《中国药典》2020年版二部中规定，维生素K1原料药中顺式异构体按面积归一化法来计算不得过21.0%。说明该原料药中，真正其作用的为反式异构体，而顺式异构体是作为杂质来控制其含量的。该药典方法采用石油醚
‑
正戊醇（2000:2.5）作为流动相，利用硅胶色谱柱作为分离通道，其方法重现性差，如果实验条件掌握不好就会导致两个异构体分离度达不到要求。而且该实验方法仅仅能控制顺式异构体，并不能有效的检测出杂质C和其他未知杂质。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种维生素K1滴剂有关物质的测定方法，能够准确有效的测定现有技术难以分离的维生素K1顺式异构体和维生素K1反式异构体。
[0005]所述的维生素K1滴剂有关物质的测定方法，采用高效液相色谱法测定，其色谱条件为：色谱柱：硅胶填充柱；流动相：以体积比为1000∶1
‑
3∶0.1
‑
0.5的正己烷
‑
正辛醇
‑
甲基叔丁基醚溶液为流动相A，以体积比为92
‑
100∶2
‑
5的正己烷r/>‑
正辛醇溶液为流动相B；采用梯度洗脱方式；检测波长：240
‑
260nm；流速为0.6～1.5毫升/分。
[0006]优选的，所述的梯度洗脱的方式为：时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0100015100035604050604050.11000801000
[0007]优选的，所述的色谱条件为：流动相：甲醇
‑
水体积百分比96
‑
100:1
‑
3；以体积比为1000∶1.4∶0.2的正己烷
‑
正辛醇
‑
甲基叔丁基醚溶液为流动相A，以体积比为96∶4的正己烷
‑
正辛醇溶液为流动相B；
检测波长：254nm；流速为0.6～1.5毫升/分。
[0008]优选的，所述的色谱条件中，检测器采用二极管阵列检测器。
[0009]优选的，所述的高效液相测定时，检测时间为45
‑
120分钟。
[0010]优选的，所述的高效液相测定时，柱温控制在25
‑
40℃。
[0011]优选的，所述的色谱柱为100
‑5‑
silica，250mm
×
4.6mm。
[0012]所述的高效液相测定时，供试品溶液的制备包括以下步骤：取维生素K1滴剂胶囊10粒，将内容物倾入100ml量瓶中，囊壳用正己烷分次洗涤，洗液并入量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀。
[0013]所述的高效液相测定时，对照品溶液的制备包括以下步骤：对照品溶液制备：取维生素K1对照品适量，精密称定，加正己烷溶解制备成浓度为1.0mg/ml的维生素K1标准储备液，然后用体积比为1∶9的中链甘油三酸酯
‑
正己烷溶液定量稀释配制配制成0.05μg/mL的对照品溶液。
[0014]本专利技术的有益效果如下：本专利技术采用了独特组成的流动相A和流动相B组合进行梯度洗脱，使得两个异构体得到很好的分离，并且能有效的检出杂质C和其他未知杂质，为该产品的质量可靠性、稳定性和安全行提供了保障与技术支持。
附图说明
[0015]图1为维生素K1顺式异构体定位图；图2有关物质系统适用性图谱图3为维生素K1滴剂（胶囊型）有关物质线性回归图；图4为对照品溶液色谱图；图5为本专利技术有关物质供试品溶液色谱图；图6药典方法色谱图；图7本专利技术有关物质供试品溶液色谱图。
具体实施方式
[0016]实施例11、供试品溶液的制备：取维生素K1滴剂胶囊10粒，将内容物倾入100ml量瓶中，囊壳用正己烷分次洗涤，洗液并入量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀。
[0017]维生素K1对照品溶液的制备：2、对照品溶液制备：取维生素K1对照品适量，精密称定，加正己烷溶解制备成浓度为1.0mg/ml的维生素K1标准储备液，然后用体积比为1∶9的中链甘油三酸酯
‑
正己烷溶液定量稀释配制配制成0.05μg/mL的对照品溶液。
[0018]3、采用高效液相色谱法进行测定，进样量为80 μl，高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：100
‑5‑
silica，250mm
×
4.6mm；
流动相：以体积比为1000∶1∶0.1的正己烷
‑
正辛醇
‑
甲基叔丁基醚溶液为流动相A，以体积比为92∶2的正己烷
‑
正辛醇溶液为流动相B；采用梯度洗脱方式；检测波长：240nm；流速为0.6毫升/分；检测器：采用二极管阵列检测器。
[0019]检测时间：120分钟。
[0020]柱温：25℃；梯度洗脱的方式为：时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0100015100035604050604050.11000801000实施例21、供试品溶液的制备：取维生素K1滴剂胶囊10粒，将内容物倾入100ml量瓶中，囊壳用正己烷分次洗涤，洗液并入量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀。
[0021]2、维生素K1对照品溶液制备：取维生素K1对照品适量，精密称定，加正己烷溶解制备成浓度为1.0mg/ml的维生素K1标准储备液，然后用体积比为1∶9的中链甘油三酸酯
‑
正己烷溶液定量稀释配制配制成0.05μg/mL的对照品溶液。
[0022]3、采用高效液相色谱法进行测定，进样量为80 μl，高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：100
‑5‑
silica，250mm
×
4.6mm；流动相：以体积比为1000∶3∶0.5的正己烷
‑
正辛醇
‑
甲基叔丁基醚溶液为流动相A，以体积比为100∶5的正己烷
‑
正辛醇溶液为流动相B；采用梯度洗脱方式；检测波长： 260nm；流速为0.6～1.5毫升/分；检测器：二极管阵列检测器。
[0023]检测时间：45分钟。
[0024]柱温：40℃；梯度洗脱的方式为：时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0100015100035604050604050.11000
801000实施例31、供试品溶液的制备：取维生素K1滴剂胶囊10粒，将内容物倾入100ml量瓶中，囊壳用正己烷分次洗涤，洗液并入量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀。
[0025]2、维生素K1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种维生素K1滴剂有关物质的测定方法，其特征在于：采用高效液相色谱法测定，其色谱条件为：色谱柱：硅胶填充柱；流动相：以体积比为1000∶1
‑
3∶0.1
‑
0.5的正己烷
‑
正辛醇
‑
甲基叔丁基醚溶液为流动相A，以体积比为92
‑
100∶2
‑
5的正己烷
‑
正辛醇溶液为流动相B；采用梯度洗脱方式；检测波长：240
‑
260nm；流速为0.6～1.5毫升/分。2.如权利要求1所述的维生素K1滴剂有关物质的测定方法，其特征在于：所述的梯度洗脱的方式为：时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0100015100035604050604050.11000801000。3.如权利要求2所述的维生素K1滴剂有关物质的测定方法，其特征在于：所述的色谱条件为：流动相：甲醇
‑
水体积百分比96
‑
100:1
‑
3；以体积比为1000∶1.4∶0.2的正己烷
‑
正辛醇
‑
甲基叔丁基醚溶液为流动相A，以体积比为96∶4的正己烷
‑
正辛醇溶液为流动相B；检测波长：254nm；流速为0.6～1.5毫升/分。4.如权利要求1<...

【专利技术属性】
技术研发人员：庞萍，李玉娜，黄德馨，莫伟，
申请(专利权)人：广西铭磊维生制药有限公司，
类型：发明
国别省市：