一种pigg基因敲除斑马鱼神经发育障碍模型及其构建方法和应用技术

本发明专利技术提供用于CRISPANT特异性敲除斑马鱼pigg基因构建斑马鱼神经发育障碍模型的sgRNA组合，序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，通过CRISPANT技术，在斑马鱼pigg基因第2号外显子sgRNA1上插入9bp片段同时缺失4bp片段，sgRNA2上T

【技术实现步骤摘要】
一种pigg基因敲除斑马鱼神经发育障碍模型及其构建方法和应用


[0001]本专利技术涉及基因敲除
，具体涉及一种pigg基因敲除斑马鱼神经发育障碍模型及其构建方法和应用。

技术介绍

[0002]CRISPR(clustered,regularly interspaced,short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒DNA或其他外源DNA的免疫机制。在细菌及古细菌中，CRISPR系统共分成3类，其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白(Cas蛋白)共同发挥作用，而Ⅱ类系统只需要一种Cas蛋白即可，这为其能够广泛应用提供了便利条件。目前，CRISPR/Cas9系统应用最为广泛。研究人员发现使用多个sgRNA靶向同一基因，可以更大限度地提高编辑效率，并将这种方法命名为CRISPANT技术。
[0003]在前期的癫痫患者的全外显子组测序(WES)结果中，筛选到可能引起神经发育障碍的基因PIGG(基因编号为：Gene ID:54872)。斑马鱼作为脊椎动物，具有复杂的神经系统，遗传结构与人类相似，约70本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种sgRNA组合，其特征在于，所述sgRNA组合是用于CRISPANT特异性敲除斑马鱼pigg基因构建斑马鱼神经发育障碍模型的sgRNA组合，其序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。2.根据权利要求1所述的一种sgRNA组合，其特征在于，所述敲除斑马鱼pigg基因是在斑马鱼pigg基因第2号外显子sgRNA1上插入9bp片段同时缺失4bp片段，sgRNA2上T
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A碱基替换同时缺失2bp片段，其中，9bp插入片段序列如SEQ ID NO.7所示，4bp缺失片段序列如SEQ ID NO.8所示，2bp缺失片段序列如SEQ ID NO.9所示。3.一种斑马鱼神经发育障碍模型，其特征在于，所述斑马鱼神经发育障碍模型是利用权利要求1所述的sgRNA组合敲除斑马鱼pigg基因来构建。4.根据权利要求3所述的一种斑马鱼神经发育障碍模型，其特征在于，所述敲除斑马鱼pigg基因是在斑马鱼pigg基因第2号外显子sgRNA1上插入9bp片段同时缺失4bp片段，sgRNA2上T
‑
A碱基替换同时缺失2bp片段，其中，9bp插入片段序列如SEQ ID NO.7所示，4bp缺失片段序列如SEQ ID NO.8所示，2bp缺失片段序列如SEQ ID NO.9所示。5.一种构建斑马鱼神经发育障碍模型的试剂盒，其特征在于，包括如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的sgRNA组合。6.根据权利要求5所述的一种构...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘静，刘乐，叶鑫，
申请(专利权)人：苏州赛美科基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：