一种纤维素酶表达相关的转录抑制因子55274及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体提供了纤维素酶表达相关的转录抑制因子55274，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1，编码核苷酸序列如SEQ ID NO.2，对于纤维素酶活性表达具有调节作用。本发明专利技术还提供了在产纤维素酶的宿主菌中下调所述转录抑制因子55274的表达或活性，提高产纤维素酶的宿主菌中纤维素酶活性的方法。在宿主菌中抑制转录抑制因子55274的表达可提高宿主菌的蛋白表达量和纤维素酶酶活，为提高纤维素酶产量，降低纤维素酶成本，实现纤维素有效利用提高了新途径。用提高了新途径。用提高了新途径。

【技术实现步骤摘要】
一种纤维素酶表达相关的转录抑制因子55274及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种纤维素酶表达相关的转录抑制因子55274及其应用。

技术介绍

[0002]纤维素是自然界中存在最广泛、最丰富的碳水化合物，作为地球上数量最大的可再生资源，纤维素的利用效率却远远低于社会发展的要求，纤维素酶的高成本仍然是纤维素生物炼制的主要瓶颈之一。
[0003]里氏木霉(Trichoderma reesei)是公认的纤维素酶高产菌株，也是纤维素酶生产工业菌株的主要来源，其混合发酵液中，纤维二糖水解酶的表达占胞外总分泌蛋白的50％以上。在里氏木霉中，纤维素酶的表达受多个调控途径的影响。其中，主要调控是发生在转录水平，包括主要激活因子Xyr1、ACEII和Hap2/3/5，抑制因子Cre1和ACEI，以及其他新发现的Ace3、Vib1、Azf1、Rce1等各自的转录因子的协同调控。已知里氏木霉有中500多个转录因子，近几十年，只发现了几个对转录调控改造有明显效果的转录因子。因此，继续挖掘新型转录因子并对其进行基因工程改造提高纤维素酶的表达，显的尤为重要。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是克服现有技术中纤维素酶表达受制约的问题。
[0005]为此，本专利技术提供了一种纤维素酶表达相关的转录抑制因子55274，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0006]SEQ ID NO.1：
[0007]MEEPAVTTTNASLPEPQGSSSQQNDGGKDEANRKKTGTRKRTKTGCLTCRRRRIKCDEGRPICHNCIKSRRECEGYSQRVIFKEPLGSFSSPFNQAIYPGPPSIVDESLATHRQSSRGLFPAIAPRPPTFDQRHHGLPLQSSAAPYQQQYHHEPLVQGSSAYNMGPGQLLQAPYNAQFPNPLLATEVDGGHAHYTHAPPEAQFFSIQDGGPARDMLGDFRRLTSDHALNVHTGAAMTQPLNDRWGLDMLDDEASLPDSDDDLPDVRGNLLPIKSMVPERWTMSAVDANVFSAFAQNDDVLAHMETPYSSEFWASGLNTIFMHFINVTGPGISIFEGDISCASQRARSSTAAGTGQSLWSYNPPTAALRHYHRAIRRIAKNVKSPSRRTQPATLAATLLLGYFEVWSSDHTKWCNHLFGARILFREMSLGDMTRACFPAKRMRQRREAGGYQLGHVSSYFYHSHAHAAPAQSGQRSLDYGFLNAITGLAVSPEDYGDAEHQPSDERRSPVSDKEIERYDIICDLFWWYCKMDVYQSILGGTRLFMEYEHWTQIPPRAPFSTYSSAYGTYDHLILLLGRLSDFVSKDLSRKQKVIDAQCGGAGTGSPPMFPGMFPMFGKVQAPMGFSPPRDGTPHSDSQEDLDPEASYEAALQEWNAIYHSFEVFKSRLGPEFQPLGDELDGQTRTKTPFGDPIYFRTYSIAGIWMNYYMGFIHLYRSHPSMPPVAMRAAGMTAKKTAAFALKIGQIASGLAADCSEYTEINTYLGAALIESSFCVFVAGIQYNDTAQRHWVIQRMHDVARLTGWQSAMQIACGCESAWIKACQMGGPEYARPTIINDISSTIWKNPRRIDKKIDELDSSEERRLVLAKAERTHYAIGILAIETELARLELRDDLN
[0008]具体的，编码所述转录抑制因子55274的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0009]SEQ ID NO.2：
[0010]ATGGAGGAACCAGCTGTTACAACCACGAACGCCAGCTTGCCAGAACCCCAAGGGAGCTCATCTCAGCAG
AATGACGGAGGAAAAGATGAGGCGAATCGCAAGAAGACGGGAACAAGGAAGCGAACCAAAACTGGCTGTCTCACCTGTCGTAGGAGACGCATCAAATGCGACGAAGGCAGGCCGATTTGCCACAACTGCATCAAATCGAGACGAGAGTGCGAAGGATATAGCCAGAGGGTCATATTTAAGGAACCTCTTGGATCTTTCTCGTCCCCTTTCAACCAGGCAATATATCCTGGCCCGCCAAGTATCGTTGACGAGTCTTTGGCTACGCACCGTCAGTCTTCAAGGGGACTCTTTCCAGCCATCGCGCCGAGACCCCCGACCTTTGACCAGCGTCACCATGGTTTGCCTCTGCAGTCAAGTGCCGCGCCGTATCAGCAGCAATACCACCATGAACCGTTGGTACAAGGCTCTTCAGCTTACAATATGGGACCCGGCCAGTTGCTACAGGCACCTTACAACGCACAGTTTCCCAACCCCCTGCTTGCGACAGAGGTCGACGGAGGACATGCTCACTATACCCATGCTCCCCCCGAGGCACAATTCTTCTCTATCCAAGATGGCGGCCCTGCCAGAGATATGCTTGGCGATTTCCGTCGTCTGACCAGCGATCACGCTCTCAATGTCCACACAGGAGCCGCCATGACACAGCCCCTGAATGATCGGTGGGGACTAGACATGCTGGATGACGAAGCATCGTTACCCGATTCTGATGATGATTTACCGGACGTTCGAGGCAACTTGCTGCCAATTAAGAGCATGGTGCCAGAGCGTTGGACCATGAGTGCTGTGGATGCCAACGTCTTTTCCGCCTTTGCCCAGAACGACGATGTTCTGGCACACATGGAGACACCGTATTCTTCTGAATTCTGGGCTAGTGGCCTAAACACGATCTTCATGCATTTCATCAATGTGACTGGTCCTGGAATCTCAATCTTTGAAGGAGATATTTCTTGCGCTTCGCAGAGAGCCAGGAGCAGCACCGCAGCTGGTACTGGGCAGAGCTTATGGAGCTATAATCCCCCGACGGCAGCTCTGAGGCATTACCATCGTGCCATACGTCGTATAGCCAAGAATGTGAAGTCACCATCCCGGAGGACACAGCCCGCGACCCTAGCTGCTACTCTGCTGCTCGGATATTTTGAGGTTTGGTCATCTGATCACACCAAGTGGTGCAACCATCTGTTTGGTGCCAGGATCTTGTTCCGCGAAATGTCTTTGGGAGACATGACTCGGGCTTGTTTCCCAGCGAAGCGCATGAGGCAACGACGGGAAGCTGGAGGCTATCAACTGGGACATG本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种纤维素酶表达相关的转录抑制因子55274，其特征在于：所述转录抑制因子55274的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.如权利要求1所述的纤维素酶表达相关的转录抑制因子55274，其特征在于：编码所述转录抑制因子55274的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。3.一种提高产纤维素酶的宿主菌中纤维素酶活性的方法，其特征在于：在所述产纤维素酶的宿主菌中下调如权利要求1或2所述的转录抑制因子55274的表达或活性。4.如权利要求3所述的提高产纤维素酶的宿主菌中纤维素酶活性的方法，其特征在于，下调转录抑制因子55274的表达或活性包括：敲除或沉默转录抑制因子55274的编码基因，或抑制转录抑制因子55274的活性。5.如权利要求4所述的提高产纤维素酶的宿主菌中纤维素酶活性的方法，其特征在于：通过采用CRISPR/Cas9系统进行基因编辑，从而敲除转录抑制因子55274的编码基因。6.如权利要求5所述的提高产纤维素酶的宿主菌中纤维素酶活性的方法，其特征在于，所述基因编辑包括以下步骤：(1)设计gRNA序列；(2)构建p55274 donor质粒：所述p55274 donor质粒包括55274上游同源臂、pCre/Loxp
‑
hph和55274下游同源臂；(3)构建p55274sgRNA质粒：所述p55274sgRNA质粒包括pdc1P
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【专利技术属性】
技术研发人员：黄火清，张成杰，周樱，詹志春，辜玲芳，刘文悦，
申请(专利权)人：武汉新华扬生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：