一种检测血浆中硫酸阿米卡星浓度的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测血浆中硫酸阿米卡星浓度的方法，具体属于医药检测技术领域，该方法包括如下步骤：S01、在待检测的血浆样本中加入内标试剂，涡旋混匀后得到混合样本液。S02、在混合样本液中加入蛋白沉淀剂，经涡旋混匀、离心后得到上清液。S03、上清液经超高效液相色谱串联质谱检测，得到硫酸阿米卡星和内标物的色谱峰面积比值。S04、利用内标定量法，将血浆样品中硫酸阿米卡星和内标物的色谱峰面积比值代入已经建立的标准曲线中，即可计算出待测血浆中硫酸阿米卡星的浓度，其中，标准曲线以硫酸阿米卡星和内标的色谱峰面积比为纵坐标，以血浆中硫酸阿米卡星浓度为横坐标而制作。本发明专利技术提供的方法具有准确度高、灵敏性好、样品处理简单的优点。样品处理简单的优点。样品处理简单的优点。

【技术实现步骤摘要】
一种检测血浆中硫酸阿米卡星浓度的方法


[0001]本专利技术属于医药检测
，具体涉及一种检测血浆中硫酸阿米卡星浓度的方法。

技术介绍

[0002]抗菌药物的耐药已成为当今全球面临的最紧迫的公共卫生问题之一，其中作为引起人类感染性疾病的主要病原之一，革兰氏阴性菌对临床常用抗菌药有很强的耐药性，是当前最受关注的耐药菌之一。
[0003]硫酸阿米卡星作为氨基糖苷类抗生素，适用于革兰氏阴性菌以及耐药菌引起的感染。其作用机制是作用于细菌体内的核糖体，抑制细菌蛋白质合成，并破坏细菌细胞壁的完整性，致使细菌细胞膜破坏，细胞死亡。根据2015年中国细菌耐药性网站监测(CHINET)的数据显示，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β内酰胺酶菌(ESBL)的检出率分别达52.6％、31.7％。2021年临床分离出的3591株肠杆菌科细菌以及10686株铜绿假单胞菌中对阿米卡星的敏感率分别达95％和98％以上。此外，CHINET数据显示碳青霉烯耐药肠杆菌科的检出率呈逐年上升的趋势。另外，有研究者分析发现对氟喹诺酮类、β内酰胺类以及碳青霉烯类等抗菌药均耐药本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测血浆中硫酸阿米卡星浓度的方法，其特征在于，包括如下步骤：S01、在待检测的血浆样本中加入内标试剂，涡旋混匀后得到混合样本液；S02、在混合样本液中加入蛋白沉淀剂，经涡旋混匀、离心后得到上清液；S03、上清液经超高效液相色谱串联质谱检测，得到硫酸阿米卡星和内标物的色谱峰面积比值；S04、利用内标定量法，将血浆样品中硫酸阿米卡星和内标物的色谱峰面积比值代入已经建立的标准曲线中，即可计算出待测血浆中硫酸阿米卡星的浓度，其中，标准曲线以硫酸阿米卡星和内标的色谱峰面积比为纵坐标，以血浆中硫酸阿米卡星浓度为横坐标而制作；其中，标准曲线的制备步骤为：(1)在血浆空白样本中依次加入内标物标准试剂及不同浓度的硫酸阿米卡星标准试剂，涡旋混匀后分别得到相对应的标准曲线工作液；(2)以硫酸阿米卡星和内标的色谱峰面积比为纵坐标，以空白血浆中硫酸阿米卡星浓度为横坐标，绘制得到标准曲线。2.根据权利要求1所述的一种检测血浆中硫酸阿米卡星浓度的方法，其特征在于，在步骤(2)中，涡旋时间为20～60s。3.根据权利要求1所述的一种检测血浆中硫酸阿米卡星浓度的方法，其特征在于，在步骤S01中，内标试剂选用卡那霉素或依替米星或链霉素标准溶液。4.根据权利要求1所述的一种检测血浆中硫酸阿米卡星浓度的方法，其特征在于，在步骤S03中，蛋白沉淀剂是甲酸或三氟乙酸
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甲醇
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乙腈的混合物，其中甲酸或三氟乙酸：甲醇：乙腈的体积比为1～90：600～660：310～339。5.根据权利要求1所述的一种检测血浆中硫酸阿米卡星浓度的方法，其特征在于，在步骤S03中，涡旋时间为:1
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3min，温度条件为4℃
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15℃，8000
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15000r/min，离心时间为5
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10min。6.根据权利要求1所述的一种检测血浆中硫酸阿米卡星浓度的方法，其特征在于，在步骤S03中，测定的色谱条件为：色谱...

【专利技术属性】
技术研发人员：范菁，林彬，卢洪慧，臧发荣，梅建，王银辉，范炜斌，张润聪，张小丽，王友梅，
申请(专利权)人：长兴县人民医院，
类型：发明
国别省市：