【技术实现步骤摘要】
胃癌类器官的培养基及其无支架培养方法
[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别涉及一种胃癌类器官的培养基及其无支架培养方法。
技术介绍
[0002]胃癌是我国常见的消化系统恶性肿瘤之一，其发病率居各类肿瘤第二位。据最新中国癌症数据报告显示2020年我国胃癌新增计50万，死亡率高达约80％。胃癌使我国承受了巨大的医疗和经济负担，已然成为抑制国民健康提升的主要障碍。目前胃癌治疗的总体策略是以外科手术为主的综合治疗，手术切除肿瘤病灶仍是胃癌治疗的首选方法。但是，除早期胃癌，多数患者仍需要进行药物治疗，包括化疗、靶向治疗、免疫治疗及这些疗法的联合。但是，由于肿瘤具有高度的异质性，肿瘤抗原及突变位点的多样性，以及肿瘤微环境的组分差异大，使得各种治疗药物的敏感性存在明显个体差异，不同患者对不同抗肿瘤药物的敏感程度差异巨大。某些患者会对某些药物不敏感或耐药很难预知，如果这些不敏感或耐药的药物用于患者临床联合给药，患者可能承受的毒副作用往往大于其疗效，甚至导致药物治疗失败，引起无瘤期短，复发率高。同时，用药方案的不断更改，会导致患者...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种胃癌类器官的培养基，其特征在于：由以下浓度或体积百分比的成分组成：Advanced DMEM/F12补充至所需体积，且加入盐酸，调节pH值为6.6～6.8。2.一种胃癌类器官的无支架培养方法，其特征在于：利用序贯分离方法获得胃癌肿瘤原代细胞，胃癌肿瘤原代细胞为单个原代细胞与细胞簇混合物，将肿瘤原代细胞离心后，进行重悬，接种于低吸附细胞培养皿，37℃、5％CO2培养箱悬浮孵育10～24h；然后再次于离心条件下收集细胞沉淀，接种于超低吸附细胞培养孔板进行类器官构建，放入37℃、5％CO2培养箱中培养；2
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3天更换一次培养基。3.根据权利要求2所述的胃癌类器官的无支架培养方法，其特征在于：所述序贯分离方法采用酶消化结合机械分离的方法，至少包括以下步骤：剪碎的组织块中加入2
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5倍肿瘤组织量的组织消化液，在37℃条件下消化40分钟，过40μm细胞筛收集原代肿瘤细胞；最后，对剩余肿瘤组织，用5mL无菌注射器推杆胶头进行机械分离，使其通过40μm细胞筛，收集肿瘤原代细胞沉淀。4.根据权利要求3所述的胃癌类器官的无支架培养方法，其特征在于：所述序贯分离方法中按次序使用两种消化液，第一种消化液为含有0.2％Ⅰ型胶原酶、0.05
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0.2％Ⅳ型胶原酶的Hank's溶液，消化20分钟；第二种为0.25％Trypsin
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EDTA，消化20分钟。5.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗国安，范雪梅，王义明，尤金枝，
申请(专利权)人：浙江弘瑞医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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