一种应用于生猪养殖碳减排的噬菌体制造技术

本发明专利技术提供一种应用于生猪养殖碳减排的噬菌体，包括大肠杆菌噬菌体GDCP17和沙门氏菌噬菌体GSMP2233，大肠杆菌噬菌体GDCP17的保藏编号为：CCTCC M 2020664，沙门氏菌噬菌体GSMP2233的保藏编号为：CCTCC M2020661,保藏地址为：中国典型培养物保藏中心，保藏时间为：2020年10月30日，大肠杆菌噬菌体为10株，沙门氏菌噬菌体为5株，本发明专利技术提供了一种包含15株噬菌体的噬菌体组合物，15株噬菌体均能发酵较高效价，适用于大规模工业发酵生产和应用，能够提高猪的饲料转化率，降低料肉比，减少生猪养殖中饲料的浪费和有机物的排出，减少碳排放。放。

【技术实现步骤摘要】
一种应用于生猪养殖碳减排的噬菌体


[0001]本专利技术属于农业微生物技术应用领域，特别涉及一种应用于生猪养殖碳 减排的噬菌体。

技术介绍

[0002]噬菌体是一种靶向侵染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的 病毒。使用噬菌体技术不仅可以防治畜禽细菌性疾病，还可以改善动 物肠道健康，提高饲料转化率，减少有机物的排出，有效降低畜禽养 殖过程中温室气体的排放，符合我国当前实现碳减排的系列政策。
[0003][0004]申请CN111481574A公开了一种用于治疗仔猪腹泻的噬菌体组合制剂，其 可以减少仔猪的腹泻率，提高成活率，减少由于腹泻对仔猪造成的肠道损伤 及体重减轻。
[0005]葛龙等2020的研究表明，在基础日粮中加入噬菌体，能显著降低白羽肉 鸡料肉比，腹泻率和死淘率。
[0006]李培培等2017的研究表明改善猪日粮组成或加入营养添加剂、改进粪便 储存和处理方式是温室气体减排的主要途径。已有研究表明，当猪的日粮组 成发生变化，其营养成分的代谢途径、粪便成分等都随之变化，进而影响温 室气体的排放。
[0007]另外，樊霞等2006的研究证明，营养添加剂的使用，可提高畜禽日增 重10％～30％，而相对减少单位畜产品的CH4排放量10％～40％。
[0008]因而在保持猪生产性能稳定的情况下，通过优化日粮组成、使用营养添 加剂、提高饲料利用率等，可降低其温室气体的排放。而噬菌体不仅在细菌 性疾病的防治方面表现出优良的性质，其对猪肠道健康的调理也具有明显的 作用，可以提高饲料的转化率，降低料肉比，减少饲料的浪费和有机物的排 出，从而减少温室气体的排放，为此，本专利技术提出一种应用于生猪养殖碳减 排的噬菌体。

技术实现思路

[0009]本专利技术的目的之一是提供一种大肠杆菌噬菌体GDCP17和沙门氏菌噬菌体 GSMP2233的组合物；
[0010]本专利技术的目的之二是将所述的组合物应用于应用于生猪养殖碳减排。
[0011]为了实现上述目的，本专利技术是通过如下的技术方案来实现：一种 噬菌体组合物包括大肠杆菌噬菌体10株和沙门氏菌噬菌体5株，上 述菌株保藏时间为：2020年10月30日，保藏地址：中国.武汉.武 汉大学，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，其中包含大肠杆菌噬 菌体GDCP17(Escherichia coli phage GDCP17)，其保藏编号为： CCTCC NO:M 2020664，沙门氏菌噬菌体GSMP2233(Salmonella sppphage GSMP2233)，保藏编号为：CCTCC NO:M 2020661。
[0012]进一步的，通过最佳感染条件测定和发酵制备，发现该15株噬菌体均能 发酵较高
效价，适用于大规模工业发酵生产和应用。
[0013]进一步的，经裂解谱测定，15株噬菌体的组合物可裂解96株猪源的大肠 杆菌和沙门氏菌中的93株，裂解率为96.88％，说明15株噬菌体的组合物具 有很宽的宿主谱，可以防治由大肠杆菌和沙门氏菌引起的猪的细菌病，保护 肠道健康。
[0014]进一步的，通过噬菌体包被及微胶囊制备技术，使噬菌体制剂在经过饲 料高温制粒时仍能保持较高活性。温度高达80℃时，处理时间30min噬菌体 活性保持在80％以上。
[0015]进一步的，通过动物实验，发现噬菌体可提高猪的饲料利用率，减少饲 料的浪费和有机物的排出，降低料肉比，从而减少生猪养殖碳排放。
[0016]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0017]本专利技术提供了一种包含15株噬菌体的噬菌体组合物，15株噬菌体均能发 酵较高效价，适用于大规模工业发酵生产和应用。
[0018]本专利技术所述的噬菌体组合物能够提高猪的饲料转化率，降低料肉比，减 少生猪养殖中饲料的浪费和有机物的排出，减少碳排放。
具体实施方式
[0019]为使本专利技术实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解， 下面结合具体实施方式，进一步阐述本专利技术。
[0020]实施例1：噬菌体最佳感染条件测定及发酵制备
[0021]取噬菌体组合物及其对应的宿主菌，挑取宿主菌单个菌落，接种到盛有 3ml TSB培养液的试管中，于37℃过夜摇培，得到宿主菌悬液。将菌悬液以 1:100比例转接到l00ml TSB培养液中，将噬菌体稀释至一定的浓度并计数， 与宿主菌按照不同比例混合培养。培养结束后5000rpm离心l0min并收集上 清过滤除菌，测定噬菌体效价。实验重复3次。
[0022]结果如表1所示，大肠杆菌噬菌体浓度为105‑
107pfu/mL，宿主菌OD
600
为0.08
‑
0.1之间发酵效价较好，达10
10
pfu/ml以上，沙门氏菌噬菌体浓度 为105‑
107pfu/mL，宿主菌OD
600
为0.15
‑
0.25之间发酵效价较好，达10
10
pfu /ml以上。
[0023]表1最佳感染条件下噬菌体的发酵效价
[0024]噬菌体编号噬菌体浓度宿主菌OD
600
发酵效价GDCP17106pfu/mL0.0679.5x10
10
GDCP04106pfu/mL0.0815.7x10
10
GDCP05105pfu/mL0.0706.3x10
10
GDCP07107pfu/mL0.0627.2x10
10
GDCP10106pfu/mL0.0813.6x10
10
GDCP11106pfu/mL0.0884.9x10
10
GDCP12105pfu/mL0.0715.7x10
10
GDCP14105pfu/mL0.0706.3x10
10
GDCP15107pfu/mL0.0805.2x10
10
GDCP16106pfu/mL0.0812.9x10
10
GSMP2233106pfu/mL0.1802.3x10
11
GSMP02105pfu/mL0.1584.7x10
10
GSMP05106pfu/mL0.1766.6x10
10
GSMP06107pfu/mL0.2113.7x10
10
GSMP07105pfu/mL0.1645..1x10
10
[0025]实施例2：噬菌体组合物裂解率测定
[0026]采用点滴法来测定噬菌体的裂解谱，将上述15株效价高于5.0x109pfu/mL 的噬菌体发酵液，按照1：1的比例混合，制成噬菌体组合物。选取不同血清 型的猪源大肠杆菌61株、沙门氏菌35株，挑取单菌落分别接种于盛有3ml TSB 的试管中，160rpm培养8h，制得各株细菌菌液。取500μl菌悬液分别与TSB本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种噬菌体组合物，其特征在于，包括大肠杆菌噬菌体GDCP17和沙门氏菌噬菌体GSMP2233，大肠杆菌噬菌体GDCP17的保藏编号为：CCTCC M 2020664，沙门氏菌噬菌体GSMP2233的保藏编号为：CCTCC ...

【专利技术属性】
技术研发人员：张金鑫，王红玲，王喜亮，黄金梅，张秀玲，
申请(专利权)人：湖北中碳科技投资有限公司武汉格瑞农生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：