一种从鄂西香茶菜中提取的化合物1和化合物2及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及从鄂西香茶菜中提取的化合物1和化合物2及其制备方法与应用，有效解决从鄂西香茶菜中制备化合物，实现在制备抗炎药物中的应用问题，化合物1和化合物2的分子式分别为C

【技术实现步骤摘要】
一种从鄂西香茶菜中提取的化合物1和化合物2及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及医药，特别是一种从鄂西香茶菜中提取的化合物1和化合物2及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]鄂西香茶菜为唇形科香茶菜属植物，分布于我国的河南省西部、湖北省的西部及河北省南部等地，被当地人用作抗菌、抗炎和抗癌药物使用。其性凉，味辛、苦；归肝、肾经；有清热利湿、解毒消肿等功效。近年来，唇形科香茶菜属植物因含有结构新颖和生物活性好的二萜类成分而备受关注，部分化合物作为抗肿瘤候选化合物已进入研发阶段，如冬凌草甲素，毛萼香茶菜甲素等。遵循传统用法，同时结合对鄂西香茶菜的化学成分及活性研究，希望获得更多结构新颖、抗炎活性显著的新化合物。现已有鄂西香茶菜素作为Wnt信号通路抑制剂及抗癌药物的应用(申请号201310185250.2)、SARS等冠状病毒主蛋白酶的二萜类天然产物抑制剂及其筛选方法(申请号200710195754.7)中记载从鄂西香茶菜中筛选二萜类天然产物抑制剂的方法，但至今未见有从鄂西香茶菜制备具有抗炎活性的化合物1(isohenolide A)和化合物2(isohenolide B)，也未有鄂西香茶菜中哪些活性成分具有抗炎活性，并且如何从鄂西香茶菜中提出抗炎活性成分的公开报导。

技术实现思路

[0003]针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本专利技术之目的就是提供一种从鄂西香茶菜中提取的化合物1和化合物2及其制备方法与应用，可有效解决从鄂西香茶菜中制备化合物1和化合物2，实现在制备抗炎药物中的应用问题。r/>[0004]本专利技术解决的技术方案是，一种从鄂西香茶菜中提取的化合物1和化合物2，其分子式分别为C
22
H
28
O7和C
20
H
28
O6，不饱和度分别为9和7，结构式分别为：
[0005][0006]其制备方法包括以下步骤：
[0007](1)取干燥的鄂西香茶菜全草15kg，每次加体积浓度50～95％乙醇100～500L，回流提取1～4次，每次提取1～4h，合并提取液，减压浓缩至相当于生药量0.5～2.0g/mL的样品溶液；
[0008](2)在步骤(1)的样品溶液中加水5～10L分散成悬浮液，先用石油醚重复萃取3～10次，每次用量10～30L，充分振摇5min，静置分层，弃去石油醚层；水层继续用乙酸乙酯萃取3～8次，每次用量5～30L，充分振摇5min，静置分层，合并乙酸乙酯层，减压回收溶剂，得到干燥固体组分Fr.
ETOAc
(81.1～116.6g)；
[0009](3)组分Fr.
ETOAc
经80～300目硅胶柱色谱，硅胶柱r＝2～8cm、H＝10～50cm，用体积比100︰0、100︰2、100︰5、0︰1的石油醚
‑
丙酮进行梯度洗脱，每个比例洗脱2～10个柱体积，收集100︰5的洗脱液，减压回收溶剂，得到干燥粉末组分Fr.
ETOAc
‑
6(4.1～8.0g)；
[0010](4)将组分Fr.
ETOAc
‑
6用体积比1︰1的二氯甲烷
‑
甲醇溶解，经Sephadex LH
‑
20柱层析，柱r＝1.0～2.0cm、H＝60～120cm，洗脱溶剂为体积比1︰1的二氯甲烷
‑
甲醇，流速0.2～0.6mL/min，TLC检识合并第950～2450min的洗脱液，减压回收溶剂，得到干燥粉末组分Fr.
ETOAc
‑6‑
b(1.6～3.2g)；
[0011](5)将组分Fr.
ETOAc
‑6‑
b用甲醇溶解成50mg/mL的样品溶液，用ODS
‑
AQ柱在半制备HPLC上进一步分离，洗脱溶剂为体积比25︰75的乙腈
‑
水，流速3mL/min，分别收集30.23min、45.16min的色谱峰，减压回收溶剂，得到干燥粉末状的化合物1(47.0～80.2mg)和化合物2(39.6～59.4mg)。
[0012]本专利技术原料丰富，制备方法易操作，制备的产物经鉴定，是从鄂西香茶菜提取的具有抗炎活性的新化合物，该化合物可有效用于制备抗炎的药物，开拓了鄂西香茶菜的药用价值和商业价值，经济和社会效益巨大。
附图说明
[0013]图1为本专利技术化合物1、化合物2的分子结构式图。
[0014]图2为本专利技术化合物1、化合物2的关键HMBC相关图。
[0015]图3为本专利技术化合物1、化合物2的关键ROESY相关图。
[0016]图4为本专利技术化合物1、化合物2的ECD相关图。
[0017]图5为本专利技术的工艺流程图。
具体实施方式
[0018]以下结合具体情况对本专利技术的具体实施方式作详细说明。
[0019]本专利技术在具体实施中可由以下实施例给出。
[0020]实施例1
[0021]本专利技术一种从鄂西香茶菜中提取的化合物1和化合物2的制备方法，包括以下步骤：
[0022](1)取干燥的鄂西香茶菜全草15kg，每次加体积浓度70％乙醇300L，回流提取2次，每次提取2h，合并提取液，减压浓缩至相当于生药量1.5g/mL的样品溶液；
[0023](2)在步骤(1)的样品溶液中加水5L分散成悬浮液，先用石油醚重复萃取8次，每次用量20L，充分振摇5min，静置分层，弃去石油醚层；水层继续用乙酸乙酯重复萃取6次，每次用量20L，充分振摇5min，静置分层，合并乙酸乙酯层，减压回收溶剂，得到干燥固体组分Fr.
ETOAc
(101.5g)；
[0024](3)组分Fr.
ETOAc
经200目硅胶柱色谱，硅胶柱r＝4cm、H＝20cm，用体积比100︰0、
100︰2、100︰5、0︰1的石油醚
‑
丙酮进行梯度洗脱，每个比例洗脱5个柱体积，收集100︰5的洗脱液，减压回收溶剂，得到干燥粉末组分Fr.
ETOAc
‑
6(6.3g)；
[0025](4)将组分Fr.
ETOAc
‑
6用体积比1︰1的二氯甲烷
‑
甲醇溶解，经Sephadex LH
‑
20柱层析，柱r＝1.3cm、H＝90cm，洗脱溶剂为体积比1︰1的二氯甲烷
‑
甲醇，流速0.3mL/min，TLC检识合并第1350～1800min的洗脱液，减压回收溶剂，得到干燥粉末组分Fr.
ETOAc
‑6‑
b(2.5g)；
[0026](5)将组分Fr.
ETOAc
‑6‑
b用甲醇溶解成50mg/mL的样品溶液，用ODS
‑
AQ柱在半制备HPLC上进一步分离，洗脱溶剂为体积比25︰75的乙腈
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从鄂西香茶菜中提取的化合物1和化合物2，其分子式分别为C
22
H
28
O7和C
20
H
28
O6，不饱和度分别为9和7，结构式分别为：2.权利要求1所述从鄂西香茶菜中提取的化合物1和化合物2的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取干燥的鄂西香茶菜全草15kg，每次加体积浓度50～95％乙醇100～500L，回流提取1～4次，每次提取1～4h，合并提取液，减压浓缩至相当于生药量0.5～2.0g/mL的样品溶液；(2)在步骤(1)的样品溶液中加水5～10L分散成悬浮液，先用石油醚重复萃取3～10次，每次用量10～30L，充分振摇5min，静置分层，弃去石油醚层；水层继续用乙酸乙酯萃取3～8次，每次用量5～30L，充分振摇5min，静置分层，合并乙酸乙酯层，减压回收溶剂，得到干燥固体组分Fr.
ETOAc
；(3)组分Fr.
ETOAc
经80～300目硅胶柱色谱，硅胶柱r＝2～8cm、H＝10～50cm，用体积比100︰0、100︰2、100︰5、0︰1的石油醚
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丙酮进行梯度洗脱，每个比例洗脱2～10个柱体积，收集100︰5的洗脱液，减压回收溶剂，得到干燥粉末组分Fr.
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‑
6；(4)将组分Fr.
ETOAc
‑
6用体积比1︰1的二氯甲烷
‑
甲醇溶解，经Sephadex LH
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20柱层析，柱r＝1.0～2.0cm、H＝60～120cm，洗脱溶剂为体积比1︰1的二氯甲烷
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甲醇，流速0.2～0.6mL/min，TLC检识合并第950～2450min的洗脱液，减压回收溶剂，得到干燥粉末组分Fr.
ETOAc
‑6‑
b；(5)将组分Fr.
ETOAc
‑6‑
b用甲醇溶解成50mg/mL的样品溶液，用ODS
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AQ柱在半制备HPLC上进一步分离，洗脱溶剂为体积比25︰75的乙腈
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水，流速3mL/min，分别收集30.23min、45.16min的色谱峰，减压回收溶剂，得到干燥粉末状的化合物1和化合物2。3.根据权利要求2所述的从鄂西香茶菜中提取的化合物1和化合物2的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取干燥的鄂西香茶菜全草15kg，每次加体积浓度70％乙醇300L，回流提取2次，每次提取2h，合并提取液，减压浓缩至相当于生药量1.5g/mL的样品溶液；(2)在步骤(1)的样品溶液中加水5L分散成悬浮液，先用石油醚重复萃取8次，每次用量20L，充分振摇5min，静置分层，弃去石油醚层；水层继续用乙酸乙酯重复萃取6次，每次用量20L，充分振摇5min，静置分层，合并乙酸乙酯层，减压回收溶剂，得到干燥固体组分Fr.
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；(3)组分Fr.
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经200目硅胶柱色谱，硅胶柱r＝4cm、H＝20cm，用体积比100︰0、100︰2、100︰5、0︰1的石油醚
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丙酮进行梯度洗脱，每个比例洗脱5个柱体积，收集100︰5的洗脱液，减压回收溶剂，得到干燥粉末组分Fr.
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6；
(4)将组分Fr.
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6用体积比1︰1的二氯甲烷
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甲醇溶解，经Sephadex LH
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20柱层析，柱r＝1.3cm、H＝90cm，洗脱溶剂为体积比1︰1的二氯甲烷
‑
甲醇，流速0.3mL/min，TLC检识合并第1350～1800min的洗脱液，减压回收溶剂，得到干燥粉末组分Fr.
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‑6‑
b；(5)将组分Fr.
ETOAc
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b用甲醇溶解成50mg/mL的样品溶液，用ODS
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AQ柱在半制备HPLC上进一步分离，洗脱溶剂为体积比25︰75的乙腈
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水，流速3mL/min，分别收集30.23min、45.16min的色谱峰，减压回收溶剂，得到干燥粉末状的化合物1和化合物2。4.根据权利要求2所述的从鄂西香茶菜中提取的化合物1和化合物2的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取干燥的鄂西香茶菜全草15kg，每次加体积浓度95％乙醇100L，回流提取4次，每次提取1h，合并提取液，减压浓缩至相当于生药量2.0g/mL的样品溶液；(2)在步骤(1)的样品溶液中加水10L分散成悬浮液，先用石油醚重复萃取10次，每次用量25L，充分振摇5min，静置分层，弃去石油醚层；水层继续用乙酸乙酯重复萃取8次，每次用量25L，充分振摇5min，静置分层，合并乙酸乙酯层，减压回收溶剂，得到干燥固体组分Fr.
ETOAc
；(3)组分Fr.
ETOAc
经80目硅胶柱色谱，硅胶柱r＝6cm、H＝10cm，用体积比100︰0、100︰2、100︰5、0︰1的石油醚
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丙酮进行梯度洗脱...

【专利技术属性】
技术研发人员：池军，代丽萍，程恩，许二平，吴鸿，朱利利，李怡晓，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
国别省市：